当前课程知识点：临床生物化学检验 > 第四章 酶学检测技术 > 4.6 如何上机设定测定酶活性的K值？ > 4.6 如何上机设定测定酶活性的K值？
同学们好
在临床用自动生化分析仪做酶活性连续监测时
参数K值要根据不同的酶测定方法
及不同的产家试剂做不同的设置
在这里就连续监测中酶活性计算K值的由来
常数K的意义与设置和K值应用 做一简要介绍
1 我们先来看一下连续监测酶活性计算中K值的由来
这里显示的是连续监测中酶活性计算公式
U/L=△A/min×1/ε×10的6次方×V/v×1/L
等式左边是U/L
等式右边 △A是吸光度变化 ε为摩尔消光系数
大写V总反应体系体积(单位ml)
小写v样本体积(单位ml) L 光径(单位cm)
连续监测中酶活性计算公式的推导如下
根据酶活性单位的定义 得
酶活性单位（U）/L=产物或底物C的改变/min 公式（1-1）
根据郎伯比尔定律 A= ε• C•L 公式 (2-1)
A 为吸光度 ε 为摩尔消光系数 C 为浓度 L 为光径(cm)
将公式 (2-1)变换得
C=A×1/ε×1/L
单位 为mol/L 公式 (2-2)
酶活性测定为从t0到t一段时间的吸光度（A）变化 即ΔA
将ΔA代公式 (2-2)中的A 得公式 C=△A×1/ε×1/L
公式（2-3）
C为样品中的浓度
因此应将实际测定的浓度乘上稀释倍数
稀释倍数=V/v 将其代入公式2-3得C=△A×1/ε×1/L×V/v
公式（2-4）
将公式（2-4）的C代入公式（1-1）
另C的浓度单位是摩尔/L,
而酶活性单位的定义应为微摩尔/L
因此应将C的浓度从摩尔/L转换成微摩尔/L 乘以106 得
U/L=△A/min×1/ε×10的6次方×1/L×V/v
公式（3-1）
因公式（3-1）中 等号右边的第2-4项均为常数 称为常数K
以K代入公式（3-1）得
U/L=△A/min×K
2 常数K的意义 设置
K为酶活性浓度定量系数（或称为常数）
主要用于临床酶活性测定的计算与校准
（1）系数K值的意义与设置
K值对于酶的测定十分重要
过高虽然测定的线性较宽 但重复性差
反之 虽然精密度好 但检测线性窄
K值的设置应考虑测定酶的参考范围上限
及测定时间两方面 以保证测定结果的可靠
临床K值的设定方法
临床K值的设定有如下5种方法
1 根据测定系统实际性能设定K值(即真实K值)
方法 自行测定各自仪器所有的决定K值的4个参数
（V v ε L)的实际量 然后计算出的K值
2 根据理论摩尔消光系数(ε)设定K值(即理论K值)
方法 用所测定的物质的理论ε
及仪器标示的其它参数按公式计算出的K值
3 根据实测ε设定K值(即实测K值)
方法 使用已知浓度的指示物的标准品
(如NADH 对硝基酚（4-NP）对硝基苯胺（4-NA）等)
在各自的仪器上测定吸光度
根据标准品的浓度和吸光度值计算出K值
实际上这种方法测定的是实际的ε
然后根据实测的ε得到K值
4 利用酶校准物直接校准K值(即校准K值)
方法 利用定值的酶标准品(校准物)进行校准后得到的K值
此方法可校正仪器 试剂及反应条件等差异
所造成的准确度的偏差
5 厂家提供的K值(即厂家K值)
方法 一些试剂或仪器的生产厂家会给用户提供
测定酶活性时的K值
这些K值可来自使用相同机型的报告
以往相关方法的结果 生产厂家的测定结果等
（2）系数K值应用
系数K值只能供用户通过计算式求实测K值时参考
不能直接用于酶活性浓度的计算
常用指示物的摩尔消光系数（cm2·mol-1）与用途列于下表
表中第一列为指示物
第二列为主波长摩尔消光系数
第三列为次波长摩尔消光系数
