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移液器的操作要点在线视频

下一节:移液器的操作要点

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移液器的操作要点课程教案、知识点、字幕

我们在前面的课程中已经了解了

移液器的操作原理和基本流程

但是实际移液的过程中

还有一些细节是我们需要特别注意的

否则还是无法完全保证移液体积的准确

那么在移液器实际使用中都有

哪些操作要点和注意事项

首先是移液器量程的选择

同学们实验室常用的移液器有很多型号

比如说1000~5000ul

200~1000ul档

20~200ul到1~20ul档

那么当你要做一次液体转移的时候

你会拿哪一把呢

比如你要转移200ul的液体

是要用200~1000ul的移液器

还是用20~200ul的移液器更好

实验显示

移液器最大量程的30%~100%

是最佳的使用范围

比如说如果你要转移100ul的液体

你要用20~200ul的移液器

它的转移误差是1%

如果用10~1000ul的移液器

那么转移误差就会增加到3%

其次吸取液体的时候一定要注意垂直吸液

因为根据流体静力压原理

移液器斜着吸液将会使体积偏大

转移精度降低

而当你要放出液体的时候

可以根据实际的需要选择将移液器以

20~45度的角度贴壁打出液体

或者是垂直悬空打出液体

悬空打出液体的好处是可以避免污染

可再次使用相同的吸头转移相同的液体

但是请注意

打出的时候一定要彻底

不要有残留

此外

实验结果表明

第1次和第2次转移液体

会造成转移量较少

所以如果需要高精度的转移

最好将液体吸入打出反复两次

预先润湿吸头的内部

再按要求转移液体

不仅如此

吸取液体后最好让吸头的

尖部在液体里稍稍停留一秒

特别是对于大量程的移液器来说

确保能够吸取上来足够量的液体

而且要保证吸入放出液体的过程

匀速操作

避免造成转移体积的不准

最后还要提醒一下

根据移液器的设计原理

旋转刻度调节体积的时候

从大量程调节到小量程

直接旋转即可得到最佳的精度

而需要从小量程调到大量程的时候

最好先调至略大一点

再返回大约1/3圈

举个例子来说

比如我用20~200ul的移液器

如果我要取液100ul

从200ul往100ul调

直接旋转旋钮到100ul即可

而如果我要从10ul

往100ul调则应该

先调到120ul左右

然后再从大到小旋转固定在100ul

这也很好理解

因为弹簧从压缩状态的回弹需要一个过程

而从高到低的压缩过程

则可以直接准确的到达

还有

为了保护弹簧

移液器使用后应调至最大量程

让内部的弹簧处于放松的状态

再放回支架

避免弹簧长期处于压缩状态

引起弹性形变

造成移液的误差

最后我们来总结一下

保证移液精度的几点注意事项

第一要选择合适量程的移液器

第二要保证垂直吸液体

第三

可以预润湿吸头

提高转移精度

第四

吸取液体后吸头在液体里停留一秒

保证移液体积

第五

吸入放出液体的过程

匀速操作

第六

要保证移液的准确

调节体积的时候要从大量程调至小量程

第七

使用后要调到最大量程

并放回液器支架

总的来说

我们使用移液器的基本原则

就是保证移液准确无污染

所有的一切操作都是为了这个目的服务

在实际操作的过程中

要注意多思考

让每次转移都能做到准确 无污染

并将这些操作养成个人习惯

在今后的研究中才能真正

高效的完成实验工作

基础生物化学实验课程列表:

第一章 课前须知

-第一节 基础生物化学实验学什么?

--《生物化学实验》学什么?

--《生物化学实验》学什么?

-第二节 本课程评分标准

--本课程评分标准

-第三节 如何更好的完成本课程的学习?

--不同需求的同学如何学习本课程?

--不同需求的同学如何学习本课程?

