当前课程知识点:食品微生物及其安全控制 > 任务八 食品微生物检验 > 8-6 食品微生物快速检测 > 食品中大肠菌群快速检测
今天就一起学习大肠菌群的快速检测方法
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸或醛
并产生β-半乳糖苷酶需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌
来源:该菌主要来源于人畜粪便
故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量
推断食品中有否污染肠道致病菌的可能
意义:大肠菌群存在于食品中
表明未作有效的消毒处理
加工后保存条件不良或消毒后又受到污染
快速检验这些细菌,有助于食品的卫生管理
维护消费者的食用安全
食品中大肠菌群的测定依据
GB 4789.3-2016 食品微生物学检验
大肠菌群MPN计数法
适用于大肠菌群含量较低的食品中大肠菌群的计数
检样,无菌称取二十五克或二十五毫升样品
于二百二十五毫升稀释液中,均质
十倍系列稀释
选择适宜三个连续稀释度的样品匀液
接种LST肉汤管
三十六加减一摄氏度培养24~48小时
不产气报告大肠菌群阴性
产气的接种于BGLB肉汤
三十六加减一摄氏度培养48小时
不产气的报告大肠菌群阴性
产气的报告大肠菌群阳性
由产气管数,查MPN表,结果报告
水样中大肠菌群的快速测定流程
检样,无菌称取一克或一毫升水
于九毫升稀释液中,均质
制成一比十的稀释液
十倍系列稀释
取出大肠菌群测试片做好标记
将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜
使用吸管将一毫升样液垂直滴加在测试片中央处
上层膜直接落下
使用压板凹面底朝下
放置在上层膜中央处,轻轻压下
使样液均匀覆盖于圆形培养面积上
拿起压板,静置至少1分钟以使培养基凝固
测试面朝上堆叠放于培养箱中
三十六加减一摄氏度培养24~48小时
大肠菌群在测试片上生长后产酸
pH指示剂使培养基颜色变深
在红色菌落周围有气泡者为大肠菌群
记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数
根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数
测试片可能会出现如下现象
没有任何菌落生长
不要计算圆形培养基外的菌落
当菌落数超过二百二十时
可选择其中一个或几个有代表性的小方格
计算平均菌落数
再乘以二十得到整个测试片的菌落数
当有许多气泡,培养基颜色变深暗
有很多小菌落时,记为多不可计
当有大量的非大肠菌群细菌存在时
测试片颜色呈黄色
食物颗粒多为不规则形状且不带气泡
注意气泡与人为气泡的区别
人为气泡多为规则形状,且不与菌落相连接
测试片采用可再生的水合物干膜
由上下两层薄膜组成
上层聚丙烯薄膜含有粘合剂、指示剂
及冷水可溶性凝胶
下层聚乙烯薄膜含有大肠菌群生长所需的VRB培养基
大肠菌群在发育时产生琥珀酸脱氢酶
将上层薄膜中的指示剂还原成红色非溶解性三苯甲臢
从而使细菌着色
另测试片表面覆盖的薄膜可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体
故测试片上红色菌落周围有气泡者,为大肠菌群
片法检测大肠菌群,简便易行,节省成本
结果准确,工作效率高
是微生物检验诸多快速方法中比较成熟的方法之一
已被广大卫生检验者所接受
目前已广泛应用于食品、餐饮业
卫生、环保、水质检验等
这节课我们学习了大肠菌群快速检测方法的流程检测原理
请认真思考以下问题
-堂堂测:微生物的分类及特点
-1-1 认识细菌
--细菌形态及结构
--细菌的形态与结构
--堂堂测-细菌
-1-2 认识放线菌
--放线菌
--堂堂测:放线菌
--放线菌
-1-3认识霉菌
--霉菌
--霉菌
--堂堂测:霉菌
-1-4 认识病毒
--病毒
--病毒
--堂堂测:病毒
-1-5 显微镜的使用
--显微镜的使用
--显微镜的使用
--堂堂测:显微镜的使用
-1-6 油镜的使用
--油镜
--油镜的使用
--堂堂测:油镜的使用
-1-7革兰氏染色
--革兰氏染色
--革兰氏染色
--堂堂测:革兰氏染色
-1-8微生物大小
--微生物的大小
--微生物的大小测定
--堂堂测:微生物大小测定
-2-1 微生物的消毒灭菌技术
--堂堂测:微生物的消毒灭菌技术
-2-2 干热灭菌
--干热灭菌
--干热灭菌
--堂堂测:干热灭菌
-2-3 高压蒸汽灭菌
--高压蒸汽灭菌
--高压蒸汽灭菌
--堂堂测:高压蒸汽灭菌
-2-4 紫外灭菌
--紫外灭菌
--紫外杀菌
--堂堂测:紫外线杀菌
-2-5 药物杀菌
--药物杀菌
--药物杀菌
--堂堂测:药物杀菌
-3-1 微生物的营养与生长
--微生物的营养与生长
-3-2 微生物培养基
--微生物培养基
--微生物培养基
--微生物培养基
-3-3 微生物培养基的制备
--讨论:牛肉膏蛋白胨培养基如何制备?在配制培养基的操作过程中应注意哪些问题?
