当前课程知识点：临床免疫学检验技术 > 第五章 流式细胞分析技术 > 第三节 流式细胞临床应用 > 流式细胞临床应用
讲了这么多流式细胞的相关知识
那么接下来我们看看
流式细胞在临床哪些方面有应用
流式细胞分析技术的临床应用
大致有以下4个方面应用
第一免疫状态监测
淋巴细胞亚群/树突状细胞
及其他免疫细胞检测
第二血液病
白血病及淋巴瘤免疫分型及微小残留检测
第三自身免疫性疾病
HLA-B27检测
第四在外周血细胞分析中的应用
五分类血常规的检测是
临床应用最广泛的流式细胞仪
首先我们看看第一个应用
免疫状态监测
免疫状态监测主要是看以下几个方面
第一淋巴细胞亚群
第二活化的T淋巴细胞
第三抗原特异性免疫细胞
第四调控性T细胞
第五树突状细胞
第六先天免疫细胞
我们前面的基础免疫课上过以后
相信大家都知道
根据功能
淋巴细胞主要分为
与体液免疫有关的B淋巴细胞
以及与细胞免疫有关T淋巴细胞
总T淋巴细胞和总B淋巴细胞可以用来
判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病
NK细胞
行使免疫监视功能
能够介导对某些肿瘤细胞和
病毒感染细胞的细胞毒性作用
淋巴细胞亚群分析
T淋巴细胞根据CD4
CD8表达差异
又分为辅助性T细胞和细胞毒性T细胞
辅助性T细胞
主要辅助其他淋巴细胞的发育和分化
产生细胞因子
参与固有和获得性免疫
根据产生的细胞因子和生物学效应不同
又可分为Th1
Th2
Th9
Th17
Th22和滤泡辅助性T细胞
细胞毒性T细胞
主要介导特异性细胞毒作用
在抗肿瘤免疫
抗病毒免疫
介导移植排斥反应和自身免疫疾病中
发挥了重要作用
我们来看看
淋巴细胞亚群检测数量及意义
到底有哪些意义呢
自身免疫性疾病是目前发病率越来越高的疾病
正常情况下
机体能够识别
自我
与自身成分不产生免疫应答
或仅产生微弱免疫应答
这种免疫耐受是维持机体免疫平衡的重要因素
在某些情况下
自身耐受遭到破坏
机体免疫系统对自身成分发生免疫应答
产生针对自身成分的自身抗体
或自身反应性T淋巴细胞
由自身免疫引起的疾病称为自身免疫性疾病
从这个表中我们可以看出
自身免疫病的CD8是增高的
而CD4是降低的
CD4/CD8比值降低
NK细胞降低
而感染了艾滋病毒后
艾滋病毒会迅速攻击人的T淋巴细胞
最明显的表现就是CD4是会严重下降的
CD8是增高的
CD4/CD8比值降低
所以AIDS感染后常规的免疫检测就是
流式细胞技术检测CD4和CD8的数量
然后根据情况来进行诊疗
而严重急性呼吸综合症SARS的感染
大家知道是在2002年年底被发现的
猛烈的程度真是不堪回首
这个病毒感染后人的T淋巴细胞CD3
CD4
CD8
NK细胞全部降低
人的免疫状态不堪一击啊
而慢性活动性肝炎肝硬化
及肿瘤的T淋巴细胞标志物的表现
跟自身免疫性疾病差不多
除了辅助性T淋巴细胞和细胞毒性T淋巴细胞外
还有一种T淋巴细胞就是调节性T细胞
是在自身免疫疾病
肿瘤和器官移植排斥反应中
具有免疫调节作用
接下来我们看看流式细胞计数在临床
血液病中的作用
白血病和淋巴瘤的免疫分型
微小残留
CD34+造血干/祖细胞的检测
阵发性睡眠性血红蛋白尿症
流式细胞的免疫分型
是白血病分型的重要指标
近年来白血病的免疫分型已成为
诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一
那么什么是白血病的免疫分型呢
血液细胞在生长发育过程的不同阶段表现为不同的形态
其表面还有不同的标记
处于不同阶段的细胞
如原始细胞
幼稚细胞
成熟细胞
其表面有不同的标记
好比不同的人有不同的脸部特征一样
国际上公认的通用白血病免疫分型
检测方法是流式细胞术
可根据细胞表面标记的不同
使用相应的抗体将细胞分类
判定属于那种类型的白血病
此种白血病的分型即为免疫分型
按照法美英三国的血液学专家组
也就是FAB协作组标准
形态学和免疫表型相结合
适合于白血病的分型诊断
但不适合用于确诊是不是白血病
诊断的主要标志是
第一个急性B淋巴细胞
第二个急性T淋巴细胞
第三个急性髓系白血病
第四个急性早幼粒细胞白血病
第五个急性髓系白血病部分成熟型
第六个急性粒-单核细胞白血病
或者是急性单核细胞白血病
第七个急性红白血病
第八个急性巨核细胞白血病
这张图是一例急性粒细胞白血病患者
白血病细胞
流式细胞分析技术做出来的免疫表型分析结果
R2中细胞占91.2%
表达CD13
CD34
CD33
HLA-DR
CD7等
微小残留检测
急性白血病患者经过诱导化疗或骨髓移植后
达到临床和血液学的完全缓解
