当前课程知识点：药物分析 > 第五章 药物的含量测定 > 5.13 药品分析方法的验证（一） > 药品分析方法的验证（一）
大家好
我是中山大学的谢智勇老师
我们知道建立药品分析方法的
目的是为了检验药品质量是否合格
那如果方法本身存在问题呢
可能就会出现两种情况
其一
本来产品是合格的
而通过检测后被认为不合格
那就会造成极大的浪费
其二
本来产品是不合格的
而通过检测后被认为合格
则会给人民的生命健康带来危害
所以
分析方法是需要验证的
中国药典就在通则里专门收载了
《分析方法验证指导原则》
来指导如何开展药品分析方法的验证
今天我们就一起来学习该部分内容
首先
我们为什么要进行分析方法验证呢
答案是通过分析方法的验证
从而证明所建立的方法
适合于相应的检测要求
其次
是在什么时候需要对方法进行验证呢
一般来说是在建立药品质量标准
药品生产工艺或制剂组分发生变更
或者原分析方法进行修订时
都需要对分析方法进行验证
同时要求
分析方法验证的理由
过程及其结果均应在药品质量标准
起草说明或修订说明中进行记载
又有哪些分析项目的方法需要进行验证呢
主要包括我们所熟知的鉴别试验
杂质的限度或定量分析
药品的含量或效价测定
以及药物溶出度或释放度等
特性参数的测定
那到底包括哪些验证指标验证方法可行呢
验证指标主要包括专属性、准确度
精密度、检测限、定量限、线性
范围和耐用性共八个指标
其中专属性是指在有杂质
降解产物、辅料等其他成分
可能存在的情况下
所采用的方法能否正确
测定出被测药物的特性
因为只有方法的专属性强
才能保证方法的准确度高
因此 专属性是方法验证的第一指标
其二准确度是指用所建立的方法
而测定的结果与真实值
或参比值之间接近的程度
一般用回收率来表示
验证准确度时应该在规定的
范围内进行验证
而精密度是指在规定的测定条件下
同一份均匀供试品
经多次取样测定后
所得的结果之间的彼此接近程度
一般可用偏差、标准偏差
或者相对标准偏差来表示
检测限是指试样中被测物
能被检测出的最低量
此指标只作为定性鉴别实验
和杂质限度检查的依据
它没有定量意义
而定量限是指试样中
被测物能被定量测定的最低量
它的测定结果就应符合
一定的准确度和精密度的要求
具有定量意义
常用于测定检测限
和定量限的方法有三种
分别为直观法、信噪比法
基于响应值的标准偏差
和标准曲线斜率法
其中直观法是用已知浓度的被测物
试验出能被可靠地检测出
或定量分析的最低浓度或量
而信噪比法是用已知低浓度的
试样测出的信号与空白样品
测出的信号进行比较
算出能被可靠地检测出
或定量分析的最低浓度或量
一般来说以信噪比为3∶1
时相应的浓度
或量确定为检测限
而以信噪比为10∶1时
相应的浓度或量就为定量限
线性是指在设计的范围内
线性试验结果与试样中被测物的
浓度直接呈比例关系的一种能力
要求是应在设计的范围内
来测定线性关系
通常以测得的响应信号
跟被测物的浓度进行作图
观察是否呈现出良好的线性
然后再用最小二乘法进行线性回归
当然若有必要时
还可以对响应信号先进行数学转换后
再进行线性回归
有些非常特殊的情况下
还可以采用描述浓度
与响应关系的非线性模型来呈现
相关系数越接近于1
说明本方法的线性关系越好
而范围是指在分析方法
能达到一定的精密度、准确度
和线性要求时的高低限浓度或量的区间
通常根据检测项目的不同
范围的要求不同的
如是进行原料药和制剂的含量测定
则要求范围应为
测定浓度的80%～120%
如是进行制剂含量均匀度的检查时
则要求范围应为
测定浓度的70%～130%
又如是进行药物溶出度
或释放度中的溶出量的测定时
则要求范围应为限度的±20%
最后再看一下耐用性
耐用性是指当测定条件
若有微小变动时
测定的结果不受由于微小变动
而带来影响的承受程度
这为所建立的方法适用于
日常检验而提供了依据
通常要求在开始研究分析方法时
就应当要考虑方法的耐用性
如果方法的测定条件确实是非常苛刻的
则就应当在方法中明确写明
并注明本方法可以接受
测定条件变动的范围
典型的变动因素主要包括
被测溶液的稳定性
样品的提取次数与时间等等
如是高效液相色谱法
则其典型的变动因素有
流动相的组成和pH值
不同品牌或不同批号的
同类型色谱柱
柱温、流速等
上面我们已一一介绍了
八个验证指标的含义
下面再总结一下
针对测定不同检验项目方法的
验证时分别需要验证哪些指标呢
一般来说
针对鉴别试验需要
验证方法的专属性和耐用性
针对杂质的限度测定的方法
