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正向移液和反向移液资料文件与下载

正向移液和反向移液

我们已经在《移液器的原理和使用规范》这一课中学习过移液器的设计原理，我们知道：一般的操作是从第一停点开始吸取液体，也就是我们已经学过的操作规范：先将控制钮从顶端按至第一停点，然后从第一停点抬手吸液体到位置最高时，吸入的液体等于我们计划转移的体积，打出液体的时候推至第二停点可将全部液体推出。这是最常用的移液方法，我们称之为“正向移液”。那么问题来了：开始吸液体的时候从第二停点开始是不是可以呢？

那么如果从第二停点开始吸液体，我们吸入吸头的液体就会多于计划转移的体积，这时候我们可以在转移液体时，依旧从顶点按到第一停点，只打出计划体积的液体，剩余的液体留在吸头里，同样可以达到准确转移的目的，这种方法，我们称之为“反向移液”；

这两种方法都可以准确转移液体，但反向移液法在实际操作过程中会造成一定的试剂浪费，而且因为吸取液体的体积高于计划转移的体积，液体在吸头中的位置较高，易造成对移液器或转移液体的污染，所以大多数时候，我们转移普通溶剂还是要用正向移液法；

那么什么时候会用到反向移液法呢？一般来说，转移高粘度液体、易气泡液体和易挥发液体的时候推荐采用反向移液法。不仅如此，对于高粘度液体，最好采用预润湿吸液减少吸头内壁的吸附，并且减慢吸放液速度，尽可能保证准确转移液体，而对于易挥发液体来说，则需要预润湿吸液的方法，使挥发气体在吸头内预先达到平衡。需要特别说明的是，尽可能不要用移液器转移挥发性或腐蚀性液体，避免对移液器内部部件造成损伤。

下一节:移液器的日常校准

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基础生物化学实验课程列表：

第一章课前须知

-第一节基础生物化学实验学什么？

--《生物化学实验》学什么？

--《生物化学实验》学什么？

-第二节本课程评分标准

--本课程评分标准

-第三节如何更好的完成本课程的学习？

--不同需求的同学如何学习本课程？

--不同需求的同学如何学习本课程？

-第四节生化实验室安全注意事项

--生化实验室安全注意事项

--生物化学实验室安全注意事项

-第五节本课程教学团队介绍

--本课程团队介绍

--本课程教学团队介绍

-第六节课前须知作业

--我对本课程的了解和疑惑

-第一章课前须知作业

第二章生命科学三大必备仪器的使用

-第一节移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

-第二节移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--正向移液和反向移液

--正向移液和反向移液

--移液器的日常校准

--移液器的日常校准

--移液器的操作中易错点

--移液器操作中的易错点

--Eppendorf移液器操作手册

-第二章移液器的使用作业

--第二章移液器的使用作业

--请用思维导图或表格的形式列举移液器的使用要点

-第三节分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

-第四节分光光度计的操作要点

--不同分光光度计的设计和操作差异

--不同分光光度计的设计和操作差异

--分光光度计的操作要点

--分光光度计的操作要点

-第五节分光光度法测定待测物浓度

--分光光度法的原理

--分光光度法的原理

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

-第六节荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的设计原理和使用规范

-第二章分光光度计的使用作业

--第二章分光光度计的使用作业

-第七节离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的操作要点

--离心机的操作要点

-第二章离心机的使用作业

--第二章离心机的使用作业

-如何养成规范使用仪器设备的好习惯

第三章物质的定量测定

-第一节蛋白质的定量测定

--学习蛋白质定量测定的意义

--学习蛋白质定量测定的意义

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质的浓度的实验指导

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--双缩脲法测定蛋白质的浓度的实验原理

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验指导

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验指导

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质浓度的实验指导

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质浓度的实验指导

-第三节其他物质的测定

--核黄素荧光光度定量测定法

--核黄素（VB2）荧光光度定量测定法

-第三章物质的定量测定作业

--第三章物质的定量测定作业

-你现在能独立设计一个生物分子的定量测定实验吗？

第四章酶活力的测定

-第一节酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

-第二节菠萝蛋白酶活力的测定

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作

--菠萝蛋白酶比活力的测定（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶比活力的测定（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶比活力测定的实验指导（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力的计算（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力的计算（Folin酚法）

-第三节酶米氏常数的测定

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数测定的实验指导

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的实验指导（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算（Folin酚法）

-第四章酶活力的测定作业

--第四章酶活力的测定作业

-查阅一个你感兴趣的酶，想想怎么测？

第五章物质的分离纯化

-第一节蛋白质分离纯化的常见技术

--基因工程生产人血清白蛋白之路

--基因工程生产人血清白蛋白之路

--蛋白质分离的一般原则和基本步骤

--蛋白质分离的一般原则和基本步骤

--蛋白质的盐析提纯

--蛋白质的盐析提纯

--盐析操作注意事项

--盐析操作注意事项

--蛋白质的有机溶剂和等电点沉淀

--蛋白质的有机溶剂和等电点沉淀

--离子交换层析

--离子交换层析

--蛋白质的超速离心、透析和超滤

--蛋白质的超速离心、透析和超滤

--凝胶过滤层析的原理及凝胶颗粒选择

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--凝胶过滤层析的操作过程和注意事项

--凝胶过滤层析的操作过程和注意事项

--IMAC亲和层析

--IMAC亲和层析

--IMAC亲和层析技术的基本步骤

--IMAC亲和层析技术的基本步骤

--第五章第一节蛋白质的分离纯化作业

-第二节核酸的提取和检测

--核酸的制备原理及基本步骤

--核酸的制备原理及基本步骤

--质粒DNA的提取制备

--质粒DNA的提取制备

--拟南芥叶片基因组DNA提取

--拟南芥叶片基因组DNA提取

--紫外分光光度法测定核酸

--紫外分光光度法测定核酸

--第五章第二节核酸的提取作业

-你想得到什么分子，如何纯化呢？

第六章利用电泳对生物大分子进行检测

-第一节核酸琼脂糖凝胶电泳

--核酸琼脂糖凝胶电泳的原理

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--核酸琼脂糖凝胶电泳的染色及结果分析

--核酸琼脂糖凝胶电泳的染色及结果分析

--核酸琼脂糖电泳-作业

-第二节聚丙烯酰胺凝胶电泳

--SDS-PAGE电泳的原理

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--SDS-PAGE电泳凝胶的染色

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--利用SDS-PAGE计算蛋白质的分子质量

--利用SDS-PAGE计算蛋白质的分子质量

--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--SDS-PAGE的原理和操作-作业

-除了电泳，还有什么用于生物大分子鉴定的方法？

第七章期末考试

-《基础生物化学实验》期末考试

-请留下你对本课程的宝贵建议

正向移液和反向移液笔记与讨论

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