但机体内仍然残存微量白血病细胞
这种状态称之为微小残留白血病
白血病微小残留病是白血病复发的主要根源
检测MRD可早期预测白血病复发的可能性
判断疗效
研究白血病发生发展的特征
阵发性睡眠性血红蛋白尿症
发病机制为X染色体上的PIG-A基因发生突变
引起糖化肌醇脂
锚合障碍
使GPI锚连蛋白缺乏
已证实的GPI锚连蛋白有10余种
用于PNH诊断的主要为CD55和CD59两种
如果在红细胞或白细胞上出现
CD55或/和CD59表达下降
且患者体内的红细胞呈现不均一性
可诊断为PNH
从此图可以看出流式细胞计数分析数据中
阵发性睡眠性血红蛋白尿症与正常人之间的差别
自身免疫性疾病
HLA-B27检测
HLA-B27是在有核细胞上表达的Ⅰ型MHC分子
在淋巴细胞表面尤为丰富
强直性脊柱炎
HLA-B27阳性率高达90%
其表达与强直性脊柱炎高度相关
在外周血细胞分析中的应用
五分类血细胞分析仪是
临床检验应用最为广泛流式细胞仪
根据FCM的原理
将FCM与激光散射技术
多角度偏振光散射技术
荧光技术
电导/射频技术等相结合
共同用于血细胞检测
从而使检测结果更加准确
可靠
血常规是临床上常见的血液检查
它的意义在于
可以发现许多全身性疾病的早期迹象
诊断是否有贫血
是否有血液系统疾病等
感染性疾病的早期诊断
CD64主要表达与巨噬细胞
单核细胞及树突状细胞表面
中性粒细胞表面几乎不表达
当机体患感染性疾病时
中性粒细胞表面CD64表达迅速升高
CD64用于感染性疾病的早期诊断
区分感染后活动性的自身免疫性疾病
监测抗菌药物疗效并预测术后感染
鉴别细菌感染和病毒感染
在肿瘤标志物检测中的应用
对肿瘤细胞DNA进行分析
以及对肿瘤相关标志物的检测
正常体细胞均具有较恒定的DNA二倍体含量
DNA二倍体含量改变以及DNA非整倍体细胞群出现
是细胞发生癌前病变或癌变的重要标志
通过对DNA进行染色标记
精确检测细胞DNA含量的改变
解析细胞周期
了解细胞的增殖能力
预测肿瘤的预后
指导化疗药物的选择
确定放疗强度
放疗时间
通过对细胞DNA异倍体的监测
还可以为肿瘤的早期诊断及鉴别诊断提供参考
FACS还可以检测分析肿瘤细胞的增殖活性标志分子
分化标志分子
凋亡标志分子以及免疫学标志物
用于肿瘤发病机制的研究
个性化治疗方案的制定以及预后判断等
影响流式细胞分析的主要因素有以下
首先是标本的因素
标本采集和单细胞悬液制备的质量控制
试剂
试剂指
荧光染色过程中的质量
仪器的质量控制
还有数据采集和分析过程中的质量控制
这一节我们一起学习了
流式细胞技术在临床的广泛应用
比如在机体免疫状态检测
血液疾病检测
感染性疾病感染早期检测
及肿瘤患者的肿瘤标志物检测方面的应用
以及影响流式细胞分析的主要因素
到这里这一章就全部结束
谢谢大家
-第一章章节作业
-第一节 抗原和抗体
--抗原和抗体
-第二节 抗原抗体结合反应
--抗原抗体结合反应
-第三节 抗体制备
--抗体制备
-第二章章节作业
-第一节 免疫凝集试验
--免疫凝集试验
-第二节 免疫沉淀试验
--免疫沉淀试验
-第三节 临床应用
--临床应用
-第三章章节作业
-第一节 放射免疫试验
--放射免疫试验
-第二节 荧光免疫试验
--荧光免疫试验
-第三节 酶免疫试验（上）
-- 酶免疫试验（上）
-第四节 酶免疫试验（下）
--酶免疫试验（下）
-第五节 化学发光免疫试验（上）
-第六节 化学发光免疫试验（下）
-- 化学发光免疫试验（下）
-第四章章节作业
-第一节 流式细胞分析及分选原理
-第二节 数据的显示与分析
-- 数据的显示与分析
-第三节 流式细胞临床应用
--流式细胞临床应用
-第五章章节作业
- 第一节 固相膜免疫分析技术
-第二节 固相膜免疫分析技术临床应用
-第三节 酶及荧光免疫组织化学技术
-第四节 亲和组织化学技术
--亲和组织化学技术
-第五节 免疫电镜技术
--免疫电镜技术
-第六节 影响因素及临床应用
-- 影响因素及临床应用
-第六章章节作业
-第一节 免疫浊度自动化分析
-第二节 发光免疫测定的自动化分析
-第三节 荧光免疫测定的自动化分析
-第四节 酶联免疫测定的自动化分析
-第七章章节作业
-第一节 免疫细胞分离
--免疫细胞分离
-第二节 淋巴细胞标志及亚群分类
-第三节 抗原提呈细胞的表面标志
-第四节 淋巴及其它免疫细胞功能检测技术
-第五节 免疫细胞表面标志和功能检测的临床应用
-第八章章节作业
-第一节 细菌真菌感染
--细菌真菌感染
-第二节 病毒感染
--病毒感染
-第三节 其他病原体感染
--其他病原体感染
-第九章章节作业
