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9.2 免疫荧光技术在线视频

下一节:9.3 酶联免疫吸附技术

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9.2 免疫荧光技术课程教案、知识点、字幕

同学们好

今天我讲的这个知识点是免疫荧光

免疫荧光法也称为荧光抗体技术

是借抗原抗体反应进行

特异荧光染色的诊断技术

最常见的荧光素为异硫氰基荧光素（FITC）

免疫荧光原理

免疫荧光技术是以荧光素作标记物

与已知抗体结合

用于检测和鉴定未知的抗原

在荧光显微镜下

可以直接观察到特异荧光的

抗原抗体复合物

第一层是组织（黄色为目标蛋白）

第二层是封闭蛋白

一抗针对组织的目标蛋白

二抗针对一抗

二抗上带有荧光

然后检测出荧光

常见的荧光素有FITC

它是黄色结晶粉末

吸收光

490~495 nm

发射光

520~530 nm

在荧光显微镜下表现为明亮的黄绿色荧光

PE 吸收光

490~560 nm

发射光

595 nm

红色荧光

RB200是橘红色粉末

吸收光

570 nm

发射光

595~600 nm

橘红色荧光

另外还有TRITC

它是紫红色粉末

吸收光

550 nm

发射光

620 nm

是橙红色荧光

还有镧系以及其他荧光素

免疫荧光直接法是

用已知特异性一抗与荧光素结合

制成荧光特异性一抗

直接与细胞或组织的相应抗原结合

此方法简便

但一抗只能检测一种抗原

敏感性较差

已不常用

间接法是先用特异性

一抗与细胞标本反应

再用荧光二抗与结合在抗原上的抗体结合

形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物

此方法只需要制备一种种属间接荧光抗体

使用多种第一抗体的标记显示

敏感性高

较常见

间接法也称间接荧光抗体法

首先是抗体孵化

然后是细胞核染色和封片

第三步是镜检

以HELA细胞为例

左图我们看到

胞核是染成蓝色

肌动蛋白微丝染成红色

Golgin-97（高尔基体）是免疫荧光

染成绿色

右图胞核染成蓝色

肌动蛋白微丝染成红色

Tubulin微管蛋白是免疫荧光

染成绿色

免疫荧光的应用广泛应用于

各种医学科研及临床诊断的检测

免疫荧光可确定组织细胞内抗原

对其进行定位定性及定量

在细胞学免疫病理学

微生物学和寄生虫学等得到广泛应用

这个知识点就介绍到这里

谢谢大家！

临床科研实验技能课程列表：

第一章临床科研实验实施与总结

-1.1 临床科研实验简介

--1.1 临床科研实验简介

-1.2 医学实验中心基本情况

--1.2 医学实验中心基本情况

-1.3 进室流程和管理制度

--1.3 进室流程和管理制度

-1.4 实验总结要点和实验心得

--1.4 实验总结要点和实验心得

-第1章习题作业

--第1章习题作业

-第一章课件

--第一章课件

第二章临床科研诚信与学术规范

-2.1 科研诚信问题

--2.1 科研诚信问题

-2.2 科研诚信与学术规范

--2.2 科研诚信与学术规范

-2.3 杜绝科研不端行为

--2.3 杜绝科研不端行为

-第2章习题作业

--第2章习题作业

-第二章课件

--第二章课件

第三章分子生物学常用实验技术

-3.1 分子生物学常用实验技术

--3.1 分子生物学常用实验技术

-3.2 PCR技术

--3.2.1 PCR技术概述

--3.2.2 PCR实验流程

--3.2.3 PCR实验操作

--3.2.4 PCR技术类型及应用

-3.3 电泳技术

--3.3.1 电泳技术概述

--3.3.2 常用电泳方法

--3.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验操作

-3.4 蛋白质印迹技术

--3.4.1 蛋白质印迹概述

--3.4.2 蛋白质印迹实验流程

--3.4.3 蛋白质印迹实验

--3.4.4 蛋白质印迹常见问题分析

-第3章习题作业

--第3章习题作业

-第三章课件

--第三章课件

第四章精准医学与遗传病

-4.1 精准医学概述

--4.1 精准医学概述

-4.2 常见遗传病简介

--4.2 常见遗传病简介

-4.3 精准医学在遗传病中的应用

--4.3 精准医学在遗传病中的应用

-第4章习题作业

--第4章习题作业

-第四章课件

--第四章课件

第五章临床科研中常用数据库和软件使用

-5.1 生物信息学概述

--5.1 生物信息学概述

-5.2 常用生物信息学数据库

--5.2 常用生物信息学数据库

-5.3 常用生物信息学分析工具

--5.3 常用生物信息学分析工具

-5.4 常用数据库和软件使用

--5.4.1 序列查询

--5.4.2 序列比对

--5.4.3 UniProt

--5.4.4 文献检索

--5.4.5 变异查询

--5.4.7 变异解读

--5.4.8 变异预测

-第5章习题作业

--第5章习题作业

-第五章课件

--第五章课件

第六章细胞培养技术

-6.1 细胞培养基本概念

--6.1 细胞培养基本概念

-6.2 细胞培养基本条件

--6.2 细胞培养基本条件

-6.3 细胞培养基本方法

--6.3 细胞培养基本方法

-6.4 细胞培养操作流程

--6.4 细胞培养操作流程

-6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

--6.5 细胞冻存、复苏和污染检测

-第6章习题作业

--第6章习题作业

-第六章课件

--第六章课件

第七章细胞凋亡

-7.1 细胞凋亡概述

--7.1 细胞凋亡概述

-7.2 细胞凋亡分子机制

--7.2 细胞凋亡分子机制

-7.3 细胞凋亡的检测

--7.3 细胞凋亡的检测

-7.4 细胞凋亡与疾病

--7.4 细胞凋亡与疾病

-第7章习题作业

--第7章习题作业

-第七章课件

--第七章课件

第八章动物实验技术

-8.1 动物实验设计与应用

--8.1 动物实验设计与应用

-8.2 实验动物分类与选择

--8.2.1 实验动物分类与选择

--8.2.2 动物实验基本操作

-8.3 医学动物实验模型

--8.3 医学动物实验模型

-8.4 实验动物的伦理与福利

--8.4 实验动物的伦理与福利

-第8章习题作业

--第8章习题作业

-第八章课件

--第八章课件

第九章免疫学实验技术

-9.1 免疫组化技术

--9.1 免疫组化技术

-9.2 免疫荧光技术

--9.2 免疫荧光技术

-9.3 酶联免疫吸附技术

--9.3 酶联免疫吸附技术

-第9章习题作业

--第9章习题作业

-第九章课件

--第九章课件

第十章 SCI论文写作与发表

-10.1 SCI论文基本知识

--10.1 SCI论文基本知识

-10.2 SCI论文写作

--10.2 SCI论文写作

-10.3 SCI论文撰写技巧

--10.3 SCI论文撰写技巧

-10.4 SCI论文投稿和发表

--10.4 SCI论文投稿和发表

-第10章习题作业

--第10章习题作业

-第十章课件

--第十章课件

9.2 免疫荧光技术笔记与讨论

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