中药分析中样品处理方法在线视频

大家好

今天我们来学习中药分析中

样品处理方法

中药分析工作基本程序为

取样 供试品溶液的制备

供试品溶液的分析

包括鉴别、检查、含量测定

原始记录和书写检验报告等步骤

中药分析的首要环节是取样

为了确保分析数据 分析结果的

准确性和可追溯性

药品质量控制与监管中抽查

复查要求取样必须具有科学性

真实性和代表性

其基本原则为均匀 合理

通则0211收载了药材和饮片取样法

制剂的取样一般取3倍全检量

贵重药品2倍全检量

每个全检量至少3个最小包装

中药成分组成复杂

成分含量相对较低

在分析之前

大多需要对样品进行提取净化后

制成较纯净的供试品溶液

才可进行分析测定

供试品溶液制备原则是

最大限度地保留被测成分

除去干扰物质

样品处理的主要作用有

一 将被测成分有效地从样品中释放出来

并制成便于分析测定的稳定试样

二 除去杂质

纯化样品

提高分析方法的重现性和准确度

三 富集浓缩或衍生化

提高分析方法的选择性

四 使试样的形式及所有溶剂

符合分析测定的要求

供试品溶液的制备

包括

样品的粉碎 样品的提取

样品的净化与富集等步骤

我们本节重点学习中药分析

供试品溶液制备中样品的

提取 净化与富集

样品的提取方法有

溶剂提取法 水蒸气蒸馏法 升华法等

我们先从溶剂提取法介绍

溶剂提取法是选用适当的溶剂

将中药的被测成分溶出的方法

溶剂的选择遵循“相似相溶”原则

如皂苷类成分提取一般

选择正丁醇为溶剂

黄酮类选择乙酸乙酯

生物碱最适宜的溶剂为三氯甲烷

挥发油则适合用石油醚 乙醚进行提取

溶剂提取法包括

浸渍法 回流提取法 连续回流提取法等

浸渍法是将样品置于溶媒中

浸泡一段时间分离出浸渍液

分为冷浸法和温浸法

冷浸法是将溶剂加入样品粉末中

室温下浸泡一定时间

组分因扩散而从粉末中浸出的提取方法

该方法操作简单

提取出的杂质少

适用于固体中药的提取

遇热不稳定成分、挥发性成分的提取

含淀粉 果胶 黏液质较多的

中药提取的提取

但是提取较为费时

效率低

费溶剂

如果用水作为提取溶剂

提取液易发霉

需加入防腐剂

如中药材山楂的含量测定

供试品溶液制备方法中

采用冷浸法

室温下浸泡4个小时

来制备供试品溶液

以水作为提取溶剂

定量分析山楂中总有机酸的量

改变浸渍法的浸渍温度至40-60度

即为温浸法

该方法可以减少浸渍时间

却能浸出较多有效成分

但是由于浸泡温度较高

浸出液冷却后放置贮存时常析出沉淀

为了保证质量

需滤去沉淀后再浓缩

再来介绍回流提取法

回流提取法是将样品粉末

置于有机溶剂中

水浴上加热回流提取的方法

在加热条件下

组分溶解度增大

溶出速率加快

有利于提取

该方法提取速度快 省时

适用于固体中药的提取

但是不适用于受热不稳定成分的提取

但操作繁琐

提取杂质较多

如马钱子的含量测定供试品溶液

制备方法中采用回流提取法

马钱子中主要毒效成分为

士的宁 马钱子碱等

为亲脂性生物碱

可选择三氯甲烷作为提取溶剂

值得一提的是

供试品溶液的定容

与药物分析选择用量瓶定容不同

在中药分析中常常采用“外加法”定容

主要是因为考虑量瓶定容

固体中药会造成定容体积的误差

因此

采用外加法定容

即在具塞锥形瓶中加入精密称定的样品

通过精密加入一定体积的提取溶剂

通过提取前后2次称重

并补重的方式来保证提取溶剂的体积

减少因提取过程中溶剂损失

而造成的误差

连续回流提取法是

将样品置索氏提取器中

选用低沸点有机溶剂中反复提取的方法

方法操作简便 提取率高

节省溶剂 提取杂质少

回收方便 无需过滤

不适于受热不稳定成分的提取

因为进行了加热

提取速度慢 费时

一般数小时可提取完全

如补骨脂的含量测定中

供试品溶液的制备

采用连续回流提取法

补骨脂的主要活性成分为香豆素

黄酮及单萜酚等类化合物

其中香豆素类活性成分主要为

补骨脂素和异补骨脂素

为亲脂性化合物

易溶于苯 乙醚 三氯甲烷

甲醇和乙醇等有机溶剂中

中国药典以甲醇为溶剂

索氏提取器连续回流提取2个小时

来提取补骨脂中香豆素类成分

超声辅助提取法是将样品置适当容器中

加入提取溶剂

放入超声振荡器中提取

利用超声波加强分子振动

促进组分溶解

是一种非常简便而有效的

目前较常用的一种提取方法

该方法操作简便

提取效率高 提取速度快

省时 省溶剂

适用于固体中药的提取

受热不稳定成分的提取

但有时会发生降解 解聚 转化

或催化氧化还原反应

所以在应用超声辅助提取时

应对超声波频率 提取时间

提取溶剂等进行考察

以提高提取效率

如穿心莲内酯滴丸测定

穿心莲内酯含量测定时

供试品溶液制备采用超声辅助提取法

穿心莲为清热凉血解毒中药

临床上多用于呼吸道感染 急性菌痢

肠胃炎感冒发热等的治疗

被誉为“天然抗生素”

