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不同分光光度计的设计和操作差异

我们在前面的课程中已经学过分光光度计的基本原理和操作流程，实际工作中，根据分光光度计仪器部件组成的设计又可分为很多种类，

学生实验中常用的为单光路分光光度计，其基本构造就是我们前面讲过的光源、单色器、吸收池、光电检测器、显示器等。

第二章第四节单光路分光光度计示意图.png

此外还有双光路分光光度计，在双光路分光光度计中，单色光同时通过样品和参比，经过系统计算直接扣除参比的影响，可实时、精确的测定样品吸光度值，而不用像单光路分光光度计那样手动扣除参比影响。

第二章第四节双光路分光光度计示意图.png

而对于仪器调零的操作，不同公司生产的仪器在设计上也有所不同，我们前面演示的722N分光光度计，将样品池盖打开的时候，会有挡板放下挡住光路，此时应该没有光被检测器检测到，所以调节透光率T=0%。

还有一些公司生产的分光光度计，采用将挡光块放在光路上挡住光线的方法，来调节T=0%。

对于紫外分光光度计来说，内部一般安装氘灯作为紫外光源，同时安装钨灯作为可见光光源，所以会涉及到光源切换的问题，有些公司的仪器会单独外置氘灯的开关，使用时需要先开总电源打开钨灯，如需测紫外光再打开紫外光源开关；

而有的公司设计的仪器则没有另外设置氘灯开关，在调节波长的过程中，调到紫外区由仪器自动切换光源。

而波长的调节，有的仪器会采用旋钮调节的方式，这种设计要求视线与波长指针和刻度保持一条线，才能保证波长准确；直接键盘输入的分光光度计则很简便，按说明书要求输入即可。

大多数分光光度计的设计光路都是左右方向，但是也有的紧凑型分光光度计光路为前后方向，因此，使用仪器测定前务必观察好光路方向，将比色杯光面置于光路上。

对于大多数教学用分光光度计来说，如果分T、A、C等档位显示的话，一般要求在A档测定记录后调节到T档才能打开样品池盖，而对于大多数同时显示T和A值的仪器来说，则无需调换档位，测定结束后直接开盖取出样品即可。

实际使用中一定要先认真阅读仪器的使用说明书，将操作与我们讲过的基本原理相对应，理解每一步操作背后的意义和原理，才能快速、准确的完成测定工作。

下一节:分光光度计的操作要点

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基础生物化学实验课程列表：

第一章课前须知

-第一节基础生物化学实验学什么？

--《生物化学实验》学什么？

--《生物化学实验》学什么？

-第二节本课程评分标准

--本课程评分标准

-第三节如何更好的完成本课程的学习？

--不同需求的同学如何学习本课程？

--不同需求的同学如何学习本课程？

-第四节生化实验室安全注意事项

--生化实验室安全注意事项

--生物化学实验室安全注意事项

-第五节本课程教学团队介绍

--本课程团队介绍

--本课程教学团队介绍

-第六节课前须知作业

--我对本课程的了解和疑惑

-第一章课前须知作业

第二章生命科学三大必备仪器的使用

-第一节移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

--移液器的设计原理和使用规范

-第二节移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--移液器的操作要点

--正向移液和反向移液

--正向移液和反向移液

--移液器的日常校准

--移液器的日常校准

--移液器的操作中易错点

--移液器操作中的易错点

--Eppendorf移液器操作手册

-第二章移液器的使用作业

--第二章移液器的使用作业

--请用思维导图或表格的形式列举移液器的使用要点

-第三节分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

--分光光度计的设计原理和使用规范

-第四节分光光度计的操作要点

--不同分光光度计的设计和操作差异

--不同分光光度计的设计和操作差异

--分光光度计的操作要点

--分光光度计的操作要点

-第五节分光光度法测定待测物浓度

--分光光度法的原理

--分光光度法的原理

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

--分光光度法测定物质浓度的实验设计

-第六节荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的原理和使用规范

--荧光分光光度计的设计原理和使用规范

-第二章分光光度计的使用作业

--第二章分光光度计的使用作业

-第七节离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的设计原理和使用规范

--离心机的操作要点

--离心机的操作要点

-第二章离心机的使用作业

--第二章离心机的使用作业

-如何养成规范使用仪器设备的好习惯

第三章物质的定量测定

-第一节蛋白质的定量测定

--学习蛋白质定量测定的意义

--学习蛋白质定量测定的意义

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质浓度的实验原理

--紫外法测定蛋白质的浓度的实验指导

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的操作方法

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--紫外法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--双缩脲法测定蛋白质的浓度的实验原理

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验指导

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--双缩脲法测定蛋白质浓度的实验数据计算

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质浓度的实验原理和操作方法

--Lowry法测定蛋白质的浓度的实验指导

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--Bradford法测定蛋白质浓度的实验指导

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质的浓度的实验原理和操作方法

--BCA法测定蛋白质浓度的实验指导

-第三节其他物质的测定

--核黄素荧光光度定量测定法

--核黄素（VB2）荧光光度定量测定法

-第三章物质的定量测定作业

--第三章物质的定量测定作业

-你现在能独立设计一个生物分子的定量测定实验吗？

第四章酶活力的测定

-第一节酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

--酶活力测定的常用方法

-第二节菠萝蛋白酶活力的测定

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力测定的原理和操作

--菠萝蛋白酶比活力的测定（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶比活力的测定（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶比活力测定的实验指导（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力的计算（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶活力的计算（Folin酚法）

-第三节酶米氏常数的测定

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数的测定和计算

--淀粉酶米氏常数测定的实验指导

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的原理和操作（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数测定的实验指导（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算（Folin酚法）

--菠萝蛋白酶米氏常数的计算（Folin酚法）

-第四章酶活力的测定作业

--第四章酶活力的测定作业

-查阅一个你感兴趣的酶，想想怎么测？

第五章物质的分离纯化

-第一节蛋白质分离纯化的常见技术

--基因工程生产人血清白蛋白之路

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--蛋白质分离的一般原则和基本步骤

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--蛋白质的盐析提纯

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--盐析操作注意事项

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--蛋白质的有机溶剂和等电点沉淀

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--离子交换层析

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--蛋白质的超速离心、透析和超滤

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--凝胶过滤层析的原理及凝胶颗粒选择

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--凝胶过滤层析的操作过程和注意事项

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--IMAC亲和层析

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--IMAC亲和层析技术的基本步骤

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--第五章第一节蛋白质的分离纯化作业

-第二节核酸的提取和检测

--核酸的制备原理及基本步骤

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--质粒DNA的提取制备

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--拟南芥叶片基因组DNA提取

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--紫外分光光度法测定核酸

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--第五章第二节核酸的提取作业

-你想得到什么分子，如何纯化呢？

第六章利用电泳对生物大分子进行检测

-第一节核酸琼脂糖凝胶电泳

--核酸琼脂糖凝胶电泳的原理

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--核酸琼脂糖凝胶电泳的染色及结果分析

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--核酸琼脂糖电泳-作业

-第二节聚丙烯酰胺凝胶电泳

--SDS-PAGE电泳的原理

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--SDS-PAGE电泳凝胶的染色

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--利用SDS-PAGE计算蛋白质的分子质量

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--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理及相关特性

--SDS-PAGE的原理和操作-作业

-除了电泳，还有什么用于生物大分子鉴定的方法？

第七章期末考试

-《基础生物化学实验》期末考试

-请留下你对本课程的宝贵建议

不同分光光度计的设计和操作差异笔记与讨论

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