3.2 医学科研的基本要素-研究对象在线视频

同学们好

我叫罗自强

来自中南大学基础医学院

在这一讲里面

我们和大家一起讨论

医学科研设计的基本要素的第二讲

研究对象

我们还是回到我们上一节

所看到的这张PPT

内皮素对肺Ⅱ型细胞

表面活性物质合成的调控

在这里面涉及到三个基本的要素

第一个要素被试因素

我们上一讲已经给大家介绍了

那么在这一讲里面

我们和大家讨论实验对象

首先我们和大家一起来讨论

实验对象选择的重要性

我们在做实验的时候

如果我们的实验对象

选择合理的话

我们能够很好的得到实验的结果

如果我们实验对象选择不敏感的话

那我们的被试因素加进去

我们可能会得不到

我们所想要的结果

因此正确的选择合适的实验对象

是我们实验研究成功的基础

我们以果蝇为例

基于果蝇的研究

它催生了四个诺贝尔奖

为什么呢

因为果蝇它只有四对染色体

数量少而且形态上面差异明显

果蝇的生活史很短

适合进行遗传学研究

而且果蝇的性状变异很多

而这些变异我们又有利于进行观察

当然果蝇又易于饲养

所以在早期有关遗传学的研究

我们都采用果蝇来进行

当然在这里面

今年2017年

有关研究昼夜节律控制的分子机制

也是基于果蝇的研究来进行的

那么实验对象的选择

我们基于下面几个原则

第一要选择敏感的

和反应性稳定的动物

你比如说在做过敏反应研究的时候

豚鼠就比其他动物要敏感

我们在做降压治疗的时候

我们通常选择二期高血压来进行

而一期因为高血压本身波动大

三期它通常对药物不太敏感

所以我们选择二期

在实验对象的选择

我们还要特别注意可行性

要是你得不到那不行

第三我们还要如果选择病人的话

我们要特别注意病人的诊断必须明确

如果以人体作为研究对象

那我们特别注意必须符合伦理学原则

因为如果以病人进行选择的话

那么我们必须要有诊断标准

必须要有排除标准

而且要必须还有剔除标准

所谓剔除标准是什么

也就是说病人开始试验了以后

什么样的病人的数据我不需要

我不要把它pass掉

当然剔除的病例数不能太多

如果太多超过总数的10%

那我们的结果可能就不可信

当然一般情况下

下列情况我们不作为临床研究的对象

你比如说存在影响结构的并发症

危重状态 多种疗法无效

危重状态 我们明白

我们不能把它作为研究对象

多种疗法无效

意味着什么

意味着这种病人他不敏感

对别人无效也许对你也不太有效

还有不配合者我们通常不选择

在选择的时候

我们特别要注意个体差异

以人体为研究对象

我们都要注意种族 性别

年龄 体重 职业等等等等

包括经济和社会因素

有可能对实验结果带来的影响

如果以病人作为研究对象

我们特别注意病种 病程 病期 病型

既往史以及护理条件

对研究结果带来的影响

如果以动物作为实验对象

那么我们必须要符合

动物实验的伦理学原则

你比如说三R原则

你比如说科技部

关于善待实验动物的指导性意见

当然作为动物选择

我们也一定要选择敏感的动物

你比如说

刚才谈到过敏反应用豚鼠

发热实验通常我们用家畜

当然做动物实验也要注意个体差异

比如说种属 品系 窝别

年龄 性别 营养状态等等

因为这些都可能影响我们的思想结构

为什么要选择同一窝别呢

因为在同一窝别的小鼠

他们都是在一个母亲体内出来的

那么它在妊娠期间

在胚胎发育期间

它都受到了同样的影响

因此它们的个体差异会小一些

对于实验动物来说我们还要注意

实验动物按照国家的规定

它可以分为一级 二级 三级 四级

一级就是普通的动物

我们教学上面用的是一级

那么二级是清洁动物

三级是没有特定病原体动物

四级是无菌动物

那么还得请大家注意

清洁动物不是普通的动物

给它洗一个澡

就变成了清洁动物

它是有一系列的微生物的标准的

它不能含哪些微生物

那么三级当然对微生物的要求

就会更严格

四级毫无疑问 无菌

国家科技部

它的规定实验动物管理条例

它对于动物的种属

特别是遗传背景等等

都是有确切的要求的

那么实验动物的选择

我们应该注意什么

第一 我们要注意保证

遗传学特征的一致性

第二 我们要合理选择

动物的种属和品系

也要注意动物的年龄和性别

为什么要注意种属和品系呢

因为不同的动物品种

它对不同的因素有不同的敏感性

我们这里举了一个例

比如说博来霉素引起肺纤维化造模的话

C57BL/6J的小鼠

就比BALB/c的小鼠要更加敏感

老年的小鼠比青年小鼠要敏感

雄性老鼠比雌性老鼠要敏感

那么这些告诉我们

我们在选择动物的时候

要注意选择合适的动物

当然在动物实验的过程中

在研究的过程中

