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微生物稀释倒平板技术在线视频

下一节:微生物稀释倒平板技术

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微生物稀释倒平板技术课程教案、知识点、字幕

稀释倒平板法又称浇注平板法

本节课主要介绍一下微生物的稀释倒平板分离法

教学目标

一、掌握倒平板技术,熟悉系列稀释原理

二、掌握稀释倒平板分离微生物的操作方法

教学重点、难点

稀释倒平板分离技术

一、稀释倒平板分离特点

稀释倒平板法先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释

如一比一百、一比一千、一比一万等

然后分别取不同稀释液少许

与已溶化并冷却至四十六摄氏度左右的营养琼脂培养基混合

摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中

待琼脂凝固后

制成可能含菌的琼脂平板

保温培养一定时间即可长出菌落

如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中

就可出现分散的单个菌落

这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的

随后挑取该单个菌落

或重复以上操作数次,便可得到纯培养

优点是菌落分布较为均匀

对微生物技术结果相对准确

吸收量为一毫升,较方便

缺点是不能观察菌落特征,操作相对麻烦

不适合好氧和对热敏感的细菌培养

热敏感菌有时会被烫死

而严格好氧菌也可能因为被固定在培养基中生长受到影响

一般用于菌落总数的计数

二、稀释倒平板分离操作

一、物品的准备

首先用百分之七十五的酒精对手及镊子、桌面进行消毒

点燃酒精灯

分别在三个九毫升的无菌水上

标注十的负一、十的负二、十的负三

取六套灭菌平皿

二、样品的稀释

用灭菌移液管准确量取牛奶样品一毫升

装入有九毫升标注十的负一次方无菌水的试管中

用手充分振荡,使微生物细胞分散,

即制成十的负一次方稀释液

再换用一只一毫升无菌吸管

吸取十的负一次方稀释液一毫升

移入装有九毫升标注十的负二次方无菌水的试管中

充分震荡使菌液混合均匀

即制成十的负二次方稀释液

再换一支无菌吸管

吸取十的负二次方稀释液一毫升

移入装有九毫升标注十的负三次方无菌水的试管中

即制成十的负三次方稀释液

三、倒混菌平板

将无菌培养皿分别编号十的负一、十的负二、十的负三

每一稀释度设两个瓶型

用一毫升无菌吸管按无菌操作

要求吸取十的负一次方稀释液各一毫升

分别放入编号十的负一次方的2个培养皿中

同时吸取十的负二次方稀释液各一毫升

分别放入编号十的负二次方的2个培养皿中

再吸取十的负三次方稀释液各一毫升

分别放入编号十的负三次方的两个培养皿中

然后在六个培养皿中分别倒入十五毫升

已融化并且冷却至四十六摄氏度左右的营养琼脂培养基

加盖后轻轻摇动培养皿

使样品与培养基混合均匀

置于桌面上

待凝固后即成平板,整个操作过程应严格按照无菌操作

四、保温培养

待平板完全冷凝后

将平板倒置三十六摄氏度的恒温培养箱中培养二十四到四十八小时

五、实验结果

如样品稀释浓度恰当,即可出现单个菌落

三、注意事项

一、整个过程要在无菌条件下进行

二、在梯度稀释时

每配置一个浓度梯度,要更换一只吸管

本节课内容就到这里,谢谢大家

食品微生物及其安全控制课程列表:

序言 认识微生物

-微生物的分类与特点

-微生物的分类及特点

-讨论:认识微生物与人类的关系

-堂堂测:微生物的分类及特点

任务一 微生物形态观察技术

-1-1 认识细菌

--细菌形态及结构

--细菌的形态与结构

--讨论:细菌的形态包括哪些?

--堂堂测-细菌

-1-2 认识放线菌

--放线菌

--讨论:结合生活实际,谈谈放线菌在生物发酵领域的功能?

--堂堂测:放线菌

--放线菌

-1-3认识霉菌

--霉菌

--霉菌

--讨论:霉菌在食品工业中有哪些应用?

