当前课程知识点:普通生物学 > 第二章 分子生物学基础 > 第三节 生物技术及其应用 > 2.3.4 DNA凝胶电泳
DNA凝胶电泳又叫(Gel Electrophoresis)
是分子生物学中最为常规的技术
它主要是用于对DNA
或者RNA这些核酸分子的分离
纯化以及鉴定等等
凝胶电泳的原理比较简单
它是把DNA放置在电泳场中时
因为DNA带有很多的负电荷
所以它们就会以一定的
速度从负极往正极迁移
这种电泳分子在
电场作用下的迁移速度
实际是叫做电泳的迁移率
而迁移率是同电场的
强度以及电泳分子
本身所携带的净电荷数成正比
也就是说电场强度越大
电泳分子所携带的
净电荷数量越多
其迁移的速度也就越快
反之则较慢
在电泳中同时还使用了另外一种
没有反应活性的稳定的支持介质
如琼脂糖凝胶或
聚丙烯酰胺胶等
从而降低了对流的运动
使得DNA电泳的迁移率
实际上
和它上面带的电荷的大小
并不是完全成正比
而是和DNA片段的大小
以及它DNA的状况相关
琼脂糖 ( Agarose )
是凝胶电泳中
最为常用的支持介质
它是一种线性的多糖聚合物
是从红色海藻
产物琼脂中提取而来的
当琼脂糖溶液加热到沸点后
冷却凝固便会形成
非常良好的电泳介质
其密度是由琼脂糖的浓度决定的
高浓度的琼脂糖
适用于小分子DNA片段的分离
为了显现琼脂糖凝胶或
聚丙烯酰胺凝胶中的核酸分子
我们可以在DNA中添加溴化乙锭
也就是等你以后加入实验室里以后都会知道的EB
溴化乙锭的作用是什么呢
溴化乙锭它作用实际上是
可以和DNA分子
或者RNA分子相结合
插入到
DNA或者RNA链中去
而溴化乙锭的特点是
它在300nm紫外光照射下
它可以发射出来一种荧光
从而可以很方便的进行检测
所以我们可以通过
EB的染色来观测
这个DNA
在这个胶里面的位置
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