第四列为用途 即用来进行K值校定的酶
从表中可见 NADH可用于ALT AST LD
α-羟丁酸脱氢酶（α-HBD）等的K值校定
NADPH可用于G6PD CK的K值校定
对硝基苯酚和对硝基苯胺
可分别用于ALP和γ-GT的的K值校定
关于如何上机设定测定酶活性的K值就介绍到这
谢谢大家
-1.1 绪论
--1.1 绪论
--1.1 绪论
-第一章知识点测试
-2.1 检验方法的评价
-2.2 临床生化检验分析质量指标
-第二章知识点测试
-3.1 参考区间
--3.1 参考区间
--3.1 参考区间
-3.2 医学决定水平
-3.3 诊断性能评价
-第三章知识点测试
-第一周测试
-4.1 酶活性测定有哪些方法？
-4.2 酶偶联法测定酶活性
-4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
-4.4 酶活性单位
-4.5 同工酶
--4.5 同工酶
--4.5 同工酶
-4.6 如何上机设定测定酶活性的K值？
-第四章随堂测试
-5.1 自动生化分析仪
-5.2 后分光技术
-5.3 试剂盒双试剂
-5.4 自动生化分析仪的基本结构
-第五章知识点测试
-第二周测试
-6.1 血清总蛋白的检测
-6.2 血清蛋白质电泳
-6.3 急性时相反应蛋白
-6.4 C-反应蛋白与超敏C-反应蛋白
-6.5 高尿酸血症与痛风
-第六章随堂测试
-7.1 血糖及影响因素
-7.2 葡萄糖的检测
-7.3 口服葡萄糖耐量试验
-7.4 HbA1c的检测
-7.5 糖尿病自身抗体的检测
-7.6 尿白蛋白的检测
-7.7 糖尿病的实验诊断
-第七章知识点测试
-第三周测试
-8.1 血脂
--8.1 血脂
--8.1 血脂
-8.2 血浆脂蛋白
--8.2血浆脂蛋白
-8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
-8.4 原发性高脂蛋白血症的临床检测
-第八章随堂测试
-第四周测试
-10.1 微量元素的检测
-10.2维生素的测定
-第十章知识点测试
-11.1 疾病时血清酶活力改变的机制
-11.2 常用血清酶在部分疾病时的改变
-第十一章随堂测试
-第五周测试
-12.1 转氨酶与肝实质细胞损伤
-12.2 肝纤维化的生物化学检测概况
-12.3 肝纤维化的生物化学检测指标
-12.4 黄疸发生的生物化学机制
-12.5 黄疸发生的生物化学鉴别诊断
-第十二章随堂测试
-13.1 肾脏疾病生物化学检验项目的选择与应用
-13.2 肾脏疾病的病例讨论
-第六周测试
-14.1 心肌损伤的生化标志物与应用
-14.2 心衰的生化标志物与应用
-第十四章随堂测试
-15.1 钙磷镁代谢异常及其检测
-15.2 骨代谢激素调节、异常及其检测
-15.3 成骨标志物及其检测
-第十五章随堂测试
-第七周测试
-16.1 下丘脑-垂体功能检查
-16.2 甲状腺功能检测
-16.3 肾上腺髓质功能检测
-16.4 肾上腺皮质功能检测
-第十六章随堂测试
-17.1 胰腺炎的生物化学检测
-第八周测试
-18.1 部分神经系统疾病的临床分子病理及实验室检测
-18.2 阿尔茨海默病的分子病理与实验检测
-18.3 脑脊液的生化检测
-第十八章随堂测试
-19.1 妊娠相关疾病诊断指标
-19.2唐氏综合征的产前筛查与产前诊断
-第九周测试
-20.1 治疗性药物监测
-第二十章知识点测试
-21.1 临床毒物检测
-21.2 铅中毒的检测
-21.3 酒驾的检测
-第十周测试
-第二十一章知识点测试
-期末考试
