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本节我们介绍

肿瘤常用的病理学诊断技术方法

首先来介绍一下组织病理切片的

常规的制备方法

首先呢是标本的获取

标本可以是来源于针芯穿刺的活检

比如腹腔的穿刺

或者是咬取的活检

譬如宫颈的肿瘤部位的活检

或者是切开的活检

比如这个皮肤表面的某个肿瘤的

这样的一个切开直接活检

当然还有切除的活检

这个是术后就可以

对于肿瘤的标本进行直接的这个标本获取

然后是制片

制片呢包括这个石蜡的切片的制备

这个是占的比例是最多的

也可以是冰冻的切片制备

这个往往是呢在手术过程中

对于这个不排除恶性的这样的一个肿瘤

先要做一个冰冻切片

来这个初步的对肿瘤进行加以判断

那么也可以是印片

对于获取的标本

我们首先要进行大体的观察

在这个记录中加以描述

比如是溃疡型

还是这种息肉型

或者是有没有看到这个牙齿毛发

那么整个这个细胞的这个

肿瘤的形状数量大小

都要加以进行描述

然后呢进行制片 染色

最后呢在显微镜下观察

肿瘤细胞病理学诊断呢

它具体的可以再分为

这个脱落的细胞学检查

那么这个呢就像阴道脱落的细胞学

或者是痰涂片的这种刷片细胞学

胸腹水的脱落细胞学

乳房乳头溢液的细胞学等等

这些都属于脱落细胞学的检查范围

还有呢就是穿刺细胞学的检查

比如对淋巴结 乳腺 甲状腺 胸腹腔胀气等

可以先进行比如肝脏的这个穿刺

获得一些这个细胞的成分来

初步的鉴定是不是有恶性的肿瘤

细胞的诊断学呢

对于初筛恶性肿瘤具有重要的意义

它有利于发现早期的癌症

做到早期的诊断

而且这个对机体的影响会相对小一些

因此具有广泛的应用基础

另外呢对于难以取得组织学诊断材料时

细胞学的诊断

可弥补形态学诊断的空白

那么图中呢

可以是常用的这个女性宫颈癌

这个筛查时所用的

这个Pap smear的检测

那么这种检测呢

左侧的图片可以看到

它是一个正常的细胞学的检测结果

那么这个是细胞核

这个是细胞浆

这个是正常的状态核浆比例很小

那么如果在这个细胞学检测中

能够看到较大的这个细胞核然后深染

对于这种异形的细胞

就要加以进一步的妇科的这个诊断

以排除这个宫颈癌的存在

肿瘤病理学诊断呢

还有一些常见的特殊的染色技术

有利于增强对于这个诊断结果的确认

让我们来逐一介绍

第一种是特殊染色和组织化学技术

PAS染色又叫过碘酸-雪夫染色

它主要是显示糖原和中性的粘液物质

基膜大多数的真菌寄生虫

还可以显示腺泡状的

组织肉瘤瘤细胞

胞质内的结晶

阳性的染色呢会呈现红色

比如这个摄食后的小鼠

你去做这个肝脏的糖原染色

你会发现肝细胞里面

充满了这种粉红色的糖原染色

我们再举另外一个例子

如果在卵巢上发现一个肿瘤

当你不能确定它的肿瘤来源时

如果PAS染色阳性

那么就提示

它有可能是胃肠道种植性

转移过来的库肯博士瘤

这个时候

我们可以继续去追踪检查胃肠道

是否有原发性的肿瘤

淀粉样的物质

是一种病理性的细胞外蛋白质

因为其与淀粉在碘液中

呈相同的染色反应而得名

常规的HE染色中呢

淀粉样物质为无细胞的均一的

淡嗜伊红色物质

淀粉样物质沉着

可见于肿瘤慢性感染等疾病

刚果红染色

甲基紫染色阳性

就提示这是淀粉样的物质存在

亲银或者是嗜银染色

是另外一种常见的特染方式

那么神经内分泌组织或细胞呢

常常具有亲银或嗜银的特性

如果这个亲银染色阳性

就会有利于判断神经内分泌肿瘤

图中所示是食管癌

嗜银染色阳性

就提示它是食管的小细胞癌

是神经内分泌肿瘤的一种

中性脂肪染色也是一种特染方式

那么苏丹III、苏丹IV或油红O等等

这些检测呢

往往是提示特异性的脂肪染色

那么肿瘤诊断呢

往往会用于皮脂腺的肿瘤

或者是脂肪肉瘤等诊断

色素染色

许多的色素呢

在一般常规的HE染色切片上很相似

不易区分

