当前课程知识点：植物组织培养技术 > 3. 植物组织培养快繁技术 > 3.5. 操作演示4: 继代培养操作 > 3.5.操作演示4：继代培养操作
继代转接
是植物组织培养快繁过程中
一个非常重要的环节
也是工作量最大的一项
是把初代培养形成的材料
进行分割转接入新的培养基上
诱导其继续扩大繁殖或分化的过程
因为不同的植物材料
其试管苗增殖方式不同
因而试管苗转接时其分割的方式也不同
下面我们通过草莓增殖试管苗
甘薯试管苗和八仙花叶片愈伤组织继代转接
为大家演示一下具体的操作过程
第一步超净工作台紫外灭菌
接种前20分钟
将酒精灯 手术刀 镊子
电热灭菌器无菌纸等置于超净工作台台板上
打开超净工作台风机电源调节风速
并打开紫外灯
进行超净工作台表面灭菌
灭菌时间为20分钟
然后关闭紫外灯保持黑暗10分钟
再打开照明开关
以防止一些细菌的光复活
第二步接种器械灭菌
打开电热灭菌器电源开关
设置温度为280℃左右
将手术刀 镊子 剪刀等工具
并插入电热灭菌器中
用蘸有75%酒精棉球擦拭双手 台面
点燃酒精灯
将冷却支架的横梁
用火焰灼烧的方法进行灭菌
然后将接种工具
从电热灭菌器中取出
放置在冷却架上冷却
第三步无菌转接操作
将要继代转接的试管培养材料
新的培养基
用酒精棉球擦拭后
置于超净工作台上
草莓增殖试管苗的分割方法
是将芽丛切割成小块
具体的方法是
在无菌条件下一手握住原培养瓶
在火焰的下风处
打开瓶盖
用无菌的镊子
将草莓芽丛苗取出
放置于无菌培养皿中无菌滤纸上
用镊子固定材料
剪去芽丛的叶片
用解剖刀
将草莓试管苗芽丛
纵向分割
切成一个个小的芽丛
然后打开新的培养瓶瓶盖
用镊子将小苗或小苗丛接种到新的培养基上
把培养瓶口在火焰处燎一燎
盖好瓶盖注意
切割材料时
一定把发黄的死掉的材料剪掉
而且切成的每个小团块
必须有芽存在否则
接种后材料因为没有生长点就不会生长
甘薯试管苗的转接
采用是无菌短枝扦插的方法
具体的方法是在无菌条件下
一手握住原培养瓶
在火焰下风处
打开无菌瓶苗的瓶盖
用无菌镊子将试管苗取出
用镊子固定材料
剪去苗上的叶片叶片弃掉不要
将无叶的甘薯苗茎剪成小段
每段必须有1个以上的节
也就是说必须有侧芽的存在
把材料接入培养基中
材料的接种要注意极性
一定是形态学上端向上
形态学下端向下不可接反
如果有的材料
剪掉叶片后不易区分上下
将苗段平接在培养基表面也是可以的
愈伤组织转接的方法
是将愈伤组织分割后
接入培养基表面
同样是在在无菌条件下
一手握住原培养瓶
在火焰下风处打开无菌瓶苗瓶盖
用无菌镊子将愈伤组织取出
放置于无菌培养皿中的无菌滤纸上
用镊子固定材料用手术刀
把新鲜的愈伤组织从原材料上切下来
分割成小块并转接到新的培养基中
老的材料包括原来的叶片
发黄老化的愈伤组织弃掉不要
根据培养目的的不同愈伤组织继代转接的培养基也不相同
有的寄代转接需要时进行增值培养
增加愈伤组织的量
有的诱导愈伤组织再分化形成芽或胚胎
继代转接时一定要注意
要严按照无菌操作规程来进行操作
在规范的前提下
尽可能的提高转接速度
在接种的过程中
接种工具要及时灭菌
避免交叉污染现象的发生
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础--作业
-1.2. 植物组织培养的类型
-1.2. 植物组织培养的类型--作业
-1.3.植物组织培养的发展简史
-1.3.植物组织培养的发展简史--作业
-1.4. 植物组织培养的应用
-1.4. 植物组织培养的应用--作业
-2.1. 植物组织培养实验室布局
-2.1. 植物组织培养实验室布局--作业
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备--作业
-2.3. 植物组织培养常用仪器
-2.3. 植物组织培养常用仪器--作业
-2.4. 植物组织培养常用器皿
-2.4. 植物组织培养常用器皿--作业
-2.5. 培养基的基本成分及其作用
-2.5. 培养基的基本成分及其作用--作业
-2.6. 培养基的种类
-2.6. 培养基的种类--作业
-2.7. 培养基母液的配制与保存
-2.7. 培养基母液的配制与保存--作业
-2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
--培养基母液的配制
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
-2.9. 培养基的配制与灭菌
-2.9. 培养基的配制与灭菌--作业
-2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.11. 无菌操作
-2.11. 无菌操作--作业
-3.1. 外植体的选择
-3.1. 外植体的选择--作业
-3.2. 初代培养
--3.2.初代培养
-3.2. 初代培养--作业
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养--作业
-3.4. 继代培养
-3.4. 继代培养--作业
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作--作业
-3.6. 试管苗生根
-3.6. 试管苗生根--作业
-3.7. 试管苗驯化与移栽
-3.7. 试管苗驯化与移栽--作业
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽--作业
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径--作业
-3.10. 影响快繁因素的调控
-3.10. 影响快繁因素的调控--作业
-3.11. 污染
--3.11.污染
-3.11. 污染--作业
-3.12. 褐变
--3.12.褐变
-3.12. 褐变--作业
-3.13. 玻璃化
--3.13.玻璃化
-3.13. 玻璃化--作业
-3.14. 体细胞无性系变异
-3.14. 体细胞无性系变异--作业
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施
--3.15.植物组织培养快繁试验方案的设计与实施 .pdf
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施--作业
-4.1. 脱毒苗培育的意义
-4.1. 脱毒苗培育的意义--作业
-4.2. 脱毒的主要方法
-4.2. 脱毒的主要方法--作业
-4.3. 脱毒的其他方法
-4.3. 脱毒的其他方法--作业
-4.4. 脱毒苗的鉴定
-4.4. 脱毒苗的鉴定--作业
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖--作业
-4.6. 甘薯脱毒步骤
-4.6. 甘薯脱毒步骤--作业
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系--作业
-5.1.人工种子
--5.1.人工种子
--人工种子.pdf
-5.1.人工种子--作业
-5.2.试管微茎
--5.2.试管微茎
--试管微茎.pdf
-5.2.试管微茎--作业
-5.3.无糖培养技术
-5.3.无糖培养技术--作业
-考试题1
-参考文献
