2.9.培养基配制与灭菌慕课视频播放-植物组织培养技术-MOOC慕课视频教程-柠檬大学

大家好

关于培养基的配制与灭菌需要分两部分来讲解

第一部分培养基配制

在组织培养过程中培养基制备上的错误所造成的问题

比任何其他技术过失所造成的要多

因此必须按规定严格认真地进行配制培养基的操作

正确地理解培养基的表达式是至关重要的

大家请看,这是一个完全培养基的表达式

它表示的含义是:基本培养基为MS

每升培养基中添加6-BA的量为2 mg

NAA的量为 0.1mg蔗糖的量为30g

琼脂的量为6.5gpH调至5.8

配制培养基时依照配制的体积

计算各种母液和其它成分的需要量并写在纸上

加进一个成分后及时划掉一个

以防止漏加多加等现象发生

下面我们介绍培养基配制的具体步方法

第一步取出母液并按顺序放好

将有机营养物质母液溶化待用

将洁净的各种玻璃器皿如量筒

烧杯移液管移液枪和玻璃棒等放在指定位置

第二步取一只大烧杯

放入配制培养基总量的2/3左右纯水

照各种母液所需的量按顺序加入并不断搅拌

第三步加入蔗糖和琼脂

并加热使其完全溶解

第四步加入植物生长调节剂母液

注意只能添加可通过高压灭菌的生长调节剂

用纯水定容至培养基配制的量

第五步调节pH

用1摩尔每升氢氧化钠或盐酸进行调整

调整至所需要的设定值

若培养基配制的量较少时

可用0.1摩尔每升的氢氧化钠或盐酸调节pH

第六步

将培养基分装到培养器皿中并封好口

不同的培养容器选用不同的封口材料

三角瓶试管可以选用棉塞锡箔纸

广口瓶可以选用专用的封口膜或专用的瓶盖

一般专用的瓶盖中央焊有透气膜

利用瓶内外气体交换

第二部分培养基灭菌

养基灭菌根据培养基成分的特点选择合适的灭菌方法

第一种方法是高压蒸汽灭菌法

配制好的培养基带有各种杂菌

可以在分装到小的培养容器中或先不进行分装

直接盛装在较大容器内进行灭菌

灭菌方法与器具的高压蒸汽灭菌基本相同

但灭菌时间需要与灭菌的培养基量密切相关

多数情况下培养基高压灭菌20分钟可以满足要求

已分装好的培养基灭菌结束后将培养容器取出放在试验台上

待培养基凝固即可使用

未分装的培养基灭菌后

应在无菌条件下如在超净工作台中再分装到无菌培养器皿中

第二种方法是过滤除菌法

培养基中如果包含有热不稳定的成分

也就是加热后会降解的成分如吲哚乙酸

赤霉素尿素等需要用细菌过滤器过滤除菌

具体可以分为两种情况一是培养基全部过滤除菌

这种方法只适用于不含琼脂的液体培养基

二是将热不稳定的成分单独溶解

经过滤除菌后添加到经过高压蒸汽灭菌后的培养基中

使用这种方法时必须保证做到下面几点

一是需要过滤灭菌的溶液pH与培养基最终pH应当相当

二是在过滤之前所有成分应当完全溶解

三是在添加需过滤除菌的成分时

经过高压蒸汽灭菌那部分培养基的温度应当尽可能地低

对液体培养基来说降至室温比较合适

对琼脂固体培养基来说降到50℃左右

常用的过滤膜是硝酸纤维素滤膜

孔尺寸为0.45µm和0.22µm

这个尺寸能够除去溶液中微生物污染物同时液体相对容易流过

为防止滤膜被阻塞

以先用孔径0.45µm的滤膜过滤然后再用0.22µm的滤膜过滤

灭菌后的培养基应尽快地使其冷却一般不要立即使用

放置3天后没有出现真菌细菌污染

才可使用否则由于灭菌不彻底或封口材料的破损等原因造成培养材料的损失

暂时不用的培养基最好贮存于4～5℃的低温下

洁净无灰尘遮光的地方

含吲哚乙酸和赤霉素等的培养基应在配制1周内使用完

其他培养基也应在2周内使用完以免干燥变质

植物组织培养技术课程列表：

1.植物组织培养的认知

-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础

-- 1.1.植物组织培养的概念及理论基础

--1.1.植物组织培养的概念及理论基础.p

--1.1.植物组织培养的概念和理论基础PPT.

