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第二节 微生物分离技术
微生物实验常用的分离技术包括倾注平板法
涂布平板法 平板划线分离法。
下面我们详细介绍一下这三种分离技术。
倾注平板法
以菌落总数倾注法为例说明。
称量25g 样品,加入225ml 稀释液中均质,
吸取 1ml 稀释样液至9ml 稀释液中,
进行十倍梯度稀释,
选择合适的2-3 个稀释梯度,每梯度取1ml 至无菌空皿中,
随后每皿倾注15-20mL保温
至46度的平板计数琼脂,
待琼脂凝固后,培养 计数。
涂布平板法
根据实际情况吸取 0.1-0.4ml 的
样品稀释液加入到平板中,
用灭菌涂布棒涂布整个平板。
待样液充分吸收,
再倒置于培养箱中培养。
以金葡涂布法为例说明。
取适宜样品稀释梯度,每个稀释度分别吸取
1mL 样品匀液以 0.3mL 0.3mL 0.4mL 接种量
分别加入三块 Baird-Parker 平板,
然后用无菌涂布棒涂布整个平板,
等样品匀液吸收后翻转平板,
按实验要求的培养温度和时长培养 计数。
平板划线分离法
用灼烧冷却后的接种环蘸取一环菌液,
以四区划线法为例:
打开皿盖,
将接种环上的菌种按图示进行划线,
一般在第一区划线完之后灼烧接种环,
再进行第二区划线。
每划完一区,旋转平板一定的角度,
后一区与前一区首尾相连,
但不接触其他区域,
其中第四区划线所占的范围最大。
注意:划线过程中接种环应与
培养基表面保持20°-30°的倾角,
力度适中,
以避免划破平板。
-1.1 Introduction
-2.1 Preparation of culture medium
--2.1 Preparation of culture medium
-2.2 Microbial separation techniques
--2.2 Microbial separation techniques
-2.3 Microbial inoculation techniques
--2.3 Microbial inoculation techniques
-2.4 Exercises
--Chapter 2 exercises
-3.1 Basic elements of food sample testing
--3.1 Basic elements of food sample testing
-3.2 Sample sampling scheme
-3.3 Sample sampling, transporting, processing, testing and report
--3.3 Sample sampling, transporting, processing, testing and report
-3.4 Exercises
--Chapter 3 exercises
-4.1 Detection of Aerobic Bacterial Count
--4.1 Detection of Aerobic Bacterial Count
-4.2 The enumeration of Coliforms
--4.2 The enumeration of Coliforms
-4.3 Exercises
--Chapter 4 exercises
-5.1 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅰ)
--5.1 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅰ)
-5.2 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅱ)
--5.2 Detection of Salmonella spp. GB4789.4-2016 (Ⅱ)
-5.3 Exercises
--Chapter 5 exercises
-6.1 Qualitative method
-6.2 Plate counting
-6.3 The MPN method
-6.4 Exercises
--Chapter 6 exercises
-7.1 Moulds and yeasts count
-7.2 Exercises
--Chapter 7 exercises
-8.1 How to control the quality of food microbiology testing
--8.1 How to control the quality of food microbiology testing
-8.2 Quality control of food microbiology testing
--8.2 Quality control of food microbiology testing
-8.3 Requirements of process control
--8.3 Requirements of process control
-8.4 Exercises
--Chapter 8 exercises
-9.1 Modern food microbiology testing technology (Ⅰ)
--9.1 Modern food microbiology testing technology (Ⅰ)
-9.2 Modern food microbiology testing technology (Ⅱ)
--9.2 Modern food microbiology testing technology (Ⅱ)
-9.3 Exercises
--Chapter 9 exercises