-第四节 生化实验室安全注意事项

--生化实验室安全注意事项

--生物化学实验室安全注意事项

-第五节 本课程教学团队介绍

--本课程团队介绍

--本课程教学团队介绍

-第六节 课前须知作业

--我对本课程的了解和疑惑

-第一章 课前须知 作业

第二章 生命科学三大必备仪器的使用

-第一节 移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

-第二节 移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--正向移液和反向移液

--正向移液和反向移液

--移液器的日常校准

--移液器的日常校准

--移液器的操作中易错点

--移液器操作中的易错点

--Eppendorf移液器操作手册

-第二章 移液器的使用 作业

--第二章 移液器的使用 作业

--请用思维导图或表格的形式列举移液器的使用要点

-第三节 分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

-第四节 分光光度计的操作要点

--不同分光光度计的设计和操作差异

--不同分光光度计的设计和操作差异

--分光光度计的操作要点

--分光光度计的操作要点

-第五节 分光光度法测定待测物浓度

--分光光度法的原理

--分光光度法的原理

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

-第六节 荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的设计原理和使用规范

-第二章 分光光度计的使用 作业

--第二章 分光光度计的使用 作业

-第七节 离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的操作要点

--离心机的操作要点

-第二章 离心机的使用 作业

--第二章 离心机的使用 作业

-如何养成规范使用仪器设备的好习惯

第三章 物质的定量测定

-第一节 蛋白质的定量测定

--学习蛋白质定量测定的意义

--学习蛋白质定量测定的意义

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质的浓度的实验指导

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--双缩脲法测定蛋白质的浓度的实验原理

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验指导

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验指导

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质浓度的实验指导

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质浓度的实验指导

-第三节 其他物质的测定

--核黄素荧光光度定量测定法

--核黄素(VB2)荧光光度定量测定法

-第三章 物质的定量测定 作业

--第三章 物质的定量测定 作业

-你现在能独立设计一个生物分子的定量测定实验吗?

第四章 酶活力的测定

-第一节 酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

-第二节 菠萝蛋白酶活力的测定

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作

--菠萝蛋白酶比活力的测定(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶比活力的测定(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶比活力测定的实验指导(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶活力的计算(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶活力的计算(Folin酚法)

-第三节 酶米氏常数的测定

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数测定的实验指导

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的实验指导(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算(Folin酚法)

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算(Folin酚法)

-第四章 酶活力的测定 作业

--第四章 酶活力的测定 作业

-查阅一个你感兴趣的酶,想想怎么测?

第五章 物质的分离纯化

-第一节 蛋白质分离纯化的常见技术

--基因工程生产人血清白蛋白之路

--基因工程生产人血清白蛋白之路

--蛋白质分离的一般原则和基本步骤

--蛋白质分离的一般原则和基本步骤

--蛋白质的盐析提纯

--蛋白质的盐析提纯

--盐析操作注意事项

--盐析操作注意事项

--蛋白质的有机溶剂和等电点沉淀

--蛋白质的有机溶剂和等电点沉淀

--离子交换层析

--离子交换层析

--亲和层析

--亲和层析

--蛋白质的超速离心、透析和超滤

--蛋白质的超速离心、透析和超滤

--凝胶过滤层析的原理及凝胶颗粒选择

--凝胶过滤层析的原理及凝胶颗粒选择

--凝胶过滤层析的操作过程和注意事项

--凝胶过滤层析的操作过程和注意事项

--IMAC亲和层析

--IMAC亲和层析

--IMAC亲和层析技术的基本步骤

--IMAC亲和层析技术的基本步骤

--第五章 第一节 蛋白质的分离纯化 作业

-第二节 核酸的提取和检测

--核酸的制备原理及基本步骤

--核酸的制备原理及基本步骤

--质粒DNA的提取制备

--质粒DNA的提取制备

--拟南芥叶片基因组DNA提取

--拟南芥叶片基因组DNA提取

--紫外分光光度法测定核酸

--紫外分光光度法测定核酸

--第五章 第二节 核酸的提取 作业

-你想得到什么分子,如何纯化呢?

第六章 利用电泳对生物大分子进行检测

-第一节 核酸琼脂糖凝胶电泳

--核酸琼脂糖凝胶电泳的原理

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--核酸琼脂糖凝胶电泳的染色及结果分析

--核酸琼脂糖凝胶电泳的染色及结果分析

--核酸琼脂糖电泳-作业

-第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳

--SDS-PAGE电泳的原理

--SDS-PAGE电泳的原理

--SDS-PAGE电泳凝胶的染色

--SDS-PAGE电泳凝胶的染色

--利用SDS-PAGE计算蛋白质的分子质量

--利用SDS-PAGE计算蛋白质的分子质量

--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--SDS-PAGE的原理和操作-作业

-除了电泳,还有什么用于生物大分子鉴定的方法?

第七章 期末考试

-《基础生物化学实验》期末考试

-请留下你对本课程的宝贵建议

移液器的操作要点笔记与讨论

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