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9.3 酶联免疫吸附技术在线视频

下一节:第九章课件

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9.3 酶联免疫吸附技术课程教案、知识点、字幕

同学们好

今天我讲的这个知识点是

酶联免疫吸附技术(ELISA)

什么是酶联免疫吸附实验（ELISA）呢？

它又简称酶联实验

广泛用于检测各种微量蛋白的含量

样品的来源广泛

如血清体液尿液以及分泌物等

根据检测要求可分多种类型

常用的有

间接法双抗体夹心法

竞争法以及竞争抑制法等

酶联实验根据所用载体酶底物系统

观察反应结果等不同而有很大的差别

ELISA是免疫技术与酶催化放大信号

相结合的一项现代检测技术

待检物在固相载体表面仍保持其免疫活性

酶标记的抗原或抗体既保留了

酶的活性又保留免疫学活性

在测定时受检标本

与固相载体表面的抗原或抗体起反应

再加入酶标记的抗原或抗体

再一次通过反应而结合在固相载体上

加入酶反应的底物后

底物被酶催化成有色产物

产物的量与标本中受检物质的量直接相关

故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析

我们可以看到上图是间接法的流程

下图是双抗体夹心法的流程

竞争法是加入竞争抗体

目的是使酶联反应的结果更加准确可靠

实验流程包括

1. 包被

即取包被的物质

提前设计好所需要的浓度

分别加入各孔中

4℃孵育过夜

设置阳性和阴性对照

2. 洗涤

弃包被液

每孔加入洗涤液

静置5分钟

洗涤5次

甩干

3. 封闭

加入10%小牛血清

37℃封闭2小时

4. 洗涤

弃小牛血清

同步骤2洗涤

5. 加入一抗

一抗即为检测物质

一般在加入前先稀释

37℃孵育2小时

6. 洗涤

步骤同步骤2

7. 加酶标抗体

按说明书加入各孔

8. 洗涤

9. 加底物显色

10. 终止

11. 测定

以空白孔为基准

测定各孔的吸光度（OD值）

ELISA广泛应用于检测一切抗原

抗体及半抗原

也可以直接定量测定体液中的可溶性抗原

它可用于免疫酶染色各种

细胞内成份的定位

可以研究抗酶抗体的合成

可以显现微量的免疫沉淀反应

可以定量检测体液中抗原或抗体的成份

这个知识点就介绍到这里

谢谢大家！

临床科研实验技能课程列表：

第一章临床科研实验实施与总结

-1.1 临床科研实验简介

--1.1 临床科研实验简介

-1.2 医学实验中心基本情况

--1.2 医学实验中心基本情况

-1.3 进室流程和管理制度

--1.3 进室流程和管理制度

-1.4 实验总结要点和实验心得

--1.4 实验总结要点和实验心得

-第1章习题作业

--第1章习题作业

-第一章课件

--第一章课件

第二章临床科研诚信与学术规范

-2.1 科研诚信问题

--2.1 科研诚信问题

-2.2 科研诚信与学术规范

--2.2 科研诚信与学术规范

-2.3 杜绝科研不端行为

--2.3 杜绝科研不端行为

-第2章习题作业

--第2章习题作业

-第二章课件

--第二章课件

第三章分子生物学常用实验技术

-3.1 分子生物学常用实验技术

--3.1 分子生物学常用实验技术

-3.2 PCR技术

--3.2.1 PCR技术概述

--3.2.2 PCR实验流程

--3.2.3 PCR实验操作

--3.2.4 PCR技术类型及应用

-3.3 电泳技术

--3.3.1 电泳技术概述

--3.3.2 常用电泳方法

--3.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验操作

-3.4 蛋白质印迹技术

--3.4.1 蛋白质印迹概述

--3.4.2 蛋白质印迹实验流程

--3.4.3 蛋白质印迹实验

--3.4.4 蛋白质印迹常见问题分析

-第3章习题作业

--第3章习题作业

-第三章课件

--第三章课件

第四章精准医学与遗传病

-4.1 精准医学概述

--4.1 精准医学概述

-4.2 常见遗传病简介

--4.2 常见遗传病简介

-4.3 精准医学在遗传病中的应用

--4.3 精准医学在遗传病中的应用

-第4章习题作业

--第4章习题作业

-第四章课件

--第四章课件

第五章临床科研中常用数据库和软件使用

-5.1 生物信息学概述

--5.1 生物信息学概述

-5.2 常用生物信息学数据库

--5.2 常用生物信息学数据库

-5.3 常用生物信息学分析工具

--5.3 常用生物信息学分析工具

-5.4 常用数据库和软件使用

--5.4.1 序列查询

--5.4.2 序列比对

--5.4.3 UniProt

--5.4.4 文献检索

--5.4.5 变异查询

--5.4.7 变异解读

--5.4.8 变异预测

-第5章习题作业

--第5章习题作业

-第五章课件

--第五章课件

第六章细胞培养技术

-6.1 细胞培养基本概念

--6.1 细胞培养基本概念

-6.2 细胞培养基本条件

--6.2 细胞培养基本条件

-6.3 细胞培养基本方法

--6.3 细胞培养基本方法

-6.4 细胞培养操作流程

--6.4 细胞培养操作流程

-6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

--6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

-第6章习题作业

--第6章习题作业

-第六章课件

--第六章课件

第七章细胞凋亡

-7.1 细胞凋亡概述

--7.1 细胞凋亡概述

-7.2 细胞凋亡分子机制

--7.2 细胞凋亡分子机制

-7.3 细胞凋亡的检测

--7.3 细胞凋亡的检测

-7.4 细胞凋亡与疾病

--7.4 细胞凋亡与疾病

-第7章习题作业

--第7章习题作业

-第七章课件

--第七章课件

第八章动物实验技术

-8.1 动物实验设计与应用

--8.1 动物实验设计与应用

-8.2 实验动物分类与选择

--8.2.1 实验动物分类与选择

--8.2.2 动物实验基本操作

-8.3 医学动物实验模型

--8.3 医学动物实验模型

-8.4 实验动物的伦理与福利

--8.4 实验动物的伦理与福利

-第8章习题作业

--第8章习题作业

-第八章课件

--第八章课件

第九章免疫学实验技术

-9.1 免疫组化技术

--9.1 免疫组化技术

-9.2 免疫荧光技术

--9.2 免疫荧光技术

-9.3 酶联免疫吸附技术

--9.3 酶联免疫吸附技术

-第9章习题作业

--第9章习题作业

-第九章课件

--第九章课件

第十章 SCI论文写作与发表

-10.1 SCI论文基本知识

--10.1 SCI论文基本知识

-10.2 SCI论文写作

--10.2 SCI论文写作

-10.3 SCI论文撰写技巧

--10.3 SCI论文撰写技巧

-10.4 SCI论文投稿和发表

--10.4 SCI论文投稿和发表

-第10章习题作业

--第10章习题作业

-第十章课件

--第十章课件

9.3 酶联免疫吸附技术笔记与讨论

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