当前课程知识点：Resistance to Antibacterial Agents > W3 Detection of resistant bacteria > W3.4 - Automated approaches current section > Video
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大家好
我的名字叫Laurence Armand
是Bichat-Claude Bernard医院
细菌实验室的负责人
同时我也供职于巴黎第七大学
在这个视频中
我们将讨论耐药细菌的探测
液基稀释测试和自动方法
抗生素敏感性测试
主要能通过两种方法进行：
运用琼脂培养基的扩散法
和采用一种液体介质的
液基稀释法
在这个视频中
我们将探讨液基稀释法
液基稀释法被用来
测定最小抑菌浓度
简称MIC
MIC是抑制细菌增长的
抗菌药物的最低浓度
在测定抗生素的活性时
MIC是个关键值
很长时间里
抗生素敏感性和MIC
是通过试管稀释来测定的
那么，如何进行呢？
首先
你要准备抗生素稀释
添加一个标准化的细菌接种体
不要忘记引入一个阳性对照试管
以确保细菌能在介质中生长
细菌和抗生素一夜间
就能培养出来
然后
你就会看到细菌生长
并读出MIC值
MIC值是由
观察不到细菌生长的第一个试管决定的
在这个例子中 I
细菌的MIC是每升2毫克
但在现实中，通常在1到2之间
用小型稀释盘进行的
该测试的小型化操作
使这个测试
更加实用
微量滴定板可以
像试管一样手动准备
但你也可以使用
商业化准备的稀释盘
里面含有冰冻或
冻干形态的抗生素
质量控制也纳入其中
而且它们更易于使用
但成本更高
MIC值可以肉眼读出
在这个例子中
A行中
细菌的MIC是每升64毫克
B行中
MIC超过每升128毫克
C行中
MIC低于每升0.25毫克
但当你得到MIC值时
你并不确切地知道
抗生素在引发感染的细菌上
是否有效
抗生素敏感性测试的目标是
预测抗生素疗法在活体内
的成功或失败
因此你需要对MIC结果
进行解释和分类
采用准则中的临床折点
分成敏感、中等和抗性
在这里我们采用的是
名为EUCAST的欧洲准则
但在某些病症中
MIC可以被用来调节
抗生素疗法和剂量
与纸片扩散法相比
液体培养法有一些优势和弊端
优势方面
如果你采用一个宽泛的稀释范围
就能测定出一个准确的MIC
对某些抗生素而言
这是唯一可采取的方法
比如革兰氏阴性菌中的
粘杆菌素（Colistin）
或葡萄球菌中的万古霉素
它是无法用扩散法测试的
非常重要的一点是
这种方法可以自动化
但也有一些弊端
感染更难被探测出来
而且抗生素之间的
协同作用和对立作用
也很难探测出来
我们已经看到稀释盘
能通过肉眼读出
但也可以采用半自动系统
得益于这些系统
你只需取出稀释盘
放入系统中
读取会比肉眼更快
而且更标准化
全自动化系统有一些不同
这些系统会培养和读取
与这类系统配套出售的
商业稀释盘
这些是手动注射的
可以得到更短的培养时间
标准化的读取
以及直接的敏感、中等
或抗性解释
因为所有准则中的规定
都纳入了系统中
全自动化系统有很多优势
就如我们所见
标准化的程序：
介质的内容、接种体的大小
培养的时间、质量控制的纳入
和标准化的读取工序
它能提供可重复性
很高的结果
它非常易于操作
而且人工成本也有所降低
有一点非常重要
它能降低结果的周转时间
因为培养和抗菌敏感性测试
都能在一天之内完成
这也有赖于实验室的组织
能够给病人带来很大益处
因为病人能得到
更快更好的治疗
出于所有这些原因
全自动化系统得到广泛使用
但也存在一些弊端
商业化的稀释盘不覆盖所有细菌
虽然涉及到最常见的细菌
某些抗性机制更难被探测出来
比如表现很弱的
碳青霉烯酶
它更昂贵
有机器的成本
以及药筒或稀释盘
但它颇具成本效益
如果考虑到对病人的好处
这个层面
总而言之
液基稀释法能够通过
采用一种液体介质
来测定MIC和抗生素敏感性
它是对某些抗生素而言
唯一可用的手段
它被广泛使用
因为可以自动化
得到可复制性高的成果
得益于全自动系统
获得抗生素敏感性测试结果
所需的时间得以缩短
感谢您对本课的关注
-W1-0 Introduction of week 1
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-W1.1 - Mode of action current section
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--Q1
-W1.2 - Origin and biosynthesis
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--Q2
-W1.3 - Impact on human health
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--Q3
-W1.4 - Antibiotherapy
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--Q4
-W1.5 - Veterinary usage
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--Q5
-Weekly test 1
-W2-0 Introduction of week 2
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-W2.1 - Resistance mechanisms
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--W2.1 - Questions
-W2.2 - Antibacterial resistance in the community and the hospital
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--W2.2 - Questions
-W2.3 - Epidemiology of bacterial resistance in Europe
--Video
-W2.3 - Questions
-W2.4 - Bacterial resistance in low and middle income countries
--Video
-W2.4 - Questions
-Weekly test 2
-W3-0 Introduction of week 3
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-W3.1 - Phenotypic approaches
--Video
-W3.1 - Questions
-W3.2 - Genotypic approaches
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-W3.2 - Questions
-W3.3 - In silico antibiogram: genomic approaches
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-W3.3 - Questions
-W3.4 - Automated approaches current section
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-W3.4 - Questions
-Weekly test 3
-W4-0 Introduction of week 4
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-W4.1 - Natural versus acquired Resistance current section
--Video
--Q4.1
-W4.2 - Origin of resistance genes current section
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--Q4.2
-W4.3 - Role of the environment
--Video
--Q4.3
-W4.4 - Transferability of resistance genes
--Video
--Q4.4
-W4.5 - Evolution of bacterial populations
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--Q4.5
-Weekly test 4
-W5-0 Introduction of week 5
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-W5.1 - Antibiotics stewardship
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--Q5.1
-W5.2 - Mastering resistance in hospitals current section
--Video
--Q5.2
-W5.3 - Economic cost of ABR current section
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--Q5.3
-W5.4 - Social consequences of bacterial resistance current section
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--Q5.4
-Weekly test 5
-W6-0 Introduction of week 6
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-W6.1 - Revisiting "old" molecules current section
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--Q6.1
-W6.2 - New targets : from leads to candidate
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--Q6.2
-Q6.3
-W6.4 - Phagotherapy
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-Q6.4
-W6.5 - CRISPR tools to study and fight antibiotic resistance
--Video
--Q6.5
-Weekly test 6
