2.7色谱分离技术简介在线视频

同学们

我们来学习色谱分离技术

在这里我们简要的给大家

介绍色谱分离技术

色谱分析是我们分离和鉴定结构和物理、化学性质

相近的一些有机物质的方法

色谱分离技术具有高效

灵敏、准确的特点

广泛地应用在有机化学、生物化学以及其它

相关的科学研究和化工生产领域

色谱分析是基于分析样品各组分

在不相混溶的并做相对运动的两相

即流动相和固定相中的溶解度的不同

或在固定相上的物理吸附程度的不同

而使各组分进行分离的一种方法

常用的色谱分析方法有薄层色谱法

柱色谱法、纸色谱法、气相色谱法

高效液相色谱法

薄层色谱指的是，它是一种微量

快速、简便的分离方法

它通常用于分离混合物或鉴定、精制化合物

是近代有机分析化学当中用于

定性和定量的一种重要的手段

柱色谱法通过色谱柱来实现分离

色谱柱内装有固体吸附剂

液体样品从柱顶加入

在柱的顶部，被吸附剂吸附

然后从柱顶部再加入有机溶剂作为洗脱剂

由于吸附剂对各组分的吸附能力不同

各组分会以不同的速度进行下移

被吸附较弱的组份

在流动相里的含量比

被吸附较强的组分要高

它会以较快的速度向下移动

各组分随着溶剂

会按一定的顺序从色谱柱下端流出

我们可以用容器分别进行收集

从而达到分离的目的

柱色谱主要用于除去固体当中

含有少量的杂质的情况

第三种纸色谱，纸色谱属于分配色谱的一种

样品溶液点在滤纸上

通过层析而相互分开

吸附在滤纸上的水作为固定相

而含有一定比例的

水的有机溶剂作为流动相

展开时

样品内的各组份

由于它们在两相中的分配系数不同

就可以达到分离的目的了

所以纸色谱

是一种液液的分配色谱

它的优点是操作比较简便

而且比较便宜

所得的色谱图也可以长期保存

第四种气相色谱法，气相色谱是

以气体为流动相的色谱法

这个方法快速、高效

灵敏度很高

而且已经广泛用于沸点在500℃以下，热稳定性的

一些挥发物质的分离和测定

气相色谱的流动相是载气

固定相

则有固体与液体之分

一般固定相是固体的

称为气固色谱

固定相为液体的

称为气液色谱

气相色谱分离技术，是根据混合物分配在

固定相和流动相之间，各组分的

迁移性不同

而达到分离的目的

第五个，高效液相色谱

这是一种以液体为流动相的

柱色谱分离分析方法

高效液相色谱一般在室温下进行

目前已有80%的有机化合物

能采用高效液相色谱

进行分离、分析

特别是高沸点、难挥发

热稳定性差、相对分子质量高的

这些离子型有机化合物

都可以采用高效液相色谱分离

使用方法相对比较简单

分离效果较好

分离的速度也比较快

灵敏度比较高

需用样品和溶剂的量

都很少

气相色谱和高效液相色谱

在我们的分析化学实验和仪器分析实验当中

都有涉及

在这里我们就不再展开了

我们在这里重点给大家介绍的是

薄层色谱

薄层色谱是近代有机分析化学中

用于定性和定量的重要手段

它具有展开时间短、分离效率高

需要样品少的特点，是一种微量

高效、快速、简便的

色谱分离方法

它利用混合物中各组分在某一物质中的

解析或溶解性的不同

或者和其它亲和作用性能的差异

使混合物的溶液流经该种物质进行

反复的吸附或分配等作用

从而将各组分分开

达到分离的目的

各种化合物的极性不同

它们的吸附能力也不相同

会在展开剂上进行移动

进行不同程度的解析

根据原点至主斑点中心和

原点至展开剂前沿的距离

我们可以计算比移值

如图所示

比移值Rf值等于起始点和

展开的斑点之间的距离除以起始点和

溶剂前沿之间的距离

Rf值在0.15至0.75之间

能够达到良好的分离效果

否则，我们就应该调换不同的展开剂

进行重新的展开

薄层色谱的操作方法主要包括铺板、

点样、展开、显色、计算比移值

铺板指的是将吸附剂调成糊状

涂在玻璃板上

常用的吸附剂有硅胶和氧化铝

为了得到厚度均匀的涂层

也可以用涂布器进行铺层，铺好的薄层板

在室温晾干后置于烘箱内进行活化

一般活化温度在105℃到

110℃

保持30分钟

活化之后的板子应该放在干燥箱内保存

我们现在也经常会使用已经铺好硅胶的

标准的层析板来直接使用

第二步：点样

点样用的毛细管内径要小于1mm

管口平整

将样品溶于低沸点的溶剂中

配成溶液，点样前可先用铅笔在

小板上距一端5mm的地方

轻轻画一横线作为起始线

然后用毛细管吸取样品

在起始线上小心地点样

若在同一块板上点几个样，样品点的

间距距离应为5mm以上

大小要合适

一般斑点的

直径不超过2mm

点样用的毛细管不能够交叉使用

第三

展开，薄层色谱的展开

需要在密闭的容器中进行

将选择好的展开剂放入到展开缸中

使缸内空气饱和几分钟。点样的位置

必须在展开剂液面之上

当展开剂上升到薄层的前沿

也就是离前端5-10mm或者多组分

已明显分开时，取出薄层板

放平、晾干

用铅笔画出溶剂前沿的位置后

即可进行显色了

如果化合物本身有颜色

就可以直接观察它的斑点

如果它的本身无色

我们可先在紫外灯光下观察

有无荧光斑点

有苯环的物质

一般都有荧光斑点

用铅笔在薄层板上画出斑点的位置

如果在紫外灯下不显色的

我们也可以将薄层板放在含有少量

碘蒸气的容器中显色

用来检查显色点

显色以后要立即用铅笔标出斑点的位置

计算比移值Rf，准确地找出

原点、溶剂前沿

以及样品展开后

斑点的中心，分别测量溶剂前沿和样品

中心点在薄层板上移动的距离

从而求出比值Rf

同学们

色谱分离技术就简单学习到这里

再见