当前课程知识点：药物分析 > 第九章 中药分析 > 9.4 中药的鉴别（二） > 中药的鉴别（二）
大家好
上节课的学习中我们知道薄层色谱法
是中药鉴别的首选方法
今天我们学习薄层色谱鉴别
薄层色谱法系将
供试品溶液点于薄层板上
在展开容器内用展开剂展开
使供试品所含成分分离
所得色谱图与适宜的标准物质
按同法所得的色谱图对比
并可用薄层扫描仪进行扫描
用于鉴别、检查或含量测定
中药薄层色谱鉴别法是按
各品种项下规定的方法
制备供试品溶液和对照标准溶液
在同一薄层板上点样、展开与检视
供试品色谱图中所显斑点的位置
和颜色(或荧光)应与标准物质
色谱图的斑点一致
在这里我们需要注意我们采用
适宜的标准物质制备的对照溶液
称为“对照标准溶液”
获得的薄层色谱图称为
“标准物质色谱图谱”
那么
中药的标准物质包括哪些呢？
中药鉴别用标准物质主要包括
对照品 对照药材 对照提取物3种
一般情况下
选用对照品即可满足薄层鉴别的需要
但是有些情况需要结合对照药材
或对照提取物才能确定制剂的真实性
薄层色谱的操作方法
在仪器分析中已学习
在此不再赘述
薄层色谱法系统适用性试验
主要要求
比移值 检出限和分离度
其中TLC用于鉴别时
要求供试品与标准物质色谱中
斑点均应清晰分离
我们来介绍一下影响TLC法鉴别的因素
供试品溶液的制备
不同种类的溶剂对原点
及分离后斑点的形状有影响
应选择极性小的溶剂
只有在供试品极性较大
薄层板的活性较大时
才选择极性大的溶剂
供试液的浓度要适宜
点样量不超过10 μl
中药的供试品溶液制备中
提取纯化
取样、溶解和点样均应定量操作
给真伪鉴别以量化的评价
从而提供样品优劣的信息
对照标准溶液的制备
一般情况下
选用对照品可满足薄层鉴别的需要
而有些情况需结合对照药材
或对照提取物以提高鉴别准确性
薄层色谱方法建立过程中
为了验证薄层鉴别的专属性
需要制备对照品溶液
阳性对照液和阴性对照液
对照品溶液
用已知中药的某一有效成分
或特征性成分对照品制成对照液
阳性对照液/对照药材溶液
将制剂中待鉴别某药味的对照药材按
制剂供试品溶液的制备方法
制备的对照液
阴性对照液
从制剂处方中除去待鉴别的某药味
其余各药味按制法得到
阴性制剂（缺味制剂）
再以制备相同比例
条件 方法制备的对照液成为阴性对照液
将样品和阳性对照液
阴性对照液在同一条件下展开
观察样品在同一位置上
与阳性对照液有无相同颜色的斑点
同时阴性对照液有无干扰
确定该鉴别方法的专属性
用阳性和阴性对照液对照
最好选择几种色谱条件分别展开
将所得结果综合分析
同时
对照液的浓度应尽量接近供试液的浓度
以对照药材为对照时
应按处方量制成一定量
当对照品无法鉴别
增设对照药材可以准确检验中药真伪
在点样的过程当中
普通薄层板的点样量在10 μl以下
高效薄层板在5 μl以下
原点“超载”时 展开剂“绕行”
使斑点拖尾
点样速度要快
以不超过10 min为宜
点样环境的相对湿度在65 %以下
在薄层色谱的展开中
预饱和/预平衡克服边缘效应
减小层析缸体积
层析缸内壁贴浸有展开剂滤纸条
点样薄层板预饱和15-30min
这些手段度能够达到克服边缘效应的作用
另外 两侧边缘尽量不点样
距薄层板边缘1~1.5cm点样
影响薄层色谱因素 相对温度和湿度
温度影响展开缸中展开剂
各溶剂的蒸气比例
相对湿度可用饱和盐溶液调控
如人参
其TLC受温度影响较大
与26度相比
在10度时其各斑点分离度良好
可清晰分离
其获得的色谱信息更加丰富
检视 光学定位法为首选方法
接下来我们想以一个中药分析实例来
介绍薄层色谱鉴定
如 仙珍骨宝胶囊中蛇床子TLC鉴别
仙珍骨宝胶囊为医院制剂
由蛇床子 淫羊藿等药材
制成的中药复方制剂
用于治疗各类骨质疏松症
蛇床子为其君药
主要有效成分——蛇床子素
为香豆素类化合物
具有镇静催眠 改善学习记忆
调节内分泌 抗骨质疏松
抗诱变等药理作用
薄层色谱方法建立时
制备供试品溶液
对照品溶液和对照药材溶液
以及缺蛇床子的阴性对照溶液
香豆素类成分是一类具有
苯并α-吡喃酮环结构的化合物
游离香豆素多为亲脂性化合物
易溶于苯 乙醚 三氯甲烷等有机溶剂
本方法采用三氯甲烷作为提取溶剂
制备供试品溶液
阴性对照液和阳性对照液
在方法摸索中
考察了苯-乙酸乙酯
石油醚-乙酸乙酯
环己烷-乙酸乙酯
甲苯-乙酸乙酯
4种不同溶剂系统的薄层色谱
对展开效果的影响
比较了UV365nm
和UV254nm2种检视方法
结果表明
甲苯-乙酸乙酯（9∶1）展开效果佳
蛇床子素的特征斑点分离良好
色谱清晰
斑点无拖尾现象
可用于仙珍骨宝胶囊中蛇床子素的鉴别
紫外光灯（254 nm）下检视效果更佳
故选择254 nm下检视
我们看一下方法学验证的过程
专属性考察
