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分析方法的建立资料文件与下载

分析方法的建立

实际工作中，拿到一个样品时，该如何建立一套完整的分析方法进行定性和定量呢，常规步骤如下：

（1）样品的来源和预处理

GC能间接剖析的样品必须是气体或液体，固体样品在剖析前该当溶解在适当的溶剂中，并且还要保证样品中不含GC不可以剖析的组分（如无机盐），应该会破坏色谱柱的组分。这样，我们在接到一个未知样品时，就必须理解的来源，从而应该样品应该含有的组分，以及样品的沸点范畴。如能确认样品可间接剖析。假如样品中有不可以用GC间接剖析的组分，或样品浓度太低，就必须进行须要的预处置，包含接纳一些预分离手段，如种种萃取技能、浓缩和稀释办法、提纯办法等。

（2）确定仪器配置

所谓仪器配置是用于剖析样品的办法接纳什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么检测器。

（3）确定初始分析条件

当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和载气流速。进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过10mg:mL-1时，填充柱的进样量通常为1~5pL，而对于毛细管柱，若分流比为50:1时，进样量一般不超过2L。进样口温度主要由样品的沸点范围决定，还要考虑色谱柱的使用温度。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点最高的组分的沸点，但要低于样品的分解温度。

（4）分离条件优化

分离条件优化的目的是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。在改变柱温和载气流速也不能够使样品各组分分离时，就应更换更长的色谱柱，甚至更换不同固定相的色谱柱,因为在GC中，色谱柱是分离成败的关键。

（5）定性鉴定

所谓定性鉴定就是确定色谱峰的归属。对于简单的样品，可通过标准物质对照来定性。即在相同的色谱条件下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上哪个峰是要分析的组分。定性时必须注意，在同一色谱柱上，不同化合物可能有相同的保留值,所以，对未知样品的定性仅仅用一个保留数据是不够的，采用双柱或多柱保留指数定性是GC中较为可靠的方法，因为不同的化合物在不同的色谱柱上具有相同保留值的概率要小得多。条件允许时可采用气-质色谱进行定性。

（6）定量分析

常用的色谱定量方法有峰面积（峰高）百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法。峰面积（峰高）百分比法最简单，但最不准确，只有样品由同系物组成，或者只是为了粗略地定量时才选择该法。相比而言，内标法的定量精度最高，因为它是用相对于内标物的响应值来定量的，而内标物要分别加到标准样品和未知样品中，这样就可抵消由于操作条件（包括进样量〉的波动带来的误差。标准加入法，是在未知样品中定量加人待测物的标准品，然后根据峰面积（峰高）的增加量来进行定量计算。其样品制备过程与内标法类似但计算原理则完全来自外标法。标准加人法定量精度应该介于内标法和外标法之间。

（7）方法验证

方法验证就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是否全部可作为商品购得，样品处理方法是否简单易操作，分析时间是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和准确度等。

