当前课程知识点:基础生物化学实验 > 第二章 生命科学三大必备仪器的使用 > 第四节 分光光度计的操作要点 > 不同分光光度计的设计和操作差异
我们在前面的课程中已经学过了
分光光度计的基本原理和操作流程
在实际工作中
根据分光光度计仪器部件组成的设计
又可以分成很多种类
我们学生实验中比较常用的为单光路
分光光度计
其构造就是我们前面讲过的光源
单色器
吸收池 光电检测器和显示器等
此外实验室常用的还有双光路
分光光度计
在双光路分光光度计中
单色光会同时通过样品和参比溶液
经过系统计算
直接扣除掉参比的影响
可以实时精确的测定样品吸光度值
而不用像单光路分光光度计那样
手动扣除参比的影响
对于仪器调零的操作
不同公司生产的仪器在设计上也有所不同
我们前面演示的722N分光光度计
在样品池盖打开的时候
会有挡板放下挡住光路
而此时应该没有光被检测器检测到
所以要调节透光率为T等于0%
在另一些公司生产的分光光度计中
则采用挡光块放在光路上挡住光线的方法
来调节T等于0%
对于紫外分光光度计来说
内部一般会安装氘灯作为紫外光源
同时还会安装钨灯作为可见光光源
所以就涉及到了光源切换的问题
有些公司的仪器会单独外置氘灯的开关
使用时需要先开总电源
打开钨灯
如果需要测定紫外光的时候
再打开紫外光的光源开关
而有一些公司的设计则是没有
另外设置氘灯的开关
通过调节波长的过程中调到紫外区
由仪器自动切换光源
对于波长的调节
有的仪器会采用旋钮调节的方式
这种设计要求视线与波长
指针和刻度保持一条线
才能保证波长调节的准确性
而对于一些直接用键盘输入
波长数据的分光光度计来说
则很简便
按照说明书的要求输入即可
大多数分光光度计的设计
光路都是左右方向的
但是也有一些紧凑型的分光光度计
光路为前后方向
因此在使用仪器测定前
务必观察好光路的方向
将比色杯的光面置于光路上
对于大多数教学用的分光光度计来说
如果分为
T A C等档位显示的话
一般要求在A档测定记录后要调节到T档
才能打开样品池盖
可是对于大多数能够同时显示
T和A的值的仪器来说
则无需调换档位
测定结束后直接开盖取出样品即可
实际使用的过程中
一定要先认真阅读仪器的使用说明书
将操作与我们讲过的基本原理相对应
理解每一步操作背后的意义和原理
才能快速准确的完成测定工作
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-第二节 本课程评分标准
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-第五节 本课程教学团队介绍
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-第一节 移液器的设计原理和使用规范
-第二节 移液器的操作要点
--移液器的操作要点
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--移液器的日常校准
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-第二章 移液器的使用 作业
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-第五节 分光光度法测定待测物浓度
--分光光度法的原理
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-第六节 荧光分光光度计的原理和使用规范
-第二章 分光光度计的使用 作业
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-第七节 离心机的设计原理和使用规范
--离心机的操作要点
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-第二章 离心机的使用 作业
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-第三节 其他物质的测定
-第三章 物质的定量测定 作业
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-第二节 菠萝蛋白酶活力的测定
-第三节 酶米氏常数的测定
-第四章 酶活力的测定 作业
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--蛋白质的盐析提纯
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--盐析操作注意事项
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-第二节 核酸的提取和检测
--第五章 第二节 核酸的提取 作业
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