-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础--作业

-1.2. 植物组织培养的类型

--1.2.植物组织培养的类型

--1.2.植物组织培养的类型 .pdf

--1.2.植物组织培养的类型PPT.pdf

-1.2. 植物组织培养的类型--作业

-1.3.植物组织培养的发展简史

--1.3.植物组织培养的发展简史

--1.3.植物组织培养的发展简史.pdf

--1.3.植物组织培养发展简史PPT

-1.3.植物组织培养的发展简史--作业

-1.4. 植物组织培养的应用

--1.4.植物组织培养的应用

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--1.4.植物组织培养在生产发展中的应用PPT

-1.4. 植物组织培养的应用--作业

2.植物组织培养的基本设备与基本技术

-2.1. 植物组织培养实验室布局

--2.1.植物组织培养实验室布局

--2.1.植物组织培养实验室布局.pdf

--2.1.植物组织培养实验室设计PPT

-2.1. 植物组织培养实验室布局--作业

-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备

-- 2.2植物组织培养实验室的设备

-- 2.2.植物组织培养实验室的设备.pdf

--2.2.植物组织培养中常用仪器设备PPT

-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备--作业

-2.3. 植物组织培养常用仪器

--2.3. 植物组织培养常用仪器

--2.3.植物组织培养常用仪器.pdf

--2.3.植物组织培养常用的仪器PPT

-2.3. 植物组织培养常用仪器--作业

-2.4. 植物组织培养常用器皿

-- 2.4. 植物组织培养使用器皿

--2.4.植物组织培养使用器皿.pdf

--2.4.植物组织培养中常用的器皿和器械PPT

-2.4. 植物组织培养常用器皿--作业

-2.5. 培养基的基本成分及其作用

-- 2.5.培养基的基本成分及其作用

-- 2.5.培养基的基本成分及其作用.pdf

--2.5.培养基的基本成分及其作用PPT.

-2.5. 培养基的基本成分及其作用--作业

-2.6. 培养基的种类

--2.6.培养基的种类

--2.6.培养基的种类.pdf

--2.6.植物组织培养常用培养基的种类PPT

-2.6. 培养基的种类--作业

-2.7. 培养基母液的配制与保存

--2.7.培养基母液的配制与保存

--2.7.培养基母液的配制与保存.pdf

--2.7.培养基母液的配制与保存PPT

-2.7. 培养基母液的配制与保存--作业

-2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制

--培养基母液的配制

--2.8.演示培养基母液的配制.pdf

-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制

-2.9. 培养基的配制与灭菌

--2.9.培养基配制与灭菌

--2.9.培养基配制与灭菌.pdf

--2.9.培养基的配制与灭菌PPT

-2.9. 培养基的配制与灭菌--作业

-2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌

--2.10.操作演示2：培养基配制及高压灭菌

--2.10.演示培养基配制及高压灭菌.pdf

-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌

-2.11. 无菌操作

--2.11.无菌操作

--2.11.无菌操作.pdf

--2.11.无菌操作PPT

-2.11. 无菌操作--作业

3. 植物组织培养快繁技术

-3.1. 外植体的选择

--3.1.外植体的选择

--3.1.外植体的选择.pdf

--3.1.外植体的选择PPT

-3.1. 外植体的选择--作业

-3.2. 初代培养

--3.2.初代培养

--3.2.初代培养.pdf

--3.2.初代培养PPT

-3.2. 初代培养--作业

-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养

--3.3.操作演示3.外植体灭菌技术及初代培养

--3.3.演示外植体灭菌技术.pdf

-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养--作业

-3.4. 继代培养

--3.4. 继代培养

--3.4. 继代培养.pdf

--3.4.继代培养PPT

-3.4. 继代培养--作业

-3.5. 操作演示4: 继代培养操作

--3.5.操作演示4：继代培养操作

--3.5.演示继代培养操作.pdf

-3.5. 操作演示4: 继代培养操作--作业

-3.6. 试管苗生根

--3.6.试管苗生根

--3.6.试管苗生根.pdf

--3.6.试管苗的壮苗生根PPT.

