当前课程知识点：植物组织培养技术 > 3. 植物组织培养快繁技术 > 3.4. 继代培养 > 3.4. 继代培养
大家好
在初代培养的基础上所获得的芽 胚状体
和原球茎等称为中间繁殖体
它们需要进一步增殖 形成一个群体
发挥快速繁殖的优势
继代培养是继初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程
1.继代培养中扩繁的方式
根据试管苗繁殖方式合理选择
包括无菌短枝扦插增殖
丛生芽增殖 胚状体增殖 原球茎增殖等
无菌短枝扦插
常用于有伸长的茎梢茎节较明显的培养物
这种方法简便易行 能保持母株特性
将待繁殖的材料剪成带1-2个叶的茎段
转入新的培养基中经一定时间培养后
可长成大苗再次继代时将大苗切段转接
重复芽生芽增殖的培养从而迅速获得较多嫩茎
这种增殖方式也称作“微型扦插”或“无菌短枝扦插”
丛生芽增殖
适于由茎尖或愈伤组织诱导出的芽丛分割后
转接在适宜的培养基上诱导不断形成新的腋芽
进而形成丛生芽继代时将丛生芽分割成单芽
或小芽丛转接至新的培养基中诱导增殖形成新的丛生芽
如此重复可实现快速大量繁殖的目的
胚状体增殖
状体本身可以以同样的方式继续增殖
即将诱导出的胚状体转接至新鲜培养基上
新的培养基与原培养基成分相同、
可在原有的胚状体上诱导出次级胚状体而增殖
原球茎增殖
胚状体本身可以以同样的方式继续增殖
胚状体本身可以以同样的方式继续增殖
新的培养基与原培养基成分相同
可在原有的胚状体上诱导出次级胚状体而增殖
另外
也可以把外植体材料如芽叶或愈伤组织转接到新的培养基上后
在诱导出新愈伤组织
进而在诱导出新的不定芽或不定器官但应注意的是
进而在诱导出新的不定芽 或不定器官但应注意的是
2. 继代培养的增殖系数
继代培养中使用的培养基,对于一种植物来说每次几乎完全相同
由于培养物在接近最良好的环境条件
在营养供应和激素调控下排除了其他生物的竞争
所以能够按几何级数增殖一般情况
在4～6周内增殖3～4倍是很容易做到的
如果在继代转接的过程中能够有效地防止菌类污染
又能及时的转接继代一年内就能获得几十万
甚至几百万株小苗
增殖系数,通常按接种的中间繁殖体块数或按瓶数计算
经过几个周期的培养看看能得到多少块中间繁殖体
或得到了多少瓶繁殖苗
这两种方法都比较准确不能简单地按接种1个芽
培养后能数出多少个芽来计算
3.继代培养的计划安排
估算试管苗的繁殖量以苗 芽
或未生根嫩茎为单位来计算
一般以瓶为计算单位
Y代表年生产量n代表年增殖周期
x代表每个周期增殖倍数M代表每瓶母本苗数
这样,一年可繁殖的试管苗数量是Y=M×Xn
如果每年增殖8次,即n=8
每次增殖4倍即X=4
每瓶8株苗, 即M= 8
全年可繁殖的苗是
年产量Y =8乘以4的8次方,为52万株,Y=8×48 =52（万株）
以上计算为理论数据
在实际生产过程中还有其它因素如污染
培养条件发生变化等会造成一些损失
实际生产的数据应比估算的数据低很多
这样,就要求我们要根据市场的需求
和种植生产时间制定全年生产计划
虽然这不是一件很复杂的工作但需要考虑全面
计划周密把正常因素和非正常因素都要考虑进去
制定出计划在实施的过程中减少意外事故的发生
这是非常值得注意的
4.影响试管苗继代培养的因素
驯化现象
一些植物的组织经长期继代培养
发生一些变化在前期的继代培养中
需要添加生长调节剂的植物材料
在后期加入少量 或不加入生长调节剂就可以生长
此现象就叫作“驯化”
并不是出现这种所谓的驯化现象就好
有时长期的“驯化”现象会得到适得其反的结果
如造成只长芽不长根，芽的增长倍数很高
但芽细弱，需在加入生长素的培养基上
继代培养数次,方可长出根
形态发生能力的丧失
在长时期的继代培养中
材料自身内部要发生一系列的生理变化
除了前面的讲到的“驯化”现象外
还会出现形态发生能力的丧失不同的植物
其保持再生能力的时间是不同的而且差异很大
在以腋芽或不定芽增殖继代的植物中
在以腋芽或不定芽增殖继代的植物中
较少出现再生能力丧失的现象
而以愈伤组织增殖的外植体材料
相对易出现形态发生能力的丧失
一般认为分化能力衰退主要有三个因素
一是愈伤组织中 含有的从外植体启动分裂时就有的成器官中心
当重复继代会逐渐减少或丧失
这意味着不能形成维管束只能保持无组织的细胞团
也有人认为 在继代培养过程中逐渐消耗了原有的与器官形成有关的特殊物质
二是形态发生能力的减弱和丧失