我们还要注意适当的研究水平

比如说整体水平

离体水平 半体内实验

这些我们在后面的内容里面

我们将会有专题讲授

在这里我们就不再对它进行叙述

当然我们在做研究的过程中

我们使用的研究对象

要尽可能的力求一致

尽可能的减少个体差异

从而排除因为这种个体差异

这些非特异性的被试因素

对效果带来的影响

那么这个过程我们就说

受试对象要尽可能的纯化

作为动物来讲刚才已经谈到

种属 品性 窝别 年龄 性别 体重

对于人体来讲

我们需要注意的是种族 性别 年龄等等

病人一样的病程 病情

这些要尽可能的一致

使得我们的个体差异最小

当然实验对象过于纯化

使我们的结论的普遍意义也会受到影响

如果一个很纯的实验对象

那么我们的结论也只适合于

这一群的相类似的

这一群的人体或者是动物

它的普遍意义将受到质疑

那么对于病人来说

怎么来使得对象变纯化

我们选择典型的病例

轻重一致 诊断标准一致等等

这样的话使我们的对象

尽可能地减少个体差异

在实验的过程中

我们通常选用中等程度的病人

为什么 我们来看

纵坐标表示的是效果

比如说死亡率

横坐标表示的不同的轻重程度

我们来看作为安慰剂来讲的话

它的死亡率是很高的百分之九十几

而对于继续治疗的话

我们可以发现它的这个明显是有效的

这个有效主要在哪里

主要在中等程度的病人它有效

那我们来看对于

轻度的病人

对于重度的病人

虽然它能够降低它的死亡率

但是效果不明显

而只有中等程度的病人

它的降低死亡率最明显

所以我们选用中等程度的病人

来做实验

效果是最好的

然后再把这个研究的对象

再扩大到轻 中 重不同类型

下面我们就举一个例

关于雌激素替代治疗的一个争论

在上个世纪90年代以前

大家都一致认为绝经后的妇女

给予雌激素进行替代治疗是有好处的

它可以减少冠心病的发生率等等

这些各种各样的疾病

但是在1998年世界上面有一个研究

叫做WHI 这么一个研究

他们在观察雌激素替代治疗

观察了16000多例

年龄63岁平均

而且60岁到69岁的年龄占了45%

本来想观察8.5年

看看用了药以后

是不是能够减少心血管的危险性

但是最后发现用了药以后

反而心血管的这种危险性更大

所以我们的研究提前终止

他得出的结论是雌激素替代治疗

弊大于利 建议停止

那么这么一个实验结果出来了以后

就引起了大量的争论

为什么年龄选择不合理

大家想象一下

他的平均年龄是63岁

而60岁以上的人群占了将近50%

大家都知道在更年期的时候

雌激素是减少的

那么在这个时候你早期给它补充雌激素

就会有有益的作用

到了60多岁

该发的冠心病都已经出现了

你再给他补充怎么可能有效呢

所以这么一个争论的存在

就认为他的实验对象选择不合理

所以在这个过程中

有人就对这些病人重新进行观察

你比如说就注意到在50岁到59岁的病人

它显示出来了保护作用

到60岁以上的人反而显示出危险

这是第一

第二 另外一个它也进行了分析

那么这个分析就发现

发现什么呢

雌激素在治疗的过程中

对于平均年龄是55岁的这一拨人

它是能够对冠心病

对于冠状动脉带来的是保护效应

所以从这里我们可以看到

如果研究对象的不纯

就会影响我们实验的结论

如果我们在这么一个大圈的人群里面

我们就要注意进行分类

进行统计 进行分析

比如说年轻的 老年的

他们之间会有什么样的差异

同样的 用不同的分类的时候

我们得到的是不同的结果

除了年龄以外

我们还要关注性别

目前在做实验的时候

大部分都偏好雄性小鼠

为什么偏好雄性小鼠呢

因为雄性小鼠它没有雌性小鼠

性激素的周期性的变化

当然很多感染性研究

又偏好于雌性小鼠

其实我们刚才也谈到

不同的性别对于处理因素

它的反应是不完全相同的

这就意味着什么

这就意味着

我们在选择实验对象的时候

我们最好雌雄各半

这样我们的实验结论才更有普遍意义

好 我们再来看一个另外一个数据

这是阿司匹林对男性和女性

也呈现出不同的心血管的保护效应

从所有的这些我们得出个结论

没有特殊要求

实验动物应当雌雄各半

这样我们的研究结果才具有普遍意义

当然我们在选择实验对象的时候

我们也要注意使实验对象依从性提高

所谓依从性就是按照研究的计划

实验对象对你的配合的程度

怎么来增加依从性

第一 要增加患者对你的信任感

第二 实验时间不能太长

长了他不依从

将心比心我们也一样

第三 我们使用盲法 单盲 双盲 三盲

将会提升依从性的比例

那么有关盲法我们在后面的课程中

我们也会和大家单独专题进行讨论

同学们

我们这一讲就到这里

我们下一次课再见

谢谢大家