-3.6. 试管苗生根--作业

-3.7. 试管苗驯化与移栽

--3.7. 试管苗驯化与移栽

-- 3.7.试管苗驯化与移栽.pdf

--3.7.试管苗驯化与移栽管理PPT

-3.7. 试管苗驯化与移栽--作业

-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽

--3.8.操作演示5：试管苗驯化移栽

--3.8.演示试管苗驯化移栽.pdf

-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽--作业

-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径

--3.9.提高组培苗移栽成活率的途径

--3.9.提高组培苗移栽成活率的途径.pdf

--3.9.提高组培苗移栽成活率的途径PPT

-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径--作业

-3.10. 影响快繁因素的调控

--3.10.影响快繁因素的调控

--3.10.影响快繁因素的调控.pdf

--3.10.植物组织培养快繁影响因素的调控PPT

-3.10. 影响快繁因素的调控--作业

-3.11. 污染

--3.11.污染

--3.11.污染.pdf

--3.11.污染PPT

-3.11. 污染--作业

-3.12. 褐变

--3.12.褐变

--3.12.褐变 .pdf

--3.12.褐变PPT

-3.12. 褐变--作业

-3.13. 玻璃化

--3.13.玻璃化

--3.13.玻璃化.pdf

--3.13.玻璃化现象PPT

-3.13. 玻璃化--作业

-3.14. 体细胞无性系变异

--3.14.体细胞无性系变异

--3.14.体细胞无性系变异 .pdf

-- 3.14.体细胞无性系变异PPT.

-3.14. 体细胞无性系变异--作业

-3.15. 快繁试验方案的设计与实施

--3.15.快繁试验方案的设计与实施

--3.15.植物组织培养快繁试验方案的设计与实施 .pdf

--3.15.组织培养快速繁殖最佳培养方案的筛选PPT.

-3.15. 快繁试验方案的设计与实施--作业

4. 植物组织培养脱毒技术

-4.1. 脱毒苗培育的意义

--4.1 脱毒苗培育的意义

--4.1 脱毒苗培育的意义.pdf

--4.1.脱毒苗培育的意义PPT.

-4.1. 脱毒苗培育的意义--作业

-4.2. 脱毒的主要方法

--4.2 脱毒的主要方法

--4.2 脱毒的主要方法.pdf

--4.2.脱毒的主要方法PPT.

-4.2. 脱毒的主要方法--作业

-4.3. 脱毒的其他方法

--4.3 脱毒的其他方法

--4.3 脱毒的其他方法.pdf

--4.3.组织培养脱毒的其他方法PPT.

-4.3. 脱毒的其他方法--作业

-4.4. 脱毒苗的鉴定

--4.4 脱毒苗的鉴定

--4.4 脱毒苗的鉴定.pdf

--4.4.脱毒苗的鉴定PPT.

-4.4. 脱毒苗的鉴定--作业

-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖

--4.5 脱毒苗的保存与繁殖

--4.5 脱毒苗的保存与繁殖.pdf

--4.5.脱毒苗的繁殖与保存PPT

-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖--作业

-4.6. 甘薯脱毒步骤

--4.6.甘薯脱毒步骤

--4.6.甘薯脱毒步骤.pdf

--4.6.甘薯脱毒步骤PPT

-4.6. 甘薯脱毒步骤--作业

-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系

--4.7.甘薯脱毒苗的繁育体系

--4.7.甘薯脱毒苗的繁育体系.pdf

--4.7.脱毒甘薯种苗繁殖体系PPT.

-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系--作业

5.拓展知识

-5.1.人工种子

--5.1.人工种子

--人工种子.pdf

-5.1.人工种子--作业

-5.2.试管微茎

--5.2.试管微茎

--试管微茎.pdf

-5.2.试管微茎--作业

-5.3.无糖培养技术

--5.3.无糖培养技术

--无糖培养技术.pdf

-5.3.无糖培养技术--作业

课程考核

-考试题1

参考文献

-参考文献

2.9.培养基配制与灭菌在线视频