当前课程知识点：药物分析 > 第十章 甾体激素类药物的分析 > 10.3 甾体激素类药物的含量测定 > 甾体激素类药物的含量测定
各位同学大家好
今天我们来学习
本章最后一节
甾体激素类药物的含量测定
根据甾体激素类药物的官能团
和分子结构特征
可采用比色法
紫外分光光度法
荧光法
气相色谱法和高效液相色谱法
测定含量
甾体激素类药物的分子结构
具有Δ4-3-酮基和苯环等
共轭体系
在紫外光区有特征吸收
比如肾上腺素皮质激素
孕激素等药物
在240nm波长处有最大吸收
这些特征吸收可用于
甾体激素类药物的含量测定
采用吸收系数法
或者对照品法定量
紫外分光光度法简便准确
曾经广泛用于
甾体激素类药物的含量测定
但是它的专属性不强
今天已经逐渐被
高效液相色谱法取代
在前面的结构学习当中
我们知道皮质激素类药物
C17-α-醇酮基具有还原性
在强碱性溶液中
能将四氮唑盐
定量还原为有色甲臢
在一定波长处有最大吸收
这一特点可用于
甾体激素类药物的比色含量测定
常用的四氮唑盐有两种
氯化三苯四氮唑
缩写为TTC
其还原产物为红色
又被称为红四氮唑
缩写为RT
另外一种是蓝四氮唑
其还原产物为暗蓝色
简称BT
四氮唑比色法广泛用于
肾上腺皮质激素类药物的含量测定
但测定时很多因素对反应都有影响
我们来看一下有哪些影响因素
取代基不同
会影响反应速率
该反应受水分影响大
含水量大时会使呈色速度减慢
因此采用无水乙醇
另外醛具有一定还原性
会消耗四氮唑盐
使吸光度增高
所以一般采用
无醛乙醇为溶剂
该反应速度
随着温度增高而加快
一般以室温条件下显色
反应过程中碱的种类
及加入顺序对反应也有影响
在各类有机碱中
以氢氧化四甲基铵最常用
一般先加四氮唑盐溶液
再加碱液
反应以及产物对光敏感
影响呈色强度
可加入试剂后往容器中充氮气
用避光容器
并置于暗处显色
同时在达到
最大呈色时间后
立即测定吸光度
有些药物当中存在赋形剂
对反应有比较显著的干扰
需要将制剂分离后
才能进行测定
在比色法含量测定中
还有一个很重要的方法
叫做柯柏反应比色法
它是指雌激素类药物
与硫酸-乙醇共热呈色
用水或者稀硫酸稀释后
重新加热发生颜色反应
并在515nm附近有最大吸收
可用于雌激素类药物的含量测定
该反应包括两步
第一步是雌激素与硫酸-乙醇共热
被氧化产生黄色
在465nm波长处有最大吸收
第二步是加水或者稀硫酸稀释
重新加热继续氧化
最终显桃红色
在515nm附近有最大吸收
在反应中加少量的铁盐
可加速呈色反应的速率
和提高稳定性
同时加入苯酚
可消除反应产生的荧光
并加速红色产物的形成
改进后的柯柏反应
被称为铁-酚试剂法
近年来
甾体激素类药物的分析
在很多大型体育赛事中
被广泛应用
主要监测运动员是否
使用了违禁药物
由于甾体激素类药物
在体内有多种代谢产物
需要专属性强
灵敏度高的方式
所以多采用
液相色谱-质谱联用的方法
来进行分析
今天的课程
我们为大家介绍了
甾体激素的含量测定方法
希望大家重点掌握四氮唑比色法
和柯柏反应比色法
在含量测定中的应用
同学们
再见
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-3.3 药物鉴别试验的方法-作业
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-4.1 一般杂质检查方法
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-5.1药物的定量分析--作业
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-6.2 巴比妥类药物的鉴别试验--作业
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-7.1 典型药物的分类及性质--作业
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-7.3 部分代表药的含量测定--作业
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-12.2 片剂和注射剂的分析--作业
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