中药的含量测定（一）在线视频

大家好

今天我们学习中药的含量测定

中药的含量测定是指运用物理

化学或生物的方法

对中药所含成分的有效成分

有毒成分

指标性成分或类别成分进行测定

以评价其内在质量

保证中药安全有效的项目和方法

面对复杂的中药

我们进行中药含量测定时

会涉及到测定什么成分

采用什么分析策略

用什么方法来测定

从而达到分析目的

这3类问题

只有综合分析

制定合理的分析方案

才能达到实现中药含量

测定的目的和意义

现在我们就围绕这三个问题来介绍一下

中药含量测定的主要特点

我们从第一个问题

测定什么成分来剖析

在进行中药含量测定之前

首选要选择测定指标

虽然中药组成复杂

大多有效成分及作用机理不十分清楚

但是必须要从质量控制目的出发

综合当前中药基础研究现状

选择对控制中药的有效性

安全性和质量稳定性有益的成分为指标

对于中药制剂来说

在选择测定成分之前

首先需要先选定测定药味

依据中医药理论的指导

首选君药 贵重药 毒剧药

对于上述药味基础

研究薄弱或无法进行含量测定

可依次选择臣药及其他的佐使药

测定成分的选择

我们对于有效成分清楚的中药

首选有效成分作为含量测定指标

从而保证中药的有效性

如含有水溶性酚酸类成分

和脂溶性丹参酮类成分

是丹参药材活血化瘀的主要活性成分

中国药典规定其含量测定

分别测定丹酚酸B和

丹参酮类这两大类成分含量

因此

以丹参活血化瘀为主的中药制剂中

应测定丹酚酸类或丹参酮类成分含量

以保证制剂的有效性

同时需要注意

含量特别低的有效成分

受限于仪器的检测限和灵敏度

不宜作为含量测定指标

选择毒剧成分

我们要保证中药的安全性

中药毒剧成分是指

有毒或者作用剧烈的成分

毒剧成分又分为两类

一类是毒效成分

即有毒性或作用剧烈

同时又是治疗疾病的物质基础

这一类成分我们需要

通过研究建立安全的使用范围

建立合理用药的含量区间

如川乌

草乌等含有的乌头酯型生物碱

马钱子中的士的宁

对于原药材需测定这些成分的含量

并且在饮片和制剂中规定含量的限幅度

从而保证制剂的安全性和有效性

第二类是毒性成分

这类成分基本不具有治疗疾病的作用

如细辛中马兜铃酸类成分的含量

在应用含有毒性成分药材时

我们需要严格控制毒性成分含量

建立含量限度指标

规定其含量上限

以保证制剂的安全性

测定成分的选择

我们还可以选择不稳定性成分

控制中药质量稳定性

中药材

饮片

制剂中如含有理化性质

不稳定或者易损失成分

如挥发性成分

应对其建立含量测定方法

规定合理的含量范围

并据此规定中药

有效期和相应包装贮存条件

保证有效期内中药质量的稳定有效

第四

测定总成分或有效部位

对于尚无法建立有效成分含量

或虽已建立含量测定

但所测定成分与功效

相关性差或含量低的药材和饮片

而其有效成分类别清楚的

可测定某一类总成分的含量

如总黄酮

总生物碱

总皂苷

总有机酸和总挥发油等

中药提取物对于有效部位

组分提取物必须建立

成分类别的含量测定方法

需要注意的是

测定总成分或有效部位

需要注意非测定成分的干扰

因为测定总成分多为官能团的反应

其专属性相对较差

注意排除干扰

第五 测定专属性成分

中药中常含有多种共性成分

如乌梅丸中同时含有黄连和黄柏

小檗碱是其共性成分

仅仅选择小檗碱

作为含量测定指标就不能很好地

发挥质量控制的作用和意义

因此

应选择专属性强的成分

比如分别测定黄连碱和黄柏碱

同时

再规定黄连和黄柏中小檗碱的总量

第六 测定成分应要注意与中医理论

炮制机制

生产工艺相结合

药材

饮片含有多种活性成分

应尽可能选择与中医用药功能

主治相关成分

我们之前例举过山楂

即依据该药味在处方

的功能主治选择测定成分

非生品的饮片宜结合炮制机制的研究

选择适宜的指标成分

中药制剂测定成分

应尽量与饮片含量测定成分相对映

与生产工艺和功效相关

如复方丹参片和复方丹参滴丸

其制剂工艺不同

选择不同成分进行测定

第七 有效成分不明确的中药制剂

对于有效成分不清楚的中药制剂

可以采用以下几种方法

一是选择专属性强的

指标性成分进行测定

其含量的高低可以

代表药材在制剂中的量

二是测定浸出物

浸出物测定要注意溶剂的选择

一般不选水或者乙醇

其溶出总量太大

很难反映出原料药物

制剂工艺等对制剂品质的影响

三是化学成分含量测定有困难时

可以考虑建立生物测定等其它方法

第八 注意事项

注意应选择测定药材

饮片所含的原形成分

不宜选择测定分解产物

不宜采用无专属性的

指标成分和微量成分定量

系列品种应尽可能选用

相同的检测指标及方法

如六味地黄系列品种

大蜜丸

浓缩丸

软胶囊等5个品种

均选用相同的含量测定指标和方法

而指标的限度各不相同

接下来我们来回到提出

的第2个问题

分析策略的选择

单味中药所含成分众多

中药制剂多由多个中药材组成

最多可以达到几十种中药材

按我们刚刚讲的原则

选定测定指标往往很多

虽然从理论上讲

测定所有的有效成分

毒剧成分才能控制

中药的有效性和安全性

但是在实际工作中是不现实的

缺乏可行性

