当前课程知识点：临床生物化学检验 > 第四章 酶学检测技术 > 4.1 酶活性测定有哪些方法？ > 4.1 酶活性测定有哪些方法？
同学们 大家好
这个知识点给大家介绍酶活性测定有哪些方法
临床需要检测体液（如血浆或血清）中的酶
来辅助疾病诊断
酶活性测定常用两类方法
定时法和连续监测法
我们先来看一张图
酶反应的时间进程曲线
（Progress curve of a typical enzyme reaction）
横坐标为时间 纵坐标为产物的生成
从图中可以看到酶催化的反应分为两个阶段
反应之初 酶反应生成的产物随时间成直线增高
图中绿线所示部分 称为线性反应期
随着酶反应的进行
酶催化生成的产物随时间不成直线增高
而呈现为曲线
如图中红线所示 称为非线性期
如果我们要对该酶催化的反应进行测定
可以采用定时法
从酶促反应起始取一点为t0
然后在酶反应的时间进程中任取一点为t1
一般是15’到30’
测定单位时间内产物的生成量
来求得酶反应速度(v=[P]/t 为平均反应速度)
由此测得酶活性
比如从t0到t1 t0为反应起始 时间为0 产物为0
t1如取在线性反应期内（绿线部分）的任意一点测定
酶反应速度始终恒定
但如果t1取在线性期以外（即红线部分）
将导致酶活性测定出现误差
如何保证酶活性测定在线性范围内
从而避免出现误差呢
可以采用连续监测法
即间隔比固定时间法更短的时间
一般是15’’-1’
连续对酶促反应产物的量进行测定
这样就可动态监测酶促反应测定的
是线性期还是非线性期
并准确测得酶反应的初速度
（v=d[P]/dt 即瞬时反应速度）
求得酶活性
下面概括总结定时法和连续监测法的定义及特点
定时法(又称固定时间法 取样法 两点法)
其定义为
通过测定酶反应开始后某一时间内产物或底物浓度
的总变化量来求酶反应初速度的方法
定时法的优点是 1 方法简单
2 测定时酶反应已终止 无需保温
3 显色剂选择时 无需考虑对酶活性的影响
定时法的缺点是
测定可能存在误差 须经预试验
了解反应速度呈线性的时间
定时法可能引起的误差原因有
a 两点间呈线性（少见）
b 线性期短 大部分为非线性(最常见)
c 包括了延滞期
d 包括了延滞期和非线性部分
因为测定不够准确
实际测得的是平均速度 致使结果偏低
连续监测法
又称为动力学方法 或速率法
其定义为
连续测定酶反应过程中某一反应产物
或底物浓度随时间的变化来求酶反应初速度的方法
这里讲的连续其实是每间隔一定时间
一般是15秒~1分钟对酶促反应进行一次测定
连续监测法的优点是
能动态了解反应速度
易区分零级和一级反应期及延滞期
其缺点是 测定时需保温
检测有限制 要求被测物S与P间理化特性有差异
或者显色剂对酶活性无影响
关于连续监测法应注意
①连续监测法测定包括了
延滞期 线性期 非线性期(动态期)v 平衡期v
能动态定量描述酶反应过程 早期称为动态法
②应当注意速度计算
线性期 初v符合米氏方程的变量关系
非线性期 v不能简单地按米氏方程的计算
它是表观速度或称反应净速度 因为存在逆反应
③由于酶偶联技术的应用连续监测法的应用范围得以
大大地扩展(无需S P间有理化特性差异)
④除上述两法外还有其他一些方法 如平衡法
平衡法（又称终点法）
通过测定酶反应开始至反应达到平衡时产物
或底物浓度总变化量来求出酶活力的方法
关于酶活性测定有哪些方法就介绍到这里 谢谢
-1.1 绪论
--1.1 绪论
--1.1 绪论
-第一章知识点测试
-2.1 检验方法的评价
-2.2 临床生化检验分析质量指标
-第二章知识点测试
-3.1 参考区间
--3.1 参考区间
--3.1 参考区间
-3.2 医学决定水平
-3.3 诊断性能评价
-第三章知识点测试
-第一周测试
-4.1 酶活性测定有哪些方法？
-4.2 酶偶联法测定酶活性
-4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
--4.3 酶循环法
-4.4 酶活性单位
-4.5 同工酶
--4.5 同工酶
--4.5 同工酶
-4.6 如何上机设定测定酶活性的K值？
-第四章随堂测试
-5.1 自动生化分析仪
-5.2 后分光技术
-5.3 试剂盒双试剂
-5.4 自动生化分析仪的基本结构
-第五章知识点测试
-第二周测试
-6.1 血清总蛋白的检测
-6.2 血清蛋白质电泳
-6.3 急性时相反应蛋白
-6.4 C-反应蛋白与超敏C-反应蛋白
-6.5 高尿酸血症与痛风
-第六章随堂测试
-7.1 血糖及影响因素
-7.2 葡萄糖的检测
-7.3 口服葡萄糖耐量试验
-7.4 HbA1c的检测
-7.5 糖尿病自身抗体的检测
-7.6 尿白蛋白的检测
-7.7 糖尿病的实验诊断
-第七章知识点测试
-第三周测试
-8.1 血脂
--8.1 血脂
--8.1 血脂
-8.2 血浆脂蛋白
--8.2血浆脂蛋白
-8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
--8.3 载脂蛋白
-8.4 原发性高脂蛋白血症的临床检测
-第八章随堂测试
-第四周测试
-10.1 微量元素的检测
-10.2维生素的测定
-第十章知识点测试
-11.1 疾病时血清酶活力改变的机制
-11.2 常用血清酶在部分疾病时的改变
-第十一章随堂测试
-第五周测试
-12.1 转氨酶与肝实质细胞损伤
-12.2 肝纤维化的生物化学检测概况
-12.3 肝纤维化的生物化学检测指标
-12.4 黄疸发生的生物化学机制
-12.5 黄疸发生的生物化学鉴别诊断
-第十二章随堂测试
-13.1 肾脏疾病生物化学检验项目的选择与应用
-13.2 肾脏疾病的病例讨论
-第六周测试
-14.1 心肌损伤的生化标志物与应用
-14.2 心衰的生化标志物与应用
-第十四章随堂测试
-15.1 钙磷镁代谢异常及其检测
-15.2 骨代谢激素调节、异常及其检测
-15.3 成骨标志物及其检测
-第十五章随堂测试
-第七周测试
-16.1 下丘脑-垂体功能检查
-16.2 甲状腺功能检测
-16.3 肾上腺髓质功能检测
-16.4 肾上腺皮质功能检测
-第十六章随堂测试
-17.1 胰腺炎的生物化学检测
-第八周测试
-18.1 部分神经系统疾病的临床分子病理及实验室检测
-18.2 阿尔茨海默病的分子病理与实验检测
-18.3 脑脊液的生化检测
-第十八章随堂测试
-19.1 妊娠相关疾病诊断指标
-19.2唐氏综合征的产前筛查与产前诊断
-第九周测试
-20.1 治疗性药物监测
-第二十章知识点测试
-21.1 临床毒物检测
-21.2 铅中毒的检测
-21.3 酒驾的检测
-第十周测试
-第二十一章知识点测试
-期末考试
