6.2 血清蛋白质电泳在线视频

同学们好

这次课

我们一起来学习

血清蛋白质电泳

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首先我们先来了解

什么是血清蛋白质电泳

电泳是物质分离

纯化

或者鉴定的一种技术方法

它指的是

带电粒子

在直流电场中

向着电性相反的

电极

移动的现象

换句话说

就是在电场作用下

带正电荷的物质

向负极移动

带负电荷的物质

向正极移动

血清蛋白质电泳

是利用不同的血清蛋白质

所带

电荷量的多少

分子量的大小

以及分子形状上的差异

在电场中

泳动速度不同

从而达到

分离

鉴定的目的

我们都知道

所有的血清蛋白质

等电点

都小于7.5

因此

在pH 8.6的

缓冲液中

血清中各种蛋白质

都带有负电荷

在电场中

都向正极移动

但是因为各种蛋白质的

pI不同

在相同pH条件下

带负电荷的多少

就会有差异

同时

各蛋白质的分子大小

与分子形状

也不尽相同

具体来说

带负电荷越多

分子量越小

分子形状

越接近球形的蛋白质

泳动速度

较快

反之

则较慢

血清蛋白质电泳

是临床常规检测项目

最为常见的

是醋酸纤维素薄膜电泳

和琼脂糖凝胶电泳

此外

毛细管电泳

免疫固定电泳

以及双向电泳

等电泳技术

也越来越广泛的

在临床上

得到应用

比如

对多发性骨髓瘤

巨球蛋白血症

轻链病等

这些浆细胞病进行诊断

和研究时

就需要用到

免疫固定电泳技术

这些图片

显示的是血清蛋白质电泳时

需要使用的一些

主要的仪器设备

包括电泳仪

电泳槽

以及光密度

扫描仪等等

接下来

我们一起来讨论一下

正常的血清蛋白质电泳图谱

有哪些基本的特征

醋酸纤维素薄膜电泳

或者琼脂糖凝胶电泳

可以将血清蛋白质

分开为

5个区带

也就是五类

蛋白质

从正极端到负极端

依次是

白蛋白

α1球蛋白

α2球蛋白

β球蛋白

和γ球蛋白

如果是新鲜血清标本

或者是缓冲液中

存在钙离子的条件下

β球蛋白

还可以细分成

β1球蛋白

和β2球蛋白两个组分

值得注意的是

除了白蛋白以外

其他的各个电泳区带

都包含有

多种的血清蛋白质

我们利用光密度计

对染色以后的蛋白质区带

进行扫描

就可以得到

血清蛋白质的

扫描曲线

我们大家都知道

白蛋白是血清中

含量最高的蛋白质组分

因此扫描曲线中

白蛋白区带

又宽又高又尖

全自动光密度计

可以通过将扫描曲线中

各个区带的光密度值

进行积分

这样

就可以自动地报告出

各区带蛋白质

占总蛋白的

百分比例

对于正常的血清蛋白质电泳而言

各区带蛋白质

占总蛋白百分比的参考区间

依次是

白蛋白

占总蛋白的

57.0％～68.0％

α1-球蛋白

占1.0％～5.7％

α2-球蛋白

占4.9％～11.2％

β-球蛋白

占7.0％～13.0％

而γ-球蛋白

可以占到总蛋白的9.8％～18.2％

下面这张表

反映的是

各个蛋白质区带中

所包含的主要

血清蛋白质

含量

及其理化性质

刚才我们已经提到了

除了白蛋白以外

其他的蛋白区带

实际上是多种蛋白质的混合物

比如

α1-球蛋白区带

主要包含

α1-抗胰蛋白酶

α1-酸性糖蛋白

α2-球蛋白

主要有α2-巨球蛋白

结合珠蛋白

以及铜蓝蛋白

β-球蛋白的主要组分

是转铁蛋白

血红素

结合蛋白

C3补体等

而γ-球蛋白

主要由

各种类型的

免疫球蛋白组成

还包括重要的急性时相反应蛋白

C-反应蛋白

血清蛋白质电泳

