当前课程知识点:基础生物化学实验 > 第二章 生命科学三大必备仪器的使用 > 第二节 移液器的操作要点 > 移液器的操作要点
我们在前面的课程中已经了解了
移液器的操作原理和基本流程
但是实际移液的过程中
还有一些细节是我们需要特别注意的
否则还是无法完全保证移液体积的准确
那么在移液器实际使用中都有
哪些操作要点和注意事项
首先是移液器量程的选择
同学们实验室常用的移液器有很多型号
比如说1000~5000ul
200~1000ul档
20~200ul到1~20ul档
那么当你要做一次液体转移的时候
你会拿哪一把呢
比如你要转移200ul的液体
是要用200~1000ul的移液器
还是用20~200ul的移液器更好
实验显示
移液器最大量程的30%~100%
是最佳的使用范围
比如说如果你要转移100ul的液体
你要用20~200ul的移液器
它的转移误差是1%
如果用10~1000ul的移液器
那么转移误差就会增加到3%
其次吸取液体的时候一定要注意垂直吸液
因为根据流体静力压原理
移液器斜着吸液将会使体积偏大
转移精度降低
而当你要放出液体的时候
可以根据实际的需要选择将移液器以
20~45度的角度贴壁打出液体
或者是垂直悬空打出液体
悬空打出液体的好处是可以避免污染
可再次使用相同的吸头转移相同的液体
但是请注意
打出的时候一定要彻底
不要有残留
此外
实验结果表明
第1次和第2次转移液体
会造成转移量较少
所以如果需要高精度的转移
最好将液体吸入打出反复两次
预先润湿吸头的内部
再按要求转移液体
不仅如此
吸取液体后最好让吸头的
尖部在液体里稍稍停留一秒
特别是对于大量程的移液器来说
确保能够吸取上来足够量的液体
而且要保证吸入放出液体的过程
匀速操作
避免造成转移体积的不准
最后还要提醒一下
根据移液器的设计原理
旋转刻度调节体积的时候
从大量程调节到小量程
直接旋转即可得到最佳的精度
而需要从小量程调到大量程的时候
最好先调至略大一点
再返回大约1/3圈
举个例子来说
比如我用20~200ul的移液器
如果我要取液100ul
从200ul往100ul调
直接旋转旋钮到100ul即可
而如果我要从10ul
往100ul调则应该
先调到120ul左右
然后再从大到小旋转固定在100ul
这也很好理解
因为弹簧从压缩状态的回弹需要一个过程
而从高到低的压缩过程
则可以直接准确的到达
还有
为了保护弹簧
移液器使用后应调至最大量程
让内部的弹簧处于放松的状态
再放回支架
避免弹簧长期处于压缩状态
引起弹性形变
造成移液的误差
最后我们来总结一下
保证移液精度的几点注意事项
第一要选择合适量程的移液器
第二要保证垂直吸液体
第三
可以预润湿吸头
提高转移精度
第四
吸取液体后吸头在液体里停留一秒
保证移液体积
第五
吸入放出液体的过程
匀速操作
第六
要保证移液的准确
调节体积的时候要从大量程调至小量程
第七
使用后要调到最大量程
并放回液器支架
总的来说
我们使用移液器的基本原则
就是保证移液准确无污染
所有的一切操作都是为了这个目的服务
在实际操作的过程中
要注意多思考
让每次转移都能做到准确 无污染
并将这些操作养成个人习惯
在今后的研究中才能真正
高效的完成实验工作
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