通常需要采用不同的染色方法来显示

举例说明

血色病

肝细胞呢含铁血黄素染色是阳性的

如果是黑色素瘤

黑色素染色是阳性的

第二种常用的病理学诊断技术

还包括电镜技术

那么电镜技术呢

主要解决肿瘤的组织学类型

和组织学发生等问题

首先呢它有利于癌和肉瘤的鉴别

因为有的时候在这个光镜下

我们难以区分

这个肿瘤的来源

究竟是来源于癌还是肉瘤

如果是通过电镜

鳞状细胞癌则能够显示

清晰的桥粒等这样结构

它就会有助于是

上皮细胞来源的一个确认

另外呢如果在这个神经内分泌肿瘤

可以看到细胞内有很多这样点状的

神经内分泌颗粒

也可以增强神经内分泌肿瘤的确诊

第三种常用的病理诊断方法

就是免疫组化

免疫组化的原理

主要是利用抗原和抗体的特异性结合反应

检测组织中未知抗原或抗体

借以判断肿瘤的组织来源

或者是分化方向

从而进行病理诊断

那么很多的时候

我们单纯的这个临床病理医生

通过这个HE染色切片

不能够判断肿瘤类型的时候

免疫组化往往会是第一个

首先出现的有力的帮手

常见的肿瘤抗原标志

比如上皮性的肿瘤

我们可以用Keratin 角蛋白

上皮细胞膜抗原EMA

来做这个免疫组化

对于恶性淋巴瘤

可以用白细胞共同抗原LCA

T细胞系统的相关的抗体进行标志

来检测淋巴瘤的类型

对于神经脊来源的肿瘤

也可以用S-100来检测

有助于黑色素瘤

或神经纤维瘤的判断

那么APUD肿瘤呢

也可以通过S-100或者是这个NSE

就神经特异性酰醇化酶来鉴定

在实际应用中

免疫组化也有利于这个肿瘤的鉴别诊断

功能分类病因和发病机理研究

以及指导临床的治疗等

譬如肿瘤组织中

相关抗原和癌基因编码产物的测定

来通过这个CEA AFP甲胎蛋白

P21等这样的变化

来判断癌组织的这个来源

也可以增强这个肿瘤组织中受体的测定

比如到底通过免疫组化

来判定它是雌激素受体

孕激素受体或凝激素等

那么来增强受体的测定

或者是呢肿瘤细胞中病毒抗原的检测

比如这个乙肝病毒表面抗原EB病毒

这样的免疫组化

来增加这个病毒的来源检测

那么通过对B细胞巨细胞T细胞

亚类的这个免疫组化的分型

也有利于这个恶性淋巴瘤的分型和鉴别诊断

同时通过这个HCG

就是绒毛膜促性腺激素

促生长激素嗜铬颗粒素

或者是降钙素等

内分泌的这样的一些激素类型

来判断内分泌肿瘤的功能分类

这些都是免疫组化在实际临床中的应用

图示cytokeratin细胞角蛋白阳性的这个检测

有利于食管鳞癌的鉴定

而这张图呢是这个尖锐湿疣中

HPV病毒阳性的一个鉴定结果

流式细胞术呢

是另外一种肿瘤学中常用的检测技术

流式细胞术在肿瘤学中的研究呢

有利于肿瘤免疫学方面的鉴定

还有肿瘤细胞周期和凋亡

肿瘤干细胞的研究

那么也有利于在血液中

循环肿瘤细胞的这个研究

图像分析技术是近些年来发展起来的技术

通过对细胞中某些成分的定量分析

或者定性的诊断

有利于对于这个疾病的精准的判断

目前呢分子病理学也经常用于基因诊断

像核型分析

也就是染色体分析

在实体瘤中常常会有染色体的异常

那么比如会表现为

染色体的易位 缺失 倒位 重复等等

那么通过这个核型分析

可以增加对这个疾病的认识

原位分子杂交

有利于在这个DNA水平

来检测肿瘤的分子特性

比如这个乳腺癌

我们通过原位杂交

可以判断它孕激素的阳性

那么这样的一个检测

就有利于对于在这个治疗过程中

应用激素疗法的一个针对性的治疗

使用荧光素或者是半抗原标记探针

检测染色体或这个染色体的变化

又叫FISH

是荧光原位杂交的方法

它有利于对于基因

或者是染色体结构数目异常进行检测

比如我们应用FISH的技术

可以检测到BCR ABL融合基因

BCR融合基因

也就是费城染色体的鉴定

有利于慢性白血病的诊断

以上我们介绍了

多种常用的病理学诊断方法

现实中我们将用多种的方法

来对肿瘤进行综合的诊断