当前课程知识点:植物组织培养技术 > 2.植物组织培养的基本设备与基本技术 > 2.7. 培养基母液的配制与保存 > 2.7.培养基母液的配制与保存
大家好
在配制培养基时
如果每次都分别称量各种无机盐维生素植物生长调节剂
工作量大而且很麻烦容易出现很大的误差
为了减少工作量同时减小误差
最方便快捷的方法是预先配制好不同组分的培养基母液
当然市面上有配制好的培养基粉剂
可以买来直接使用
但当你需要调整培养基基本成分时
也就是增加或较少某种盐分用量时就无法进行
而且母液的配制也学习植物组织培养的基本技能之一
下面我们以MS培养基母液的配制为例
给大家介绍一下 培养基母液的配制方法
第一.基本培养基母液的配制
常母液浓度是培养基浓度的10倍
100倍或更高在配制母液时
应该把钙离子与硫酸根离子钙离子
与磷酸根离子放在不同的母液中以免发生沉淀
有沉淀的母液是不能使用的母液的配制量可以根据实际需要而定
如MS培养基通常可以配制三液式四液式或五液式等
一般情况有机营养成分
大量元素微量元素可以分别配成一个母液
铁盐和钙盐需要单独配制母液下面我们来看一个表格
此表根据MS培养基母液五液法的配制而设计
可以作为参照使用
由表中可以看到大量元素母液1
是把培养基中大量元素无机盐用量浓度扩大10倍
如硝酸钾
培养基中的用量是每升1900毫克
母液浓度扩大10倍后是19000毫克
硝酸铵 七水硫酸镁 磷酸二氢钾的母液用量一样
按照培养基中的用量扩大10倍后分别称取
称取完成后分别用蒸馏水溶解并混合转至1000毫升的容量瓶中
并用蒸馏水定容至1000毫升
这样我们就得到了1000毫升
浓度扩大10倍的MS大量元素母液1
其它的母液如大量元素母液2
即钙盐母液 微量元素母液
铁盐母液有机物母液的配制方法是一样的
但要注意不同母液的扩大倍数与配制量会根据情况有所调整
一般有机物的母液配制的量较少原因是有机物母液较容易被污染
也就是会出现保存不当时有机物母液滋生杂菌而变质
需要特别强调的是
铁盐母液配制过程中两种试剂
七水硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠按照浓度扩大倍数
计算的量分别称取后要分别加热溶解
混合后继续加热充分的螯合
螯合好的铁盐是橙黄色的
等冷却至室温用相应规格的容量瓶定容
第二植物生长调节剂母液的配制
与培养基其它成分母液的配制方法不一样
在配制植物生长调节剂母液时通常以毫克每毫升为浓度单位
这样在使用时比较方便
由于多数生长调节剂难溶于水因此配法各不相同
一般2,4-D
吲哚乙酸 吲哚丁酸 赤霉素
玉米素可先用少量95%酒精溶解
再用水定容摇匀后贮于试剂瓶中
萘乙酸可溶于热水或少量的95%酒精中
再加水定容至一定体积
激动素和6-苄氨基腺嘌呤应先溶于少量的1mol/LHC1溶液中
再加水定容
第三.母液的保存
下面我们看看如何保存配制好的母液
配制好的母液应贴上标签
在瓶上注明母液类型及编号 扩大倍数 配制日期 配制人
铁盐母液 有机物母液 植物生长生长调节剂母液选用棕色试剂瓶储存
母液应在2℃~4℃冰箱中保存
储存时间不宜太长,一般在一个月内用完
无机盐类的母液可以在2~4℃冰箱中保存
维生素等有机营养元素的母液要在冰箱冷冻室内保存
使用前取出在温水中溶解后取用
发现母液有霉菌或沉淀变质时 应该倒掉重新配制
好母液的配置我们先简单的介绍到这里
等后面的实操演示课程时再给大家详细的展示如何配置母液
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础--作业
-1.2. 植物组织培养的类型
-1.2. 植物组织培养的类型--作业
-1.3.植物组织培养的发展简史
-1.3.植物组织培养的发展简史--作业
-1.4. 植物组织培养的应用
-1.4. 植物组织培养的应用--作业
-2.1. 植物组织培养实验室布局
-2.1. 植物组织培养实验室布局--作业
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备--作业
-2.3. 植物组织培养常用仪器
-2.3. 植物组织培养常用仪器--作业
-2.4. 植物组织培养常用器皿
-2.4. 植物组织培养常用器皿--作业
-2.5. 培养基的基本成分及其作用
-2.5. 培养基的基本成分及其作用--作业
-2.6. 培养基的种类
-2.6. 培养基的种类--作业
-2.7. 培养基母液的配制与保存
-2.7. 培养基母液的配制与保存--作业
-2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
--培养基母液的配制
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
-2.9. 培养基的配制与灭菌
-2.9. 培养基的配制与灭菌--作业
-2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.11. 无菌操作
-2.11. 无菌操作--作业
-3.1. 外植体的选择
-3.1. 外植体的选择--作业
-3.2. 初代培养
--3.2.初代培养
-3.2. 初代培养--作业
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养--作业
-3.4. 继代培养
-3.4. 继代培养--作业
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作--作业
-3.6. 试管苗生根
-3.6. 试管苗生根--作业
-3.7. 试管苗驯化与移栽
-3.7. 试管苗驯化与移栽--作业
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽--作业
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径--作业
-3.10. 影响快繁因素的调控
-3.10. 影响快繁因素的调控--作业
-3.11. 污染
--3.11.污染
-3.11. 污染--作业
-3.12. 褐变
--3.12.褐变
-3.12. 褐变--作业
-3.13. 玻璃化
--3.13.玻璃化
-3.13. 玻璃化--作业
-3.14. 体细胞无性系变异
-3.14. 体细胞无性系变异--作业
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施
--3.15.植物组织培养快繁试验方案的设计与实施 .pdf
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施--作业
-4.1. 脱毒苗培育的意义
-4.1. 脱毒苗培育的意义--作业
-4.2. 脱毒的主要方法
-4.2. 脱毒的主要方法--作业
-4.3. 脱毒的其他方法
-4.3. 脱毒的其他方法--作业
-4.4. 脱毒苗的鉴定
-4.4. 脱毒苗的鉴定--作业
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖--作业
-4.6. 甘薯脱毒步骤
-4.6. 甘薯脱毒步骤--作业
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系--作业
-5.1.人工种子
--5.1.人工种子
--人工种子.pdf
-5.1.人工种子--作业
-5.2.试管微茎
--5.2.试管微茎
--试管微茎.pdf
-5.2.试管微茎--作业
-5.3.无糖培养技术
-5.3.无糖培养技术--作业
-考试题1
-参考文献