因此

在选择测定指标时要综合考虑成分

种类

数量等因素

从实际出发达到简便

有效

经济合理地控制中药质量的目的

中国药典

目前的质量标准中

还是以单一成分定量为多

单一成分含量测定

所选择指标往往选择药效明确

含量较高

专属性较强的成分

如延胡索的药材和饮片均测定

有效成分延胡索乙素的含量

单一成分的测定

是目前受到中药

药效物质基础研究的局限

以及对照品不足等因素的限制

而不得不暂时选择的分析策略

对于有效成分类型或有效部位明确

含量较高

且有效成分数量较多的中药

不仅可以测定单一成分含量

也可以考虑增加

总成分或有效部位的测定

如槐花中总黄酮占8.0%

单体黄酮——芦丁占6.0%

分别测定总黄酮和芦丁的含量

可较好地控制其质量

中药的疗效往往是处方中

各药味通过协同 增效 拮抗

解毒等作用共同达到的

因此

含量测定时我们要综合

考虑各药味所含的有效成分

特征性成分

毒剧成分以及处方的制备工艺等

建立较为全面的多成分

含量测定质量标准

可以保证药品的稳定性

可控性

安全性和有效性

多成分测定

可以对于同一类型多成分进行测定

如人参中多种皂苷类成分

黄连中多种生物碱类成分

也可以对不同类型的成分进行测定

如金银花中抗病毒

消炎退热有效成分木犀草苷

以及酚酸类成分

丹参活血化瘀主要有效成分

水溶性丹酚酸类成分

以及脂溶性丹参酮类成分

多成分定量方法

可以采用多个对照品对照定量

也可以采用一测多评法定量

由于对照品紧缺和检测费高昂

对多指标质量评价模式的限制

产生了中药多成分

含量的单对照品同时测定法

又称为一测多评法

一测多评法

是利用中药有效成分

之间的内在函数和比例关系

通过测定一个成分

而实现多个成分的同步测定

是适合中药特点

的多指标质量评价模式

如黄连以盐酸小檗碱为对照品

采用一测多评法测定4种生物碱含量

黄连是临床常用药物

中国药典主要收载味连

雅连和云连3个品种

生物碱是黄连清热燥湿

泻火解毒的主要有效成分

如小檗碱

表小檗碱

黄连碱 等等

其中 小檗碱

已知在很多植物中均存在

且含量较高

如黄柏 三颗针 等

表小檗碱是甄别黄连

与其他掺假品的特征性成分

因此

选择上述几种生物碱类成分

成分作为指标性成分评价黄连质量

对于保证黄连及其相关

成药的质量至关重要

但是实际工作中

缺乏其中一些对照品

如纯化难度极大的表小檗碱和黄连碱

直接限制了采用常规的外标法

或内标法进行多指标质量控制

一测多评法可以克服这一难题

即只测定其中一个成分——小檗碱

通过确定它与其余待测成分巴马汀

黄连碱

表小檗碱

药根碱间的内在函数关系

建立其一侧多评的多指标质量控制方法

在方法实施时

可仅有一个对照品

而其余对照品缺省的情况下

实现这些成分的同步含量测定

中国药典对于黄连的含量测定

以盐酸小檗碱对照品的峰面积为对照

分别计算小檗碱

表小檗碱

黄连碱和巴马汀的含量

并且用待测成分色谱峰

与盐酸小檗碱色谱峰的相对保留时间

确定4个待测成分色谱峰保留时间

最后 我们来回答

用什么方法来测定 这样的问题

中药含量测定方法很多

不同的分析方法

有不同的适用范围和分析对象

依据 准确 灵敏

简便 快速 原则

选择选择适宜的方法获得灵敏

可靠和准确的数据

方法选择主要依据的原则以下4个原则

可以根据测定对象组成选择

如果测定对象是单一物质

一般采用色谱法

因为中药成分复杂

干扰多

采用具有分离功能的各种色谱法

可以很好地使被测成分分离并进行测定

如果测定对象是混合物

如某一类成分总生物碱

总黄酮

总有机酸等

一般采用化学法或

紫外可见分光光度法

如总生物碱

总有机酸可采用酸碱滴定法

总黄酮

总蒽醌可以采用比色法

根据测定物质类型选择

如测定的是无机物

比如矿物药

有害元素等

可以采用离子色谱法

原子吸收分光光度法或等离子体质谱法

如测定的是大分子物质

比如多糖

可以采用凝胶色谱法

第三个原则可以根据

测定成分理化性质选择

如酸碱性

挥发性

极性等性质

如测定酸碱性物质

可以利用酸或者碱性官能团

在不同酸碱环境中离解后颜色不同

采用比色法或其他方法

如果测定挥发性成分

可以采用气相色谱法

如果测定具有共轭双键的物质

可以采用分光光度法

或者紫外检测器的液相色谱法

第四个原则可根据测定成分含量选择

如果待测定物质含量较高

属于常量分析

一般采用化学分析法

譬如矿物药分析

多采用化学分析法测定含量

如果待测物质含量较低

属于微量分析

一般需要采用仪器分析法

如果待测成分含量极低

一般分析方法难以解决问题

可以采用联用技术

如GC-MS

LC-MS

ICP-MS等方法

发挥两种仪器的长处

以提高测定分离度和灵敏度

从而达到分析目的和要求

最后

我们再来介绍含量限（幅）度规定

中药中待测成分的含量限度

一般规定下限

规定幅度

规定标示量范围

毒性成分的含量必须规定幅度

最后用思维导图对中药含量测定进行小结

希望大家课后及时复习

并通过课后练习巩固知识点

取得更好的学习效果

今天的课就上到这里

下次课见

谢谢大家