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同学们大家好
我们这一次课主要来学习
食品微生物检验质量控制的第二个标准
技术要求
这个技术要求 我们主要从人员
设施和环境条件 设备 试剂和培养基
标准物质和标准培养物 这几个方面进行要求
首先是人员方面
要求检验人员应具有相应的教育
微生物专业培训经历
具备相应的资质
能够理解并正确实施检验工作
检验人员应掌握实验室生物检验安全
操作知识和消毒知识
检验人员应在检验过程中保持个人整洁与卫生
防止人为污染样品
检验人员应在检验过程中遵守
相关预防措施的规定 保证自身安全
由于颜色视觉障碍的人员
不能执行涉及到辨色的实验
对设施和环境条件要求
实验室环境不应影响检验结果的准确性
实验室工作区域应与办公室区域明显分开
实验室工作面积和总体布局应
能满足从事检验工作的需要
实验室布局应采用单方向工作流程
避免交叉感染
实验室内环境的温度 湿度 照度
噪音和洁净度等
应符合工作要求
一般样品检验应在洁净区域
包括超净工作台或洁净实验室（局部百级 ）进行
洁净区域应有明显标识
病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室
biosafety level 2, BSL-2 中进行
实验室根据处理对象
一般分为1 2 3 4级
根据数字越大 级别越高
说明实验室对环境要求越苛刻
关于设备方面
实验设备应满足检验工作的需要
实验设备应放置于适宜的环境条件下
便于维护 清洁 消毒与校准
以确保工作性能和操作安全
实验设备应定期进行检查
检定 维护 保养
以确保工作性能和操作安全
实验设备应有日常性监控记录和使用记录
下面主要介绍食品微生物检验常用的几个仪器
首先是培养箱
箱内不能放入过热或过冷的物品
取放物品时应快速进行
并做到随手关闭箱门
内放一杯水 以保持湿度
培养物不能放在最底层
也不得放置过于拥挤
每月消毒一次
先用3%的来苏尔液涂布消毒
再用清水擦净
要注意 不得当烘箱使用
每天记录温度及湿度的变化
观察培养箱内温度
与设定温度是否一致
这个是超纯水装置以及盛水的容器
要定期或不定期清洁超纯水装置和盛装容器
每月对超纯水进行
微生物学质量检验
要求每毫升超纯水中细菌数
小于50 cfu/ml
高压灭菌锅是我们实验室常用的一种仪器
要求操作人员应了解蒸汽灭菌的原理
并遵守操作规则
灭菌锅的时间和温度指示的准确度
应满足使用要求
使用灭菌锅时 放入必要的监视指标
可选用121℃ 15 min或121℃ 30 min监视指标
如生物指标嗜热脂肪芽孢杆菌的耐受性 在121℃ 15 min
灭菌后 再培养观察有无细菌生长
对于生物安全柜
应定期对生物安全柜进行校准和性能确认
除了这些常见的仪器外
还需要用到很多无菌的器具
实验室需要使用的无菌器具应能
正确实施灭菌
无菌器具和器皿有明显标识
以便与非无菌器具加以区别
试剂和培养基方面
实验室应采购通过了质量管理体系认证等
有质量保证能力的厂商的产品
在培养基验收的方面
首先要做好验收工作
如记录培养基的数量 接收日期等
理化指标及微生物性能指标测试
理化指标包括pH 颜色
澄清度及凝胶稳定性等
微生物性能指标包括生长率
选择性和特异性
关于培养基的配制
做好培养基名称 批号 生产商
配制量 灭菌条件 pH
配制日期及配制人员等信息
以便溯源
实验用水 要求pH为5.5-7.5
25℃时电导率应不超过25μS/cm
水的菌落总数不应超过103 CFU/mL
定期采用平板计数法进行菌落总数测定
一般使用蒸馏水或三级水
称量 溶解和分装
推荐使用玻璃容器盛装培养基
不建议使用铜铁制品的容器
因铜铁制品在使用时会释放
影响培养基pH的金属离子
从而影响微生物生长
培养基的灭菌是非常重要的
建议使用湿热灭菌法
湿热灭菌法的灭菌效力比干热法强
因为湿热灭菌法的穿透力较大
灭菌应在不损害培养基有效成分的
条件下确保灭菌效果
一般采用121℃灭菌15-20 min
配置好的培养基应按说明书规定的条件进行灭菌
为验证灭菌效果
每次灭菌时需用嗜热芽孢杆菌等生物监测管
或压力蒸汽灭菌化学指示卡
对灭菌效果进行检测
需要注意 有些培养基无需经过高压灭菌
只需加热煮沸溶解或过滤即可
过度加热会降低其选择性
培养基的储存
干粉培养基需避光存放于阴凉干燥处
避免吸潮 氧化或污染
发生结块的培养基不可继续使用
灭菌后的培养基应做好标记
并尽可能在保存期内使用完
标准培养物 也就是菌株方面
应使用微生物菌种保藏专门机构
或同行认可的机构保存的
可溯源的标准或参考菌株
应对从食品 环境或
人体分离 纯化 鉴定的
未在微生物菌种保藏机构登记注册的
原始分离菌株（野生菌株）进行系统
完整的菌株信息记录
包括分离时间 来源 表型
及分子鉴定的主要特征等
实验室应保存能满足实验需要的标准
或参考菌株
在购入和传代保藏过程中
应进行验证试验
并进行文件化管理
同学们 本节课主要学习了食品微生物检验质量控制的
第二个要求 技术要求
谢谢大家
-1.1 Introduction
-2.1 Preparation of culture medium
--2.1 Preparation of culture medium
-2.2 Microbial separation techniques
--2.2 Microbial separation techniques
-2.3 Microbial inoculation techniques
--2.3 Microbial inoculation techniques
-2.4 Exercises
--Chapter 2 exercises
-3.1 Basic elements of food sample testing
--3.1 Basic elements of food sample testing
-3.2 Sample sampling scheme
-3.3 Sample sampling, transporting, processing, testing and report
--3.3 Sample sampling, transporting, processing, testing and report
-3.4 Exercises
--Chapter 3 exercises
-4.1 Detection of Aerobic Bacterial Count
--4.1 Detection of Aerobic Bacterial Count
-4.2 The enumeration of Coliforms
--4.2 The enumeration of Coliforms
-4.3 Exercises
--Chapter 4 exercises
-5.1 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅰ)
--5.1 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅰ)
-5.2 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅱ)
--5.2 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅱ)
-5.3 Exercises
--Chapter 5 exercises
-6.1 Qualitative method
-6.2 Plate counting
-6.3 The MPN method
-6.4 Exercises
--Chapter 6 exercises
-7.1 Moulds and yeasts count
-7.2 Exercises
--Chapter 7 exercises
-8.1 How to control the quality of food microbiology testing
--8.1 How to control the quality of food microbiology testing
-8.2 Quality control of food microbiology testing
--8.2 Quality control of food microbiology testing
-8.3 Requirements of process control
--8.3 Requirements of process control
-8.4 Exercises
--Chapter 8 exercises
-9.1 Modern food microbiology testing technology (Ⅰ)
--9.1 Modern food microbiology testing technology (Ⅰ)
-9.2 Modern food microbiology testing technology (Ⅱ)
--9.2 Modern food microbiology testing technology (Ⅱ)
-9.3 Exercises
--Chapter 9 exercises
