当前课程知识点:基础生物化学实验 > 第五章 物质的分离纯化 > 第一节 蛋白质分离纯化的常见技术 > 基因工程生产人血清白蛋白之路
同学们,大家好!欢迎大家学习生物化学实验课程。我是杨海莲,来自中国农业大学生物学院。在进行物质分离内容的讲解之前,让我以蛋白质为例,说明物质分离的重要性吧。
血清白蛋白(humanserumalbumin)是人血浆中最丰富的一种蛋白质,在正常人血浆中的含量超过血浆蛋白质总量的50%,主要负责维持血管内外压力平衡和血浆容量,并能结合和运输一些代谢产物。在临床上人血清白蛋白可用于治疗休克与烧伤,用于补充因手术、意外事故或大出血所导致的血液丢失,也可以作为血浆增容剂。人血清白蛋白临床用量非常大,仅我国每年需求量就达420t。
直至目前为止,人血清白蛋白都是从血浆中提取。大家都知道,血浆是稀缺资源,从血浆中提取白蛋白还会有传播疾病的风险。科学家们希望通过基因工程的方法大规模生产人血清白蛋白,避免来自血液捐献者的病毒传播风险。
1999 年,日本科学家培育出了高效合成重组人血清白蛋白的基因工程毕氏酵母,2008 年在日本正式上市,成为第一个重组人血清白蛋白药物。然而,由于免疫毒性问题等原因,2010 年该产品又被日本药监局撤回而退市。中国科学家经过不懈努力培育出高效生产重组人血清白蛋白的转基因水稻,其中人血清白蛋白含量达到米粒总可溶性蛋白的10.58%,随后科研人员攻克了重组蛋白纯化难关,将重组蛋白纯度提高到99%以上,彻底解决了注射用重组蛋白杂质过敏问题。2017 年,植物源重组人血清白蛋白注射液获得临床批件,成为世界上第一个进入临床试验的植物源重组人血清白蛋白产品。可见获得高纯度的蛋白质非常重要。现在就让我们共同进入蛋白质分离纯化技术的学习吧。
-第一节 基础生物化学实验学什么?
-第二节 本课程评分标准
--本课程评分标准
-第三节 如何更好的完成本课程的学习?
-第四节 生化实验室安全注意事项
-第五节 本课程教学团队介绍
--本课程团队介绍
-第六节 课前须知作业
-第一章 课前须知 作业
-第一节 移液器的设计原理和使用规范
-第二节 移液器的操作要点
--移液器的操作要点
--移液器的操作要点
--移液器的日常校准
--移液器的日常校准
-第二章 移液器的使用 作业
--第二章 移液器的使用 作业
-第三节 分光光度计的设计原理和使用规范
-第四节 分光光度计的操作要点
-第五节 分光光度法测定待测物浓度
--分光光度法的原理
--分光光度法的原理
-第六节 荧光分光光度计的原理和使用规范
-第二章 分光光度计的使用 作业
--第二章 分光光度计的使用 作业
-第七节 离心机的设计原理和使用规范
--离心机的操作要点
--离心机的操作要点
-第二章 离心机的使用 作业
--第二章 离心机的使用 作业
-第一节 蛋白质的定量测定
-第三节 其他物质的测定
-第三章 物质的定量测定 作业
--第三章 物质的定量测定 作业
-第一节 酶活力测定的常用方法
-第二节 菠萝蛋白酶活力的测定
-第三节 酶米氏常数的测定
-第四章 酶活力的测定 作业
--第四章 酶活力的测定 作业
-第一节 蛋白质分离纯化的常见技术
--蛋白质的盐析提纯
--蛋白质的盐析提纯
--盐析操作注意事项
--盐析操作注意事项
--离子交换层析
--离子交换层析
--亲和层析
--亲和层析
--IMAC亲和层析
--IMAC亲和层析
--第五章 第一节 蛋白质的分离纯化 作业
-第二节 核酸的提取和检测
--第五章 第二节 核酸的提取 作业
-第一节 核酸琼脂糖凝胶电泳
--核酸琼脂糖电泳-作业
-第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
--SDS-PAGE的原理和操作-作业
-《基础生物化学实验》期末考试