--堂堂测:霉菌

-1-4 认识病毒

--病毒

--病毒

--讨论:比较病毒、细菌、霉菌的异同?

--堂堂测:病毒

-1-5 显微镜的使用

--显微镜的使用

--显微镜的使用

--讨论:显微镜的构成部件有哪些?

--堂堂测:显微镜的使用

-1-6 油镜的使用

--油镜

--油镜的使用

--讨论:油镜的原理是什么?

--堂堂测:油镜的使用

-1-7革兰氏染色

--革兰氏染色

--革兰氏染色

--讨论:细菌为何能染为红色和紫色?

--堂堂测:革兰氏染色

-1-8微生物大小

--微生物的大小

--微生物的大小测定

--讨论:目镜测微尺如何校正?

--堂堂测:微生物大小测定

任务二 微生物的消毒灭菌技术

-2-1 微生物的消毒灭菌技术

--微生物消毒灭菌技术

--微生物的消毒灭菌技术

--讨论:消毒、灭菌的区别是什么?

--堂堂测:微生物的消毒灭菌技术

-2-2 干热灭菌

--干热灭菌

--干热灭菌

--讨论:哪些物品适用于干热灭菌?

--堂堂测:干热灭菌

-2-3 高压蒸汽灭菌

--高压蒸汽灭菌

--高压蒸汽灭菌

--讨论:哪些物品适用于湿热灭菌?

--堂堂测:高压蒸汽灭菌

-2-4 紫外灭菌

--紫外灭菌

--紫外杀菌

--讨论:紫外线杀菌特点?

--堂堂测:紫外线杀菌

-2-5 药物杀菌

--药物杀菌

--药物杀菌

--讨论:生活中消毒你都用了哪些化学药剂?

--堂堂测:药物杀菌

任务三 微生物培养基制备技术

-3-1 微生物的营养与生长

--微生物的营养与生长

--微生物的营养与生长

--讨论:自养型微生物和异养型微生物的根本区别

--微生物的营养与生长

-3-2 微生物培养基

--微生物培养基

--微生物培养基

--讨论:配制微生物的培养基时要考虑哪些因素

--微生物培养基

-3-3 微生物培养基的制备

--微生物培养基的制备

--微生物培养基的制备

--讨论:牛肉膏蛋白胨培养基如何制备?在配制培养基的操作过程中应注意哪些问题?

--微生物培养基的制备

-3-4 物品包扎

--培养皿的包扎

--吸量管的包扎

--棉塞的制作

--试管、三角瓶的包扎

--物品包扎

--堂堂测:物品的包扎

--讨论:吸量管在包扎过程中需要有哪些注意事项

任务四 微生物接种技术

-4-1 超净工作台的使用

--超净工作台的使用

--超净工作台的使用

--讨论:超净工作台的使用

--超净工作台的使用

-4-2 微生物无菌技术

--微生物无菌技术

--微生物无菌技术

--讨论:如何保证在分离、转接及培养纯培养物时防止其他微生物污染

--微生物无菌技术

-4-3 微生物斜面接种

--微生物斜面接种

--微生物斜面接种

--讨论:如何在接种中贯彻无菌操作的原则

--堂堂测:斜面接种

任务五 微生物分离纯化技术

-5-1 微生物涂布技术

--微生物涂布技术

--微生物涂布技术

--讨论:涂布分离有哪些优点?

--堂堂测:微生物涂布技术

-5-2 微生物倒平板技术

--微生物稀释倒平板技术

--微生物稀释倒平板技术

--讨论:稀释倒平板分离有哪些注意事项?

--堂堂测:稀释倒平板技术

-5-3 微生物划线分离

--微生物划线分离

--讨论:划线分离中为什么必须要划完一组线后灼烧接种环?

