当前课程知识点:基础生物化学实验 > 第四章 酶活力的测定 > 第二节 菠萝蛋白酶活力的测定 > 菠萝蛋白酶比活力的测定(Folin酚法)
我们在前一节中已经以菠萝蛋白酶为例
学习了酶活力测定的实验设计
思路和操作注意事项
实际工作中
我们经常需要比较一种酶的不同样品
或者是不同制剂之间活力的高低
这时候计算和比较酶的比活力就更加方便
根据国际酶学委员会的规定
比活力的单位是每毫克蛋白质
所含的酶活力单位数
单位是U每毫克
比活力代表了酶的纯度
对于同一种酶来说
比活力越大
代表酶的纯度就越高
有时候为了方便比较比活力
也用每克酶制剂含有多少活力单位
或者是每毫升酶制剂含有
多少活力单位来表示
比活力是酶学研究和生产中常用的数据
在酶蛋白的分离纯化中
用于表征纯化效率的纯化倍数
就需要使用比活力来进行计算
纯化倍数等于每步纯化的
比活力除以第一次的比活力
比获利的计算需要我们知道
体系中蛋白质的量
所以本实验采用Bradford法
对体系中含有多少蛋白质进行了测定
然后将之前测定的酶活力
含量与蛋白质含量一起
计算
菠萝蛋白酶的溶液的比活力U/mg
关于计算的过程
同学们可以自己先算一下
然后我们在下一节中一起进行讨论
-第一节 基础生物化学实验学什么?
-第二节 本课程评分标准
--本课程评分标准
-第三节 如何更好的完成本课程的学习?
-第四节 生化实验室安全注意事项
-第五节 本课程教学团队介绍
--本课程团队介绍
-第六节 课前须知作业
-第一章 课前须知 作业
-第一节 移液器的设计原理和使用规范
-第二节 移液器的操作要点
--移液器的操作要点
--移液器的操作要点
--移液器的日常校准
--移液器的日常校准
-第二章 移液器的使用 作业
--第二章 移液器的使用 作业
-第三节 分光光度计的设计原理和使用规范
-第四节 分光光度计的操作要点
-第五节 分光光度法测定待测物浓度
--分光光度法的原理
--分光光度法的原理
-第六节 荧光分光光度计的原理和使用规范
-第二章 分光光度计的使用 作业
--第二章 分光光度计的使用 作业
-第七节 离心机的设计原理和使用规范
--离心机的操作要点
--离心机的操作要点
-第二章 离心机的使用 作业
--第二章 离心机的使用 作业
-第一节 蛋白质的定量测定
-第三节 其他物质的测定
-第三章 物质的定量测定 作业
--第三章 物质的定量测定 作业
-第一节 酶活力测定的常用方法
-第二节 菠萝蛋白酶活力的测定
-第三节 酶米氏常数的测定
-第四章 酶活力的测定 作业
--第四章 酶活力的测定 作业
-第一节 蛋白质分离纯化的常见技术
--蛋白质的盐析提纯
--蛋白质的盐析提纯
--盐析操作注意事项
--盐析操作注意事项
--离子交换层析
--离子交换层析
--亲和层析
--亲和层析
--IMAC亲和层析
--IMAC亲和层析
--第五章 第一节 蛋白质的分离纯化 作业
-第二节 核酸的提取和检测
--第五章 第二节 核酸的提取 作业
-第一节 核酸琼脂糖凝胶电泳
--核酸琼脂糖电泳-作业
-第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
--SDS-PAGE的原理和操作-作业
-《基础生物化学实验》期末考试