有哪些临床应用呢

我们可以从两个方面来考虑

一方面是血清蛋白电泳异常图谱的

临床分型

另一个

就是

介绍一些典型的

血清蛋白电泳的

异常图谱

这里需要向大家说明的是

由于各区带由多种蛋白组成

而在临床上

很多有着较高诊断价值的蛋白质

都是微量存在的

它们的浓度改变

一般而言

不会对电泳图谱

产生明显的影响

这样一来

就局限了

血清蛋白质电泳的

临床应用范围

因此我们下面举的一些例子

都是可以

导致电泳图谱出现明显的改变

具有一定临床意义的疾病

我们先

通过这个表来了解一下

血清蛋白电泳

异常图谱的临床分型

当出现表中第一列

所列出的某种疾病时

血清总蛋白TP

白蛋白

以及α1 α2 β γ球蛋白等

可能会出现

含量上的变化

表中符号N

代表正常

单箭头

表示轻度升高或降低

双箭头

表示显著升高或降低

比如

低蛋白血症

其电泳图谱的异常之处

主要表现在

由于白蛋白的显著减少

而导致

血清总蛋白TP的

大幅度降低

同时

伴有β球蛋白的减少

下面我们来学习一些典型的

血清蛋白电泳图谱异常改变的实例

这是一个多发性骨髓瘤的电泳图谱

多发性骨髓瘤

是浆细胞病的一种

发生恶性浆细胞病时

会出现异常的

浆细胞克隆增殖

从而产生大量的单克隆

免疫球蛋白

或者是它的轻链

或是重链的片段

病人的血清或者尿液中

可以出现结构单一的

被称为M蛋白的蛋白质

在电泳图谱上呈现出一个色泽深染的

窄区带

这个窄区带

比较多见于γ区

或β区

偶尔

也可见于α区

除了多发性骨髓瘤以外

临床上还有巨球蛋白血症

轻链病

重链病

以及恶性淋巴瘤等

都属于恶性浆细胞病

这是肝硬化的电泳图谱

电泳图谱的改变

主要表现在

白蛋白中度

或高度减少

γ-球蛋白

明显升高

其中IgG抗体

呈弥散性增高

而IgA抗体

则出现

显著的增高

由于IgA

在电泳图谱上的位置

介于

β区带和γ区带之间

因此

典型的肝硬化的电泳图谱

会出现

β和γ区带

融合的现象

称之为

β-γ桥

对肾病综合征的病人而言

由于从尿中

可以选择性的排出

大量的

小分子量的白蛋白

从而使得血清中

白蛋白的含量

明显下降

而大分子量的α2-巨球蛋白

脂蛋白

IgM等

大分子蛋白质

残留在血中

使得α2-球蛋白的百分比

显著增高

β-球蛋白

也明显升高

γ-球蛋白

可以维持不变

或者是

相对下降

急性感染时

由于急性时相反应蛋白的合成增加

可以见到α1和α2球蛋白

升高

γ球蛋白正常

但在慢性炎症期或感染后期

合成免疫球蛋白的各种细胞

开始全面增殖

使得多克隆免疫球蛋白增多

从而γ球蛋白区带

呈弥散性升高

而低免疫球蛋白血症的情况

正好相反

无论是先天性的

丙种球蛋白缺乏症

还是由于免疫系统的肿瘤

肾病综合症

或慢性肾炎

等各种疾病

造成的继发性免疫球蛋白

缺乏症

血清蛋白电泳图谱

都表现为

γ球蛋白的

极度下降

或者缺乏

最后我们来了解一下双白蛋白血症

和白蛋白缺乏症的

血清蛋白电泳图谱改变

顾名思义

双白蛋白血症就是在白蛋白区带

出现了“双头”

这样的峰型

其中的原因

既有可能是

受遗传的影响

也有可能是

由于大剂量的

β 酰胺类抗生素治疗

或者是

急性胰腺炎

所引起的一过性的现象

而白蛋白缺乏症的电泳图谱改变

一目了然

白蛋白区带的蛋白水平

极度的低下

好

这节课我们主要介绍了

血清蛋白质电泳的概念

血清蛋白电泳图谱的基本特征

以及血清蛋白质电泳在临床上的

一部分的应用

希望对大家能有所帮助

谢谢大家