中国药典 美国药 、欧洲药典

和印度药典均收载穿心莲药材

穿心莲内酯是穿心莲药材主要有效成分

为二萜内酯类化合物

极性较大

可选择甲 、乙醇等溶剂作为提取溶剂

注意在含量测定方法中

需注明超声振荡器的功率和频率

微波辅助萃取法又称微波萃取

是微波和传统提取法相结合

形成的一种新的提取方法

是将样品置于不吸收微波的容器中

用微波加热进行除去的方法

利用微波能强化溶剂萃取效率

即利用微波加热来加速溶剂对

固体样品中目标萃取物

该方法提取速度快

提取效率高

节省溶剂

适用于固体中药的提取

但是不适用于受热不稳定成分的提取

加速溶剂萃取法

又称压力溶剂萃取法

是在较高温度和压力条件下

用溶剂萃取固体

或半固体样品的前处理方法

该方法有机溶剂用量少

提取速度快

提取效率高

回收率高

广泛用于环境 药物

食品等样品的前处理

我们需要知道 在实际工作中

实际使用时可联合使用

如回流提取法和超声辅助提取法

连续回流提取法和超声辅助提取法相结合

如红参的含量测定供试品溶液制备中

联合使用了连续回流提取法

和超声辅助提取法

三氯甲烷连续回流提取3小时

脱脂

脱脂后的药渣再用水饱和的

正丁醇超声处理30分钟

以提取红参中皂苷类成分

以上我们主要介绍了

6种常用的溶剂提取法

接下来我们再介绍水蒸气蒸馏法

水蒸气蒸馏法是将含有

挥发性成分的样品与水共蒸馏

使挥发性成分随水蒸气一并馏出

冷凝后分取挥发性成分的提取方法

适用于具挥发性

可随水蒸气蒸馏而不被破坏

在水中稳定且难溶

或不溶于水的中药的提取

如中药制剂十六味冬青丸中

丁香的含量测定

选择指标性成分丁香酚进行分析

丁香酚具有挥发性

可采用水蒸气蒸馏法进行提取

我们再介绍一下升华法

升华法是利用某些成分

具有升华性质的特点

使其与其他成分分离的方法

该方法不适用于定量分析

如大黄药材主要含有

游离羟基蒽醌类化合物

中国药典中第2法鉴别

采用微量升华法

可观察到菱状针晶或羽状结晶等

游离羟基蒽醌的结晶

超临界流体萃取法是以超临界流体

为溶剂的样品提取技术

能快速 有效地提取固体

或半固体中的被测成分

该方法提取率高

提取速度快

省时

选择性好

避免使用危险或有害溶剂

可联机使用

易于测定自动化

适用于亲脂性较强的成分的提取

以及对热不稳定或易氧化成分的提取

但是使用成本高

对设备要求高

多用于工业化生产

另外

还有加压液体萃取

亚临界水萃取

半仿生提取 酶提取

高压逆流提取等提取方法

我们这里就不再一一介绍了

样品的净化与富集方法有

液-液萃取法 色谱法 沉淀法等

液-液萃取法是利用混合物中各组分在

两种互不相溶的溶剂中分配系数的

不同而达到分离净化目的的方法

该方法操作简便、快速

适用于液体制剂的提取

中药的净化与富集

萃取法的效率高于一次

用全量溶剂浸出的效率

萃取次数应经实验确定

一般鉴别萃取1-2次

含量测定萃取4次以上

如小儿清热止咳合剂中麻黄的含量测定

供试品溶液制备采用液-液萃取法

用乙醚萃取5次

麻黄药材主要有效成分为麻黄碱

为小分子固体生物碱

游离状态下极性较小

易溶于三氯甲烷 乙醚 乙醇等有机溶剂

与酸结合成盐后水溶性增加

易溶于水

本方法中加水和浓氨试液

可使结合态生物碱游离

游离后生物碱易溶于乙醚中

采用乙醚振摇提取

分次振摇提取5次

提高提取效率

以保证提取完全

色谱法是中药分析中

常用的样品净化方法

包括柱色谱法

薄层色谱法和纸色谱法

其中以柱色谱法常用

如启脾丸中人参和甘草的薄层色谱鉴别

人参和甘草主要含有三萜苷类化合物

三萜苷一般易溶于

热水 热甲醇 热乙醇中

不溶或难溶于乙醚 苯等

极性小的有机溶剂中

三萜苷在含水丁醇中溶解度较好

且又能与水分层

可利用该性质从水溶液中

用正丁醇提取三萜苷

同时可以除掉亲水性的糖 蛋白质等

本方法采用三氯甲烷超声提取30min

脱脂后

热甲醇回流提取三萜苷

挥干提取溶剂进行浓集

中性氧化铝柱净化

甲醇提取三萜苷

最后用水饱和的正丁醇进行萃取

除掉亲水性杂质

水饱和正丁醇振摇提取过程中

鉴别方法2次振摇提取

以提高提取效率

另外

启脾丸为中药丸剂

以蜂蜜为附加剂

样品较为黏稠

以硅藻土作为分散剂

使丸剂分散均匀

以利于提取溶剂的渗透

保证提取完全

样品的净化与富集

还可以采用沉淀法

盐析法 微萃取技术等方法

我们这里就不再一一赘述

最后

用思维导图对本节内容进行小结

希望大家课后及时复习

今天的课就上到这里

下次课见

谢谢大家！