当前课程知识点：植物组织培养技术 > 3. 植物组织培养快繁技术 > 3.12. 褐变 > 3.12.褐变
大家好
褐变是指在组织培养过程中
由培养材料向培养基中释放褐色物质
致使培养基逐渐变成褐色培养材料也随着
慢慢变褐而死亡的现象
它的发生是由外植体中的酚类化合物
被多酚氧化酶氧化形成褐色的醌类化合物
醌类化合物在酪氨酸酶的作用下
与外植体组织中的蛋白质发生凝聚进一步引起其它酶系统失活
导致组织代谢紊乱生长受阻
最终引起培养材料死亡
引起褐变的原因包括外植体本身
培养基及培养条件等方面的影响
下面我们从6个方面分析引起褐变的原因
1是种类和品种的原因
在不同植物或同种植物不同品种的组培过程中
褐变发生的频率和严重程度存在很大的差异
一般木本植物更容易发生褐变现象
草本植物蝴蝶兰组培的原球茎诱导阶段
褐变较生根阶段严重
此外本身色素含量高的植物组培时也容易褐变
2是材料的年龄和大小的原因
外植体的老化程度越高其木质素的含量也越高
也就越容易褐变
成龄材料一般均比幼龄材料褐变严重
由于外植体的生理状态不同褐变程度也有所不同
一般来说
处于幼龄期的植物材料褐变程度较轻
而从已经成年的植株采收的外植体
由于含醌类物质较多因此褐变也较为严重
幼嫩的组织在接种后褐变程度并不明显
而成熟的组织在接种后褐变程度较为严重
外植体大小对褐变的影响
表现为小的材料更容易发生褐变
相对较大的材料则褐变较轻
另外切口越大褐变程度就会更严重
损伤有加剧褐变发生的作用
3是取材时间和部位的原因
由于植物体内酚类化合物含量和多酚氧化酶的活性
在不同的生长季节并不相同
一般在生长季节含有较多的酚类化合物
在取材部位上存在幼嫩茎尖较其它部位褐变程度低的现象
木质化程度高的节段在进行药剂消毒处理褐变现象更严重
另一些种类如蝴蝶兰香蕉等随着培养时间的延长
褐变程度会加剧
甚至在超过一定时间不进行转瓶继代
褐变物的积累还会引起培养材料的死亡
4是光照的原因
在采取外植体前如果将材料或母株枝条进行遮光处理
然后再切取外植体培养能够有效地降低褐变的发生
将接种后的初代培养材料在黑暗中培养
对抑制褐变发生也有一定的效果
但不如在接种前进行处理
如果光照过强温度过高培养时间过长
可使多酚氧化酶的活性提高从而加大外植体褐变的程度
5是温度的原因
温度对褐变有很大的影响温度高褐变严重
6是培养基成分和培养方式的原因
培养基中无机盐浓度过高会使某些观赏植物的褐变加重
此外细胞分裂素如6-BA的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶活性
从而使褐变现象加重
最后我们再讲一下通过哪些措施可以缓解和减轻褐变现象
一般来说最好选择生长处于旺盛的外植体
这样可以使褐变现象明显减轻
同时可以考虑下面6点措施来缓解和减轻褐变
1是培养材料进行20～40天进行遮光处理
或暗培养可以减轻一些种类的褐变程度
2是选择适宜的培养基调整激素用量
控制温度和光照尽量降低温度减少光照
3是选择年龄适宜的外植体材料进行组培
4是在培养基中加入抗氧化剂和其它抑制剂
如抗坏血酸 硫代硫酸钠 有机酸 半胱氨酸及其盐酸盐
亚硫酸氢钠氨基酸等均可以有效地抑制褐变
5是连续转移对容易褐变的材料可间隔
12～24h的培养后再转移到新的培养基
这样经过连续处理7～l0天后
褐变现象便会得到控制或大为减轻
6是在培养基中添加0.1%～0.5%的活性炭等吸附剂
在生产上能明显的降低褐变效果非常明显
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础
-1.1. 植物组织培养的概念和理论基础--作业
-1.2. 植物组织培养的类型
-1.2. 植物组织培养的类型--作业
-1.3.植物组织培养的发展简史
-1.3.植物组织培养的发展简史--作业
-1.4. 植物组织培养的应用
-1.4. 植物组织培养的应用--作业
-2.1. 植物组织培养实验室布局
-2.1. 植物组织培养实验室布局--作业
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备
-2.2. 植物组织培养实验室的基本设备--作业
-2.3. 植物组织培养常用仪器
-2.3. 植物组织培养常用仪器--作业
-2.4. 植物组织培养常用器皿
-2.4. 植物组织培养常用器皿--作业
-2.5. 培养基的基本成分及其作用
-2.5. 培养基的基本成分及其作用--作业
-2.6. 培养基的种类
-2.6. 培养基的种类--作业
-2.7. 培养基母液的配制与保存
-2.7. 培养基母液的配制与保存--作业
-2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
--培养基母液的配制
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.8. 操作演示1: 培养基母液的配制
-2.9. 培养基的配制与灭菌
-2.9. 培养基的配制与灭菌--作业
-2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.植物组织培养的基本设备与基本技术--2.10. 操作演示2: 培养基配制及高压灭菌
-2.11. 无菌操作
-2.11. 无菌操作--作业
-3.1. 外植体的选择
-3.1. 外植体的选择--作业
-3.2. 初代培养
--3.2.初代培养
-3.2. 初代培养--作业
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养
-3.3. 操作演示3: 外植体灭菌技术及初代培养--作业
-3.4. 继代培养
-3.4. 继代培养--作业
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作
-3.5. 操作演示4: 继代培养操作--作业
-3.6. 试管苗生根
-3.6. 试管苗生根--作业
-3.7. 试管苗驯化与移栽
-3.7. 试管苗驯化与移栽--作业
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽
-3.8. 操作演示5: 试管苗驯化移栽--作业
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径
-3.9 提高试管苗移栽成活率的途径--作业
-3.10. 影响快繁因素的调控
-3.10. 影响快繁因素的调控--作业
-3.11. 污染
--3.11.污染
-3.11. 污染--作业
-3.12. 褐变
--3.12.褐变
-3.12. 褐变--作业
-3.13. 玻璃化
--3.13.玻璃化
-3.13. 玻璃化--作业
-3.14. 体细胞无性系变异
-3.14. 体细胞无性系变异--作业
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施
--3.15.植物组织培养快繁试验方案的设计与实施 .pdf
-3.15. 快繁试验方案的设计与实施--作业
-4.1. 脱毒苗培育的意义
-4.1. 脱毒苗培育的意义--作业
-4.2. 脱毒的主要方法
-4.2. 脱毒的主要方法--作业
-4.3. 脱毒的其他方法
-4.3. 脱毒的其他方法--作业
-4.4. 脱毒苗的鉴定
-4.4. 脱毒苗的鉴定--作业
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖
-4.5. 脱毒苗的保存与繁殖--作业
-4.6. 甘薯脱毒步骤
-4.6. 甘薯脱毒步骤--作业
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系
-4.7. 甘薯脱毒苗的繁育体系--作业
-5.1.人工种子
--5.1.人工种子
--人工种子.pdf
-5.1.人工种子--作业
-5.2.试管微茎
--5.2.试管微茎
--试管微茎.pdf
-5.2.试管微茎--作业
-5.3.无糖培养技术
-5.3.无糖培养技术--作业
-考试题1
-参考文献