--微生物划线分离

--堂堂测:微生物划线分离

任务六 微生物计数技术

-6-1 微生物的计数技术

--微生物的计数技术

--微生物的计数技术

--讨论:微生物的计数方法有哪些?

--堂堂测:微生物计数技术

-6-2 血球计数板计数

--血球计数板计数

--血球计数板计数

--讨论:使用血球计数板计数的适用范围?

--堂堂测:血球计数板计数

任务七 食品中的微生物

-7-1 食品的微生物来源、途径及危害

--食品的微生物来源、途径及危害

--食品的微生物来源、途径及危害

--讨论:在食品生产中哪些环节可能存在微生物污染?

--堂堂测:食品的微生物来源、途径及危害

-7-2 食品微生物污染与腐败变质的控制

--食品微生物污染与腐败变质的控制

--食品微生物污染与腐败变质的控制

--讨论:影响食品腐败变质的因素有哪些?在生产中如何控制?

--堂堂测:食品微生物污染与腐败变质的控制

-7-3 细菌的生化试验

--细菌的生化试验

--细菌的生化鉴定实验

--讨论:如何验证淀粉已被细菌水解

--堂堂测:细菌生化鉴定

任务八 食品微生物检验

-8-1 固态类样品的采集及预处理

--固体类样品采集与制备

--固态类样品的采集及预处理

--讨论:对于冷冻类食品如何取样?

--堂堂测:固体类样品的采集及预处理

-8-2 液态类样品的采集及预处理

--液体类样品采集与制备

--液态类样品的采集及预处理

--讨论:粘稠类的样品如何处理?

--堂堂测:液体类样品处理

-8-3 食品菌落总数测定

--食品菌落总数测定

--食品菌落总数测定

--讨论:CFU的含义?

--堂堂测:细菌菌落总数测定

-8-4 食品大肠菌群测定

--食品大肠菌群测定

--食品大肠菌群测定

--讨论:大肠菌群和大肠杆菌有何区分?

--堂堂测: 大肠菌群测定

-8-5 食品霉菌、酵母菌测定

--食品霉菌酵母检测

--食品霉菌、酵母菌测定

--讨论:霉菌酵母的培养温度是多少,与细菌有何区别?分析下原因?

--堂堂测:霉菌酵母测定

-8-6 食品微生物快速检测

--食品中大肠菌群快速检测

--讨论:大肠菌群快速检测适合在那些领域使用?

--堂堂测:大肠菌群快速检测

--大肠菌群快速检测

-8-7 罐头食品商业无菌检测

--罐头食品商业无菌检验

--讨论:什么是商业无菌?

--堂堂测:罐头食品商业无菌检验

--罐头食品商业无菌检测

-8-8 金黄色葡萄球菌快速检测

--金黄色葡萄球菌快速检测

--讨论:金黄色葡萄球菌有哪些危害?

--堂堂测:金黄色葡萄球菌快速检测

--金黄色葡萄球菌快速检测

任务九 食品生产环境微生物检验

-9-1 车间空气洁净度测定

--车间空气洁净度测定

--讨论:用沉降法测定空气中微生物数量时,如果空气污浊时,暴露时间是否应适当缩短?

--堂堂测:车间空气洁净度检测

--车间空气洁净度测定

-9-2 生产用水微生物检测

--生产用水微生物检测

--讨论:水样采集后如何中和余氯?

--堂堂测:生产用水微生物检测

--生产用水微生物测定

-9-3 车间接触面微生物检测

--车间接触面微生物检测

--讨论:工作台面与工人手如何取样?

--堂堂测:车间接触面微生物检测

--车间接触面微生物测定

任务十 食品微生物实验室结构与功能

-10-1 微生物检验室布局与设计

--微生物检验室布局与设计

--堂堂测:微生物实验室布局设计

--讨论:如果让你给一个小型的饮料企业设计一个微生物化验室,你该如何实施?

--微生物检验室布局与设计

期末考试

-食品微生物及其安全控制期末试题

微生物稀释倒平板技术笔记与讨论

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