也可能与内源生长调节物质的减少或丧失有关
三是细胞染色体出现了畸变
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础--作业
-1.2. 植物组织培养的类型
-1.2. 植物组织培养的类型--作业
-1.3.植物组织培养的发展简史
-1.3.植物组织培养的发展简史--作业
-1.4. 植物组织培养的应用
-1.4. 植物组织培养的应用--作业
-2.1. 植物组织培养实验室布局
-2.1. 植物组织培养实验室布局--作业
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备--作业
-2.3. 植物组织培养常用仪器
-2.3. 植物组织培养常用仪器--作业
-2.4. 植物组织培养常用器皿
-2.4. 植物组织培养常用器皿--作业
-2.5. 培养基的基本成分及其作用
-2.5. 培养基的基本成分及其作用--作业
-2.6. 培养基的种类
-2.6. 培养基的种类--作业
-2.7. 培养基母液的配制与保存
-2.7. 培养基母液的配制与保存--作业
-2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
--培养基母液的配制
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
-2.9. 培养基的配制与灭菌
-2.9. 培养基的配制与灭菌--作业
-2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.11. 无菌操作
-2.11. 无菌操作--作业
-3.1. 外植体的选择
-3.1. 外植体的选择--作业
-3.2. 初代培养
--3.2.初代培养
-3.2. 初代培养--作业
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养--作业
-3.4. 继代培养
-3.4. 继代培养--作业
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作--作业
-3.6. 试管苗生根
-3.6. 试管苗生根--作业
-3.7. 试管苗驯化与移栽
-3.7. 试管苗驯化与移栽--作业
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽--作业
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径--作业
-3.10. 影响快繁因素的调控
-3.10. 影响快繁因素的调控--作业
-3.11. 污染
--3.11.污染
-3.11. 污染--作业
-3.12. 褐变
--3.12.褐变
-3.12. 褐变--作业
-3.13. 玻璃化
--3.13.玻璃化
-3.13. 玻璃化--作业
-3.14. 体细胞无性系变异
-3.14. 体细胞无性系变异--作业
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施
--3.15.植物组织培养快繁试验方案的设计与实施 .pdf
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施--作业
-4.1. 脱毒苗培育的意义
-4.1. 脱毒苗培育的意义--作业
-4.2. 脱毒的主要方法
-4.2. 脱毒的主要方法--作业
-4.3. 脱毒的其他方法
-4.3. 脱毒的其他方法--作业
-4.4. 脱毒苗的鉴定
-4.4. 脱毒苗的鉴定--作业
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖--作业
-4.6. 甘薯脱毒步骤
-4.6. 甘薯脱毒步骤--作业
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系--作业
-5.1.人工种子
--5.1.人工种子
--人工种子.pdf
-5.1.人工种子--作业
-5.2.试管微茎
--5.2.试管微茎
--试管微茎.pdf
-5.2.试管微茎--作业
-5.3.无糖培养技术
-5.3.无糖培养技术--作业
-考试题1
-参考文献