下一节:Agilent-7890气相色谱仪操作规程

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仪器分析课程列表：

1.绪论

-1.1绪论

--知识点导入

--讨论：仪器分析和化学分析的区别与联系

--讨论：很多仪器分析方法的开创者曾获得诺贝尔奖，试介绍一位

-1.2 分析仪器的性能参数表征

--响应时间/速度

--检出限和动态响应范围

--定量分析方法

--电子天平的正确使用与维护

-1.3 仪器分析实验室安全

--仪器分析地位与作用

--实验室安全

--实验室用水

--常用器皿的洗涤

--气体钢瓶的使用及注意事项

--控制和消除误差的方法

-章节测验

--章节测验

2.紫外-可见吸收光谱法

-2.1 概述

--讨论：分子吸收光谱的产生形式有哪些？

-2.2 基本原理

--动画：紫外吸收光谱法测量原理

--讨论：有机化合物的价电子跃迁有几种类型？

-2.3 吸收带波长位置的影响因素

--讨论：何为溶剂效应？

-2.4 分子结构与吸收光谱

--动画：吸收光谱曲线对物质的定性分析

--讨论：何为助色团和生色团？

-2.5 紫外-可见分光光度计及其应用

--动画：紫外吸收光谱法外标法分析操作

--动画：紫外-可见分光计使用介绍

--讨论：比较单光束、双光束、双波长分光光度计的异同

-2.6 知识总结与典型例题

-2.7 知识拓展

--723C可见分光光度计操作规程

--TU-1810紫外-可见分光光度计操作规程

--T6紫外可见分光光度计操作规程

-章节测验

--章节测验【紫外可见光分光光度法】

3.红外吸收光谱法

-3.1 基本知识

--动画：分子的基本振动形式

--讨论：红外光谱定性分析的基本依据是什么？

-3.2 红外吸收光谱仪及其应用

--动画：红外吸收光谱仪工作原理

--动画：迈克尔逊干涉仪原理

--讨论：在红外光谱法中常用的溶剂有哪些？

-3.3 知识总结与典型例题

-3.4 知识拓展

--Nicolet is5红外光谱仪操作规程

--PerkinElmer 红外光谱仪操作规程

-章节测验

--章节测验

4.原子吸收光谱法

-4.1 概述

--讨论：原子吸收光谱法与紫外可见分光光度法比较

-4.2 基本理论

--讨论：简述原子吸收光谱产生的基本原理有哪些？

-4.3 原子吸收分光光度计

--动画：原子吸收光谱法（火焰法）分析过程

--动画：原子吸收光谱法（火焰法）工作原理

--动画：原子吸收光谱法（石墨炉法）工作原理

--讨论：简述原子吸收分光光度计的工作原理

-4.4 干扰及其消除方法

--讨论：原子吸收光谱法存在哪些主要的干扰？如何尽可能的减少或消除？

-4.5 原子吸收分析方法

--动画：原子吸收燃烧器高度对火焰法测定的影响

--讨论：简述标准加入法和标准曲线法的异同及其使用注意事项。

-4.6 知识总结与典型例题

-4.7 知识拓展

--TAS-990AFG型火焰原子吸收分光光度计操作规程

--TAS-990AFG型石墨炉原子吸收分光光度计操作规程

-章节测验

--章节测验

5.电位分析法

-5.1 概述

--视频：概述

-5.2 离子选择性电极

--视频：离子选择性电极（1）

--视频：离子选择性电极（2）

--讨论：电分析方法的优点有哪些？

-5.3 直接电位法

--视频：直接电位法

--讨论：液接电位产生的原因是什么？

-5.4 电位滴定法

--视频：电位滴定法

--讨论：盐桥的使用条件是什么？

-5.5 知识总结与典型例题

-5.6 知识拓展

--PHS-3C型pH计操作规程

--ZDJ-400全自动多功能滴定仪操作规程

-章节测验

--章节测验

6.色谱分析导论

-6.1 色谱分析法概述

--讨论：依据流动相的差异，色谱分析法可分为哪几类？

--讨论：色谱图中可以得到什么哪些信息？

-6.2 色谱分析基本理论

--讨论：塔板理论

--讨论：速率理论

--讨论：如何提高分离效果？

--讨论：色谱分离的本质是什么？

--讨论：根据速率理论，色谱分析中影响塔板高度的因素有哪些？

-6.3 色谱分析定性定量方法

--讨论：色谱分析的定性分析方法有哪些？

--讨论：色谱分析中，常用的定量分析方法有哪些？

--讨论：如何利用外标法获得待测组分的含量？

-6.4 知识总结与典型例题

-章节测验

--章节测验

7.气相色谱法

-7.1 气相色谱仪

--动画：气相色谱系统工作原理

--动画：FID检测器工作原理

--讨论交流：什么是气相色谱法？有何特点？如何进行气相色谱法的分类？

--讨论交流：气相色谱仪由哪些部件组成？各部件的功能是什么？

--讨论交流：简述TCD和FID检测器的工作原理，各适用于检测哪些类型物质？

-7.2 气相操作条件的选择与应用

--动画：分流与不分流进样

--讨论交流：气相色谱分析中，需要选择的操作条件有哪些？应如何进行选择？

--讨论交流：程序升温

--讨论交流：试述“相似相溶”原理应用于固定液选择的合理性及其存在的问题

-7.3 知识总结与典型例题

-7.4 知识拓展

--分析方法的建立

--Agilent-7890气相色谱仪操作规程

--岛津GC2014A气相色谱仪操作规程

--赛默飞TRACE 1300气相色谱仪操作规程

--全自动氢气发生器的使用

-章节测验

--章节测验

8.高效液相色谱法

-8.1 高效液相色谱的特点与仪器

--动画：液相色谱系统工作原理

--动画：六通进样阀工作原理

--动画：DAD检测器工作原理

--讨论交流：液相色谱仪为什么要采用高压？

--讨论交流：液相色谱与气相色谱有何异同点？

--讨论交流：HPLC由哪些部件组成？各部件具有什么功能？

--讨论交流：HPLC分析中常用的检测器有哪些？

-8.2 液相分离主要类型及其原理

--讨论交流：HPLC分离原理

--讨论交流：如何根据样品分析实际确定合适的分离类型？

--讨论交流：离子色谱法

-8.3 液相色谱的固定相与流动相

--讨论交流：正相色谱与反相色谱

--讨论交流：液相色谱流动相在选择时应注意哪些问题？

-8.4 液相操作条件的选择与应用

--讨论交流：HPLC分析中，影响HPLC分离的因素有哪些？如何优化选择？

--讨论交流：HPLC梯度洗脱优化原则是什么？与气相色谱的程序升温有何异同点？

-8.5 知识总结与典型例题

-8.6 知识拓展

--Agilent 1260高效液相色谱仪操作规程

--Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

--Waters2695 高效液相色谱仪操作规程

--岛津LC-20ATvp高效液相色谱仪操作规程

-章节测验

--章节测验

9.其他分析方法（选修）

-9.1 分子发射光谱法

--视频：分子发射光谱法

--视频：荧光光谱及分析方法

--讨论：荧光分析仪的单色器和检测器

-9.2 质谱法

--视频：质谱法

--动画：气质联用仪工作原理

--动画：EI离子源工作原理

--动画：四级杆分析器工作原理

--讨论：质谱有哪些常用的离子源，比较它们各自特点和应用范围。

--气相色谱-质谱联用技术发展史话

--气相色谱-质谱联用技术的典型应用

--Agilent 7890-5975气质联用仪操作规程

-9.3 核磁共振波谱法

--视频：核磁共振波谱法

--讨论：嵌段共聚物中嵌段单元组成比的分析

-章节测验

--章节测验【荧光法】

10.虚拟仿真训练

-10.1虚拟仿真实验项目

--虚拟仿真实验项目介绍

期末考试

-期末考试

分析方法的建立笔记与讨论

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