需要验证专属性、耐用性
和检测限三个指标
而针对杂质的定量测定的
方法则除检测限外
其他七个指标均需要验证
若是针对药物含量测定的方法
则除检测限和定量限外
其他六个指标均需要验证
最后用思维导图
对药品分析方法验证进行小结
以便于大家复习
今天我们就学习到这里
下次课我将以具体案例来跟大家演示
如何开展药品分析方法的验证
下次课见
-1.1 药物分析的性质与任务
-第一章单元测试
-2.1 中国药典（一）
--中国药典（一）
-2.2 中国药典（二）
--中国药典（二）
-2.3 中国药典（三）
--中国药典（三）
-2.4 国际药品标准
--国际药品标准
-2.5 药品检验与监督
--药品检验与监督
-2.6 药品检验工作的基本程序
-2.7 药品管理规范
--药品管理规范
-第二章单元测试
-3.1 物理常数测定法-熔点
-3.2 物理常数测定法-吸收系数
-3.3 物理常数测定法-比旋度
-3.4 化学鉴别法
--化学鉴别法
-3.5 光谱鉴别法
--光谱鉴别法
-3.6 色谱鉴别法
--色谱鉴别法
-第三章单元测试
-4.1 药物中杂质的来源及分类
-4.2 杂质的限量要求与计算
-4.3 一般杂质的检查（一）
-4.4 一般杂质的检查（二）
-4.5 一般杂质的检查（三）
-4.6 一般杂质的检查（四）
-4.7 特殊杂质的检查（一）
-4.8 特殊杂质的检查（二）
-第四章单元测试
-5.1 容量分析法-酸碱滴定法
--容量分析法-概述
-5.2 容量分析法-酸碱滴定法
-5.3 容量分析法-氧化还原滴定法
-5.4 容量分析法-非水溶液滴定法
-5.5 紫外-可见分光光度法——概述
-5.6 紫外-可见分光光度法——比色法
-5.7 紫外-可见分光光度法——计算分光光度法
-5.8 高效液相色谱法（一）
-5.9 高效液相色谱法（二）
-5.10 气相色谱法
-5.11 样品的前处理方法（一）
-5.12 样品的前处理方法（二）
-5.13 药品分析方法的验证（一）
-5.14 药品分析方法的验证（二）
-第五章单元测试
-6.1 苯巴比妥及其制剂的分析
-6.2 司可巴比妥钠及其制剂的分析
-6.3 阿司匹林及其制剂的分析
-6.4 盐酸普鲁卡因及其制剂的分析
-6.5 磺胺甲噁唑及其制剂的分析
-6.6 左氧氟沙星及其制剂的分析
-6.7 异烟肼及其制剂的分析
-6.8 硝苯地平及其制剂的分析
-6.9 盐酸氯丙嗪及其制剂的分析
-6.10 盐酸麻黄碱及其制剂的分析
-6.11 硫酸阿托品及其制剂的分析
-6.12 硫酸奎宁及其制剂的分析
-6.13 地塞米松磷酸钠及其制剂的分析
-6.14 黄体酮及其制剂的分析
-6.15 维生素 B1 及其制剂的分析
-6.16 维生素 C 及其制剂的分析
-6.17 青蒿素及其制剂的分析
-6.18 青霉素钠及其制剂的分析
-6.19 头孢丙烯及其制剂的分析
-6.20 硫酸链霉素及其制剂的分析
-6.21 硫酸庆大霉素及其制剂的分析
-6.22 盐酸四环素及其制剂的分析
-第六章单元测试
-7.1 代表性辅料分析（一）
-7.2 代表性辅料分析（二）
-第七章单元测试
-8.1 制剂分析及其特点
--制剂分析及其特点
-8.2 片剂分析
--片剂分析
-8.3 注射剂分析
--注射剂分析
-8.4 复方制剂分析
--复方制剂分析
-第八章单元测试
-9.1 中药分析及其特点
--中药分析及其特点
-9.2 中药分析中样品处理方法
-9.3 中药的鉴别（一）
--中药的鉴别（一）
-9.4 中药的鉴别（二）
--中药的鉴别（二）
-9.5 中药指纹图谱与特征图谱
-9.6 中药的检查（一）
--中药的检查（一）
-9.7 中药的检查（二）
--中药的检查（二）
-9.8 中药的含量测定（一）
-9.9 中药的含量测定（二）
-第九章单元测试
-10.1 生物药物分析的特点
-10.2 生化药物分析
--生化药物分析
-10.3 生物制品分析
--生物制品分析
-第十章单元测试
-11.1 体内药物分析概述
--体内药物分析概述
-11.2 常用体内生物样品的制备与贮存
-11.3 体内生物样品分析的前处理（一）
-11.4 体内生物样品分析的前处理（二）
-11.5 体内分析方法的建立
-11.6 体内药物分析方法的建立与验证（一）
-11.7 体内药物分析方法的建立与验证（二）
-11.8 体内药物分析方法的建立与验证（三）
-第十一章单元测试