供试品色谱在与对照品
对照药材相应位置上显示
相同颜色的荧光斑点
阴性对照溶液对鉴别无干扰
表明方法专属性良好
耐用性考察
在固定温度和相对湿度条件下
比较了市售硅胶G薄层板与自制
手铺硅胶G薄层板展开的效果
结果二者展开效果无明显差别 另外
取点样后的薄层色谱板
分别在相对湿度固定
9 ℃和30 ℃不同温度下展开
结果表明
不同温度对薄层色谱无显著影响
方法对不同展开温度的适应性较好
经上述方法学验证的结果表明
该作者建立的方法专属性强
耐用性好
最后用思维导图对本节内容进行小结
希望大家课后及时复习
今天的课就上到这里
下次课见
谢谢大家！
-1.1 药物分析的性质与任务
-第一章单元测试
-2.1 中国药典（一）
--中国药典（一）
-2.2 中国药典（二）
--中国药典（二）
-2.3 中国药典（三）
--中国药典（三）
-2.4 国际药品标准
--国际药品标准
-2.5 药品检验与监督
--药品检验与监督
-2.6 药品检验工作的基本程序
-2.7 药品管理规范
--药品管理规范
-第二章单元测试
-3.1 物理常数测定法-熔点
-3.2 物理常数测定法-吸收系数
-3.3 物理常数测定法-比旋度
-3.4 化学鉴别法
--化学鉴别法
-3.5 光谱鉴别法
--光谱鉴别法
-3.6 色谱鉴别法
--色谱鉴别法
-第三章单元测试
-4.1 药物中杂质的来源及分类
-4.2 杂质的限量要求与计算
-4.3 一般杂质的检查（一）
-4.4 一般杂质的检查（二）
-4.5 一般杂质的检查（三）
-4.6 一般杂质的检查（四）
-4.7 特殊杂质的检查（一）
-4.8 特殊杂质的检查（二）
-第四章单元测试
-5.1 容量分析法-酸碱滴定法
--容量分析法-概述
-5.2 容量分析法-酸碱滴定法
-5.3 容量分析法-氧化还原滴定法
-5.4 容量分析法-非水溶液滴定法
-5.5 紫外-可见分光光度法——概述
-5.6 紫外-可见分光光度法——比色法
-5.7 紫外-可见分光光度法——计算分光光度法
-5.8 高效液相色谱法（一）
-5.9 高效液相色谱法（二）
-5.10 气相色谱法
-5.11 样品的前处理方法（一）
-5.12 样品的前处理方法（二）
-5.13 药品分析方法的验证（一）
-5.14 药品分析方法的验证（二）
-第五章单元测试
-6.1 苯巴比妥及其制剂的分析
-6.2 司可巴比妥钠及其制剂的分析
-6.3 阿司匹林及其制剂的分析
-6.4 盐酸普鲁卡因及其制剂的分析
-6.5 磺胺甲噁唑及其制剂的分析
-6.6 左氧氟沙星及其制剂的分析
-6.7 异烟肼及其制剂的分析
-6.8 硝苯地平及其制剂的分析
-6.9 盐酸氯丙嗪及其制剂的分析
-6.10 盐酸麻黄碱及其制剂的分析
-6.11 硫酸阿托品及其制剂的分析
-6.12 硫酸奎宁及其制剂的分析
-6.13 地塞米松磷酸钠及其制剂的分析
-6.14 黄体酮及其制剂的分析
-6.15 维生素 B1 及其制剂的分析
-6.16 维生素 C 及其制剂的分析
-6.17 青蒿素及其制剂的分析
-6.18 青霉素钠及其制剂的分析
-6.19 头孢丙烯及其制剂的分析
-6.20 硫酸链霉素及其制剂的分析
-6.21 硫酸庆大霉素及其制剂的分析
-6.22 盐酸四环素及其制剂的分析
-第六章单元测试
-7.1 代表性辅料分析（一）
-7.2 代表性辅料分析（二）
-第七章单元测试
-8.1 制剂分析及其特点
--制剂分析及其特点
-8.2 片剂分析
--片剂分析
-8.3 注射剂分析
--注射剂分析
-8.4 复方制剂分析
--复方制剂分析
-第八章单元测试
-9.1 中药分析及其特点
--中药分析及其特点
-9.2 中药分析中样品处理方法
-9.3 中药的鉴别（一）
--中药的鉴别（一）
-9.4 中药的鉴别（二）
--中药的鉴别（二）
-9.5 中药指纹图谱与特征图谱
-9.6 中药的检查（一）
--中药的检查（一）
-9.7 中药的检查（二）
--中药的检查（二）
-9.8 中药的含量测定（一）
-9.9 中药的含量测定（二）
-第九章单元测试
-10.1 生物药物分析的特点
-10.2 生化药物分析
--生化药物分析
-10.3 生物制品分析
--生物制品分析
-第十章单元测试
-11.1 体内药物分析概述
--体内药物分析概述
-11.2 常用体内生物样品的制备与贮存
-11.3 体内生物样品分析的前处理（一）
-11.4 体内生物样品分析的前处理（二）
-11.5 体内分析方法的建立
-11.6 体内药物分析方法的建立与验证（一）
-11.7 体内药物分析方法的建立与验证（二）
-11.8 体内药物分析方法的建立与验证（三）
-第十一章单元测试
