当前课程知识点：临床科研实验技能 > 第三章分子生物学常用实验技术 > 3.4 蛋白质印迹技术 > 3.4.1 蛋白质印迹概述

返回《临床科研实验技能》慕课在线视频课程列表

3.4.1 蛋白质印迹概述在线视频

下一节:3.4.2 蛋白质印迹实验流程

返回《临床科研实验技能》慕课在线视频列表

3.4.1 蛋白质印迹概述课程教案、知识点、字幕

同学们好

今天我介绍的这个知识点是

蛋白质印迹概述

什么是印迹呢？

印迹（Blot）是指将样品转移至

相应的固相载体上后

利用相应的探针来检测样本的一种方法

蛋白质印迹(Western Blot)

是指细胞或生物组织等

蛋白样品经凝胶电泳分离后

转移至固相载体上

而后利用特异性抗体对目标蛋白

进行定量或定性检测的一种技术

1975年英国人Edwin Mellor Southern

创建了以标记核酸为

探针检测DNA的杂交技术

命名为“Southern blot”

1977年

George Stark及其同事用相同的

原理发明了检测RNA的方式

命名为“Northern Blot”

1979年

同样George Stark发展了早期的

蛋白印迹技术

将蛋白经凝胶电泳分离后

转移至活化的纤维素膜上

1981年

W. Neal Burnette

正式将这一技术命名为“Western Blot”

蛋白质印迹的原理

是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白样品

以非共价键形式转移到

固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上

以载体上的蛋白质或多肽为抗原

一抗作为检测“探针”

与对应抗原起免疫反应

再与酶或同位素标记的二抗起反应

经过底物显色或放射自显影

检测通过电泳分离的蛋白质产物

蛋白质印迹原理示意图

我们可以看到点蛋白样品

PAGE胶进行分离

转移到NC膜上

一抗抗膜上的蛋白

二抗抗一抗

然后二抗上带有这个显色剂能够显色出来

蛋白质印迹优点

是将高分辨率凝胶电泳（PAGE）

和免疫化学（IC）分析技术相结合的

杂交技术

它具有分析容量大

灵敏度高特异性强

成本低和效率高等优点

蛋白质印迹的应用包括蛋白的

定量检测（组织抗原多肽分子及病毒抗体或抗原等）

蛋白表达的定位（细胞核细胞质线粒体等）

蛋白表达特异性的分析（磷酸化乙酰化甲基化等）

蛋白-蛋白

蛋白-核酸相互作用的鉴定（与pull down co-IP结合等）

这个知识点就介绍到这里

谢谢大家！

临床科研实验技能课程列表：

第一章临床科研实验实施与总结

-1.1 临床科研实验简介

--1.1 临床科研实验简介

-1.2 医学实验中心基本情况

--1.2 医学实验中心基本情况

-1.3 进室流程和管理制度

--1.3 进室流程和管理制度

-1.4 实验总结要点和实验心得

--1.4 实验总结要点和实验心得

-第1章习题作业

--第1章习题作业

-第一章课件

--第一章课件

第二章临床科研诚信与学术规范

-2.1 科研诚信问题

--2.1 科研诚信问题

-2.2 科研诚信与学术规范

--2.2 科研诚信与学术规范

-2.3 杜绝科研不端行为

--2.3 杜绝科研不端行为

-第2章习题作业

--第2章习题作业

-第二章课件

--第二章课件

第三章分子生物学常用实验技术

-3.1 分子生物学常用实验技术

--3.1 分子生物学常用实验技术

-3.2 PCR技术

--3.2.1 PCR技术概述

--3.2.2 PCR实验流程

--3.2.3 PCR实验操作

--3.2.4 PCR技术类型及应用

-3.3 电泳技术

--3.3.1 电泳技术概述

--3.3.2 常用电泳方法

--3.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验操作

-3.4 蛋白质印迹技术

--3.4.1 蛋白质印迹概述

--3.4.2 蛋白质印迹实验流程

--3.4.3 蛋白质印迹实验

--3.4.4 蛋白质印迹常见问题分析

-第3章习题作业

--第3章习题作业

-第三章课件

--第三章课件

第四章精准医学与遗传病

-4.1 精准医学概述

--4.1 精准医学概述

-4.2 常见遗传病简介

--4.2 常见遗传病简介

-4.3 精准医学在遗传病中的应用

--4.3 精准医学在遗传病中的应用

-第4章习题作业

--第4章习题作业

-第四章课件

--第四章课件

第五章临床科研中常用数据库和软件使用

-5.1 生物信息学概述

--5.1 生物信息学概述

-5.2 常用生物信息学数据库

--5.2 常用生物信息学数据库

-5.3 常用生物信息学分析工具

--5.3 常用生物信息学分析工具

-5.4 常用数据库和软件使用

--5.4.1 序列查询

--5.4.2 序列比对

--5.4.3 UniProt

--5.4.4 文献检索

--5.4.5 变异查询

--5.4.7 变异解读

--5.4.8 变异预测

-第5章习题作业

--第5章习题作业

-第五章课件

--第五章课件

第六章细胞培养技术

-6.1 细胞培养基本概念

--6.1 细胞培养基本概念

-6.2 细胞培养基本条件

--6.2 细胞培养基本条件

-6.3 细胞培养基本方法

--6.3 细胞培养基本方法

-6.4 细胞培养操作流程

--6.4 细胞培养操作流程

-6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

--6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

-第6章习题作业

--第6章习题作业

-第六章课件

--第六章课件

第七章细胞凋亡

-7.1 细胞凋亡概述

--7.1 细胞凋亡概述

-7.2 细胞凋亡分子机制

--7.2 细胞凋亡分子机制

-7.3 细胞凋亡的检测

--7.3 细胞凋亡的检测

-7.4 细胞凋亡与疾病

--7.4 细胞凋亡与疾病

-第7章习题作业

--第7章习题作业

-第七章课件

--第七章课件

第八章动物实验技术

-8.1 动物实验设计与应用

--8.1 动物实验设计与应用

-8.2 实验动物分类与选择

--8.2.1 实验动物分类与选择

--8.2.2 动物实验基本操作

-8.3 医学动物实验模型

--8.3 医学动物实验模型

-8.4 实验动物的伦理与福利

--8.4 实验动物的伦理与福利

-第8章习题作业

--第8章习题作业

-第八章课件

--第八章课件

第九章免疫学实验技术

-9.1 免疫组化技术

--9.1 免疫组化技术

-9.2 免疫荧光技术

--9.2 免疫荧光技术

-9.3 酶联免疫吸附技术

--9.3 酶联免疫吸附技术

-第9章习题作业

--第9章习题作业

-第九章课件

--第九章课件

第十章 SCI论文写作与发表

-10.1 SCI论文基本知识

--10.1 SCI论文基本知识

-10.2 SCI论文写作

--10.2 SCI论文写作

-10.3 SCI论文撰写技巧

--10.3 SCI论文撰写技巧

-10.4 SCI论文投稿和发表

--10.4 SCI论文投稿和发表

-第10章习题作业

--第10章习题作业

-第十章课件

--第十章课件

3.4.1 蛋白质印迹概述笔记与讨论

也许你还感兴趣的课程:

© 柠檬大学-慕课导航课程版权归原始院校所有，
本网站仅通过互联网进行慕课课程索引，不提供在线课程学习和视频，请同学们点击报名到课程提供网站进行学习。