--微生物培养基的制备
-3-4 物品包扎
--培养皿的包扎
--吸量管的包扎
--棉塞的制作
--物品包扎
--堂堂测:物品的包扎
-4-1 超净工作台的使用
--超净工作台的使用
--超净工作台的使用
--超净工作台的使用
-4-2 微生物无菌技术
--微生物无菌技术
--微生物无菌技术
--讨论:如何保证在分离、转接及培养纯培养物时防止其他微生物污染
--微生物无菌技术
-4-3 微生物斜面接种
--微生物斜面接种
--微生物斜面接种
--堂堂测:斜面接种
-5-1 微生物涂布技术
--微生物涂布技术
--微生物涂布技术
--堂堂测:微生物涂布技术
-5-2 微生物倒平板技术
--堂堂测:稀释倒平板技术
-5-3 微生物划线分离
--微生物划线分离
--微生物划线分离
--堂堂测:微生物划线分离
-6-1 微生物的计数技术
--微生物的计数技术
--微生物的计数技术
--堂堂测:微生物计数技术
-6-2 血球计数板计数
--血球计数板计数
--血球计数板计数
--堂堂测:血球计数板计数
-7-1 食品的微生物来源、途径及危害
--堂堂测:食品的微生物来源、途径及危害
-7-2 食品微生物污染与腐败变质的控制
--堂堂测:食品微生物污染与腐败变质的控制
-7-3 细菌的生化试验
--细菌的生化试验
--堂堂测:细菌生化鉴定
-8-1 固态类样品的采集及预处理
--堂堂测:固体类样品的采集及预处理
-8-2 液态类样品的采集及预处理
--堂堂测:液体类样品处理
-8-3 食品菌落总数测定
--食品菌落总数测定
--食品菌落总数测定
--堂堂测:细菌菌落总数测定
-8-4 食品大肠菌群测定
--食品大肠菌群测定
--食品大肠菌群测定
--堂堂测: 大肠菌群测定
-8-5 食品霉菌、酵母菌测定
--食品霉菌酵母检测
--讨论:霉菌酵母的培养温度是多少,与细菌有何区别?分析下原因?
--堂堂测:霉菌酵母测定
-8-6 食品微生物快速检测
--堂堂测:大肠菌群快速检测
--大肠菌群快速检测
-8-7 罐头食品商业无菌检测
--堂堂测:罐头食品商业无菌检验
-8-8 金黄色葡萄球菌快速检测
--堂堂测:金黄色葡萄球菌快速检测
-9-1 车间空气洁净度测定
--讨论:用沉降法测定空气中微生物数量时,如果空气污浊时,暴露时间是否应适当缩短?
--堂堂测:车间空气洁净度检测
-9-2 生产用水微生物检测
--堂堂测:生产用水微生物检测
-9-3 车间接触面微生物检测
--堂堂测:车间接触面微生物检测
-10-1 微生物检验室布局与设计
--堂堂测:微生物实验室布局设计
--讨论:如果让你给一个小型的饮料企业设计一个微生物化验室,你该如何实施?
-食品微生物及其安全控制期末试题