当前课程知识点:临床生物化学检验 > 第四章 酶学检测技术 > 4.3 酶循环法 > 4.3 酶循环法
同学们大家好
在酶循环法这个知识点
将介绍酶循环法概念 主要类型
并结合类型介绍其应用
酶循环法(enzymatic cycling assay)
是利用底物和辅酶的循环反应
使酶促反应产物不断扩增以利于测定的方法
是酶法分析的发展和延伸
底物循环法-氧化酶-脱氢酶系统
氧化酶使靶物质氧化
脱氢酶又把氧化态的靶物质转化成还原态
靶物质和它的氧化产物作为底物不断循环
例如甘油浓度测定时
甘油在甘油激酶催化下生成3-磷酸甘油后
再被甘油磷酸氧化酶氧化为磷酸二羟丙酮
磷酸二轻丙酮又被3-磷酸甘油脱氢酶还原为3-磷酸甘油
这样就形成了一个循环
同时伴有NADH向NAD+的转化
在反复循环中3-磷酸甘油和磷酸二羟丙酮的量不变
而产物H2O2随每次循环不断递增
NADH不断递减 使检测信号不断增强
底物循环法-脱氢酶-辅酶循环系统
该系统中靶物质(或衍生物)
及其氧化产物作为底物进入循环
反应中用一种脱氢酶和两种不同性质的辅酶
即硫代氧化型辅酶I (Thio-NAD+)
和还原型辅酶I (NADH)
在395〜415nm波长下测定反应中
氧化型Thio-NAD+转为还原型Thio-NADH的速度
例如 血清胆汁酸测定时
3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)催化胆汁酸
和3-酮类固醇之间的反应
正反应对硫代氧化型辅酶I的亲和力远远大于辅酶I
而逆反应对还原型辅酶I的亲和力
大于硫代还原型辅酶I
在反应系统中有足够的硫代氧化型辅酶I
和还原型辅酶I只要有少量的胆汁酸
就可生成少量的3-酮类固醇
并在两者之间构成循环
不断产生琉代还原型辅酶I(黄色)
按要求控制好条件
反应速度与待测物胆汁酸成正比
脱氢酶-辅酶循环系统除了可检测胆汁酸外
还可应用于肉毒碱 同型半胱氨酸
高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等的测定
循环酶法技术的发展为体液中
微量物质的准确测定提供了新方法
关于循环酶法就介绍到这里 谢谢大家
-1.1 绪论
--1.1 绪论
--1.1 绪论
-第一章知识点测试
-2.1 检验方法的评价
-2.2 临床生化检验分析质量指标
-第二章知识点测试
-3.1 参考区间
--3.1 参考区间
--3.1 参考区间
-3.2 医学决定水平
-3.3 诊断性能评价
-第三章知识点测试
-第一周测试
-4.1 酶活性测定有哪些方法?
-4.2 酶偶联法测定酶活性
-4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
-4.4 酶活性单位
-4.5 同工酶
--4.5 同工酶
--4.5 同工酶
-4.6 如何上机设定测定酶活性的K值?
-第四章随堂测试
-5.1 自动生化分析仪
-5.2 后分光技术
-5.3 试剂盒双试剂
-5.4 自动生化分析仪的基本结构
-第五章知识点测试
-第二周测试
-6.1 血清总蛋白的检测
-6.2 血清蛋白质电泳
-6.3 急性时相反应蛋白
-6.4 C-反应蛋白与超敏C-反应蛋白
-6.5 高尿酸血症与痛风
-第六章随堂测试
-7.1 血糖及影响因素
-7.2 葡萄糖的检测
-7.3 口服葡萄糖耐量试验
-7.4 HbA1c的检测
-7.5 糖尿病自身抗体的检测
-7.6 尿白蛋白的检测
-7.7 糖尿病的实验诊断
-第七章知识点测试
-第三周测试
-8.1 血脂
--8.1 血脂
--8.1 血脂
-8.2 血浆脂蛋白
--8.2血浆脂蛋白
-8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
-8.4 原发性高脂蛋白血症的临床检测
-第八章随堂测试
-第四周测试
-10.1 微量元素的检测
-10.2维生素的测定
-第十章知识点测试
-11.1 疾病时血清酶活力改变的机制
-11.2 常用血清酶在部分疾病时的改变
-第十一章随堂测试
-第五周测试
-12.1 转氨酶与肝实质细胞损伤
-12.2 肝纤维化的生物化学检测概况
-12.3 肝纤维化的生物化学检测指标
-12.4 黄疸发生的生物化学机制
-12.5 黄疸发生的生物化学鉴别诊断
-第十二章随堂测试
-13.1 肾脏疾病生物化学检验项目的选择与应用
-13.2 肾脏疾病的病例讨论
-第六周测试
-14.1 心肌损伤的生化标志物与应用
-14.2 心衰的生化标志物与应用
-第十四章随堂测试
-15.1 钙磷镁代谢异常及其检测
-15.2 骨代谢激素调节、异常及其检测
-15.3 成骨标志物及其检测
-第十五章随堂测试
-第七周测试
-16.1 下丘脑-垂体功能检查
-16.2 甲状腺功能检测
-16.3 肾上腺髓质功能检测
-16.4 肾上腺皮质功能检测
-第十六章随堂测试
-17.1 胰腺炎的生物化学检测
-第八周测试
-18.1 部分神经系统疾病的临床分子病理及实验室检测
-18.2 阿尔茨海默病的分子病理与实验检测
-18.3 脑脊液的生化检测
-第十八章随堂测试
-19.1 妊娠相关疾病诊断指标
-19.2唐氏综合征的产前筛查与产前诊断
-第九周测试
-20.1 治疗性药物监测
-第二十章知识点测试
-21.1 临床毒物检测
-21.2 铅中毒的检测
-21.3 酒驾的检测
-第十周测试
-第二